Для электрофореза раствор цинка: цены, описание, инструкция, — 66.ru

Электрофорез с цинком

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 96-127, 95-873 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, пр-т. Ленина, 85А

+7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Доваторцев, 52А:

355037, г. Ставрополь, ул. Доваторцев, 52А

8 (8652) 316-845 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Пригородная, 193:

355026, г. Ставрополь, ул. Пригородная, 193

8 (8652) 316-843 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Электрофорез с цинком и медью: показания, методика и результаты

Лечебный электрофорез – это метод физиотерапии, который основан на воздействии электрического тока на организм с целью получения терапевтического эффекта. Электрофорез с цинком назначается преимущественно в лечении воспалительных процессов. Воздействие на пораженный участок электрическим полем – это один из способов введения в организм медикаментозного средства наряду с инъекциями и пероральным приемом.

СодержаниеСвернуть

• Понятие и актуальность метода
• Электрофорез с медью и цинком
• Фармакология
• Механизм действия
• Показания и противопоказания
• Методика
• В домашних условиях
• Эффективность
• Побочные эффекты
• Альтернатива электрофорезу
• Можно ли применять лекарства без физиотерапии?
• Заключение

Понятие и актуальность метода

Суть метода заключается в перемещении мелких частиц лекарственного вещества через кожу или слизистые оболочки в организм пациента. Это перемещение осуществляется под действием электрического поля.

В отечественной медицине используются аппараты, которым более 50 лет. Один из них – «ПоТок». Однако существуют и современные модификации этого устройства. Сейчас «ПоТок» – это видоизмененный прибор новой линии, соответствующий всем нормам и выпускающийся с 2003 года.

Методика электрофореза используется не только в медицине. Химическая промышленность – сфера, где действие электрического поля применяется для разделения и синтеза элементов в молекулярной биологии и химии. Кроме того, электрофорез практикуется в эстетической медицине.

Электрофорез с медью и цинком

Физиотерапия с этими химическими элементами чаще всего используется в лечении гинекологических заболеваний. Электрофорез с медью на низ живота рекомендуется при заболеваниях, сопровождающихся воспалением.

Лечебный электрофорез с медью имеет свои преимущества:

• Эффективные дозы лекарств, которые имеют малую концентрацию.
• В организме создается «депо» элементов, введенных с помощью электрического тока. Со временем они накапливаются и оказывают долговременное действие.
• Ионы – химическая форма средства, которая считается наиболее активной.
• Возможность исключительно местного воздействия на ткани, без распространения вещества по току крови и лимфы.
• Электрофорез с цинком и медью можно вводить в места, где местная циркуляция крови нарушена.
• При электрофорезе лекарственное средство не разрушается, как при введении его перорально.
• Слабое воздействие электрического тока стимулирует реактивные силы организма.

Фармакология

Медикаментозные средства вводятся в организм через анатомические структуры, которые располагаются на коже – сквозь потовые и сальные железы. Они поступают в виде негативно или позитивно заряженных ионов. При этом процент лекарства не превышает 10% от всей дозы, что вводится.

Медикамент не сразу поступает в местное кровяное русло, а лишь спустя минимум 24 часа после проведения процедуры. Основная масса лекарства сначала задерживается в природных фильтрах организма – коже и подкожно-жировой прослойке.

На этом основывается долговременное действие метода: активация метаболизма и устранение воспаления продолжается после электрофореза.

Механизм действия

Электрический ток и электромагнитное поле заставляют ионы перемещаться. Ток воздействует на ткань непрерывно, а импульсные потоки двигают частицы вдоль силовых линий. В методе используются отрицательные и позитивные электроды. При этом негативно заряженные ионы отталкиваются от такого же электрода, то же касается и положительных ионов.

Антисептическое воздействие на ткани – главная функция солей меди и цинка. При маленьких дозах эти элементы просто не дают бактериям расти, а при больших – бактерии уничтожаются. Такой механизм действия обусловлен особенностями солей: их органические соединения блокируют жизненные процессы бактерий, тормозят их размножение и вызывают гибель.

Кроме бактерицидного свойства, медь и цинк при местном применении способствуют раздражению кожных покровов. Результат – усиленный приток крови, большее поступление питательных веществ и усиление регенерации тканей.

Показания и противопоказания

Заболевания, при которых показан электрофорез:

• ЛОР-органы: гайморит, отит, фронтит и ринит.
• Дыхательная система: пневмония, плевриты, хронический и острый бронхит.
• Пищеварительная система: язвы, гастрит, воспаление поджелудочной железы, холецистит.
• Сердечно-сосудистая система: атеросклероз, эндартериит, варикозная патология вен.
• Мочеполовая система: уретрит, простатит, эндометриоз, цистит.
• Кожа: ожоги, язвы, дерматит, чесотка, карбункулы и фурункулы.
• Заболевания глаз, периферической нервной системы.
• Бесплодие у женщин.

В исключительных ситуациях электрофорез показан детям грудного возраста при таких состояниях:

• Ожоги.
• Заболевания уха, горла и носа.
• Болезни опорно-двигательного аппарата.

Существуют абсолютные и относительные противопоказания к осуществлению процедуры. К абсолютным (значит делать электрофорез нельзя вообще) относятся:

• индивидуальная непереносимость тока;
• высокая температура тела;
• нарушение свертываемости крови;
• менструации;
• декомпенсированная сердечно-сосудистая недостаточность;
• установленный кардиостимулятор;
• психические расстройства: шизофрения и биполярно-аффективное расстройство, психотические состояния.

Относительные:

• беременность;
• гипертоническая болезнь.

Методика

Лекарственное средство накладывается перпендикулярно электрическому току: между приложенным электродом и кожей. Дальнейший способ введения лекарства зависит от вида цинкового и медного электрофореза:

• Гальванический. Марлевая повязка пропитывается медикаментом и накладывается на участок тела с противоположной стороны воспаления. Это необходимо для создания электрического поля. В марлю вкладывают электроды, которые сверху накрывают пленкой. К примеру, электрофорез с цинком на низ живота. Для лучшего эффекта дополнительно можно нанести мазь или крем, содержащие медь и цинк.
• Ванночковый. В емкость со встроенными электродами выливается раствор, вмещающий в себе цинк и медь. Задача пациента – погрузить в эту ванну пораженную часть тела.
• Полостной. Один электрод и сульфат цинка для электрофореза вводятся в полость органа. Второй электрод располагается на поверхности кожи, образуя поле, в котором перемещаются ионы цинка или меди.
• Внутритканевой. Лекарство пациент выпивает или его вводят путем инъекции, после чего катоды и аноды размещают на пораженном участке.

В домашних условиях

Процедуру можно выполнять в домашних условиях. Для начала нужно купить аппарат для физиотерапии, раствор цинка для электрофореза и проконсультироваться со своим лечащим врачом. В некоторых случаях для первого раза можно нанять медсестру, которая покажет, как правильно пользоваться устройством.

Эффективность

Электрофорез с медью и цинком оказывает на организм больного такие эффекты:

• угнетение воспаления;
• снятие местных отеков;
• устранение болей;
• влияет на мышечный тонус, нормализуя его;
• стабилизация кровотока и ускорение обмена веществ, что приводит к скорому заживлению пораженных тканей;
• общеукрепляющее действие, стимуляция местного иммунитета.

Побочные эффекты

Случаи побочных эффектов не установлены. Несмотря на это, организм человека может иметь индивидуальную непереносимость цинка или меди, отчего может возникнуть аллергическая реакция.

Альтернатива электрофорезу

Фонофорез – метод, в котором используются ультразвуковые волны. По количеству преимуществ фонофорез не уступает электрическому варианту физиолечения. Плюсом ультразвуковых волн является меньшее количество противопоказаний. Однако их минус – меньший спектр применяемых лекарств.

Можно ли применять лекарства без физиотерапии?

Медь и цинк в составе медикаментов могут применяться без физиотерапии. Эти элементы есть в витаминных добавках, биологически активных пищевых веществах и мазях.

Заключение

Физиотерапия с цинком и медью, несмотря на то что ее проводят уже больше 50 лет, используется и в современной медицине при многих заболеваниях органов дыхания, пищеварительной, нервной, мочеполовой и сердечно-сосудистой систем. Основная задача физиотерапии – торможение воспалительных процессов, а цинка и меди – вызвать гибель бактерий в очаге болезни. Электрофорез можно проводить дома, предварительно купив медицинское устройство и лекарственные средства.

Следующая статья в этой рубрике: Использование озонотерапии для помощи больным суставам

Протокол окрашивания цинком — Conduct Science

Протокол окрашивания цинком

Введение

Обратимое окрашивание цинком — это широко используемый метод окрашивания для обнаружения белков, фракционированных в полиакриламидных гелях или денатурированных гелях с ДСН. Обратное окрашивание цинком использует способность биополимеров связывать Zn2+ и способность имидазола реагировать с несвязанным Zn2+ с образованием нерастворимого имидазолата цинка (ZnIm2).

Этот цинк-имидазольный комплекс осаждается вдоль поверхности геля, образуя темно-белый окрашенный фон, на котором визуализируются неокрашенные полосы биополимера.

Метод обратим; следовательно, он снижает риск модификации белков, позволяя элюировать обратно окрашенные белки, используемые в биологических и ферментативных анализах. Белки, идентифицированные с помощью цинкового окрашивания, также могут быть быстро обработаны для микросеквенирования или масс-спектрометрического анализа.

Свойства

• Температура плавления: 68 K (419,53 °C, 787,15 °F)
• Температура кипения: 1180 K (907 °C, 1665 °F) 14 г/см3
• Теплота плавления: 7,32 кДж/моль
• Теплота парообразования: 115 кДж/моль
• Молярная теплоемкость: 25,470 Дж/(моль·К)

Принцип

взаимодействие ионов цинка (Zn ²⁺ ) с биомолекулами и белками.

Краситель осаждает осадки металлического цинка в геле, что делает гель непрозрачно-белым, а покрытие белков додецилсульфатом натрия предотвращает связывание красителей с белками.

Создает негативное изображение, позволяющее обнаруживать четкие белковые полосы на полупрозрачном белом полиакриламидном фоне.

Протокол (Fernandez-Patron C. et al. 1992)

Окрашивание

1. Кратковременно промойте гель бидистиллированной водой.
2. Встряхивайте гель в 0,2М имидазоле в течение 5-10 минут.
3. Утилизируйте раствор имидазола.
4. Встряхните гель в 0,3 М ZnCl ₂ в течение 30 секунд.
5. Вылейте растворы цинка и промойте гель двойной перегонкой Н ₂
6. Визуализируйте гель на темной поверхности.

Примечание. Белковые полосы кажутся прозрачными на белом фоне.

Обесцвечивание

1. Встряхивайте гель в 2% растворе лимонной кислоты в течение 5-10 минут. Смените раствор 2-3 раза.
2. Гель можно использовать для иммуноблоттинга.

Обратимое окрашивание белков цинком (Sasse. & Gallagher., 2003)

Окрашивание гелем:

1. Поместите полиакриламидный гель в пластиковый контейнер, содержащий 10 гелевых объемов окрашивающего раствора E-Zinc.
2. Инкубировать при осторожном встряхивании в течение 10 минут.
3. Замените раствор E-цинка 10 объемами геля проявочного раствора E-цинка.
4. Инкубируйте в течение 2 минут при легком встряхивании.
5. Замените раствор проявителя E-цинка 10 гелевыми объемами дистиллированной воды.

Промывка геля:

1. Инкубируйте гель при осторожном встряхивании в течение 60 минут.
2. Сменить воду в контейнере.
3. Визуализируйте полосы белка на темной поверхности.

Солюбилизация осадка:

1. Инкубируйте гель с 10 объемами геля раствора ластика E-Zinc в течение 5-10 минут.
2. Промойте гель дистиллированной водой.

Приложения

1. Обнаружение и очистка капсидного белка L1 в E.coli (Javanzad. et al. 2013)

Главный капсидный белок L1 представляет собой важную молекулу, которая собирается в вирусоподобные частицы вируса папилломы человека (ВПЧ). В ходе исследования рекомбинантный HPV L1 экспрессировали и очищали с использованием системы E. coli.

Белок L1 был экспрессирован в слитой форме в системе индуцируемой экспрессии. Рекомбинантный слитый белок GST-L1 был фракционирован как белок с молекулярной массой 82 кДа с помощью SDS-PAGE. Эти белки L1 были очищены Zn ⁺²  обратное окрашивание.

Затем наличие полосы 82 кДа для белка GST-L1 было подтверждено с использованием моноклонального антитела Camvir 1 против HPV16 L1. Обратное цинковое окрашивание оказалось чувствительным и полезным методом окрашивания для обнаружения вирусных белков.

2. Получение информации о последовательности белка (Castellanos-Serra. & Hardy., 2001)

Окрашивание имидазолом-цинком является чувствительной процедурой для обнаружения белка на мембране после переноса по сравнению с амидо-черным красителем.

Белки, фракционированные в SDS-PAGE и идентифицированные с помощью окраски цинком, затем анализируют для иммуноблоттинга. Это позволяет получить информацию о последовательности из количества белка, которое было обнаружено на геле, но недостаточно для обнаружения на мембране после блоттинга.

3. Восстановление нуклеиновых кислот

Окрашивание имидазолом-цинком также используется для обнаружения и неразрушающей микроочистки нуклеиновых кислот в экспериментах с рекомбинантной ДНК.

Нуклеиновые кислоты клонируют, расщепляют эндонуклеазами рестрикции, амплифицируют с помощью ПЦР, радиоактивно метят, секвенируют и затем анализируют с помощью масс-спектрометрии. Предел обнаружения метода аналогичен пределу обнаружения УФ-облучения dsDNA, окрашенной бромистым этидием.

Применимость этого отрицательного окрашивания для нуклеиновых кислот позволяет проводить анализ различных образцов в широком диапазоне молекулярных масс (до 10 т.п.н.).

4. Протеомика

Окрашивание цинком широко используется для подготовки образцов для высокочувствительного масс-спектрометрического анализа белковых гидролизатов. Он был применен в протеомике для обнаружения на одномерных или двумерных гелях.

Было обнаружено, что обратное окрашивание цинком превосходит окрашивание серебром из-за эффективного извлечения триптических пептидов. Белки могут быть успешно очищены и количественно определены с помощью окрашивания цинк-имидазолом для молекулярного и протеомного анализа.

Меры предосторожности

• При работе с цинковым пятном надевайте соответствующие перчатки и лабораторный халат.
• Продолжительная инкубация в растворе цинка вызывает неизбирательное окрашивание поверхности геля, что приводит к неправильному обнаружению белковых полос.
• Не сушите гели, окрашенные имидазолом цинка.
• Метод окрашивания основан на присутствии SDS в геле; поэтому он не подходит для нативных гелей.
• Используйте гели толщиной 1,5 мм, чтобы получить ярко-белый фон для хорошего контраста.

Достоинства и ограничения

• Техника окрашивания цинком основана на селективном осаждении образования белого имидазол-цинкового комплекса вместе с гелем. Пятно известно своей высокой чувствительностью, простотой использования и экономичностью.
• Обратное цинковое окрашивание улучшает обнаружение за счет обнаружения необнаруженных белков в гелях, уже окрашенных кумасси синим.
• Метод также можно использовать для идентификации гликолипидов и вирусных белков.
• Метод имеет широкий спектр применений в области протеомики, молекулярной биологии и спектрометрии.
• Этот метод менее чувствителен, чем методы окрашивания кумасси и коллоидного кумасси.

Ссылки

1. Fernandez-Patron C. et al. (1992), Biotechniques 12:564-573
2. Sasse., & Gallagher., RS (2003). Окрашивание белков в гелях. Curr Protoc Mol Biol, Глава 10: Раздел 10.6.
3. Castellanos-Serra., & Hardy., E. (2001). Обнаружение биомолекул в гелях для электрофореза с солями имидазола и цинка II: десятилетие исследований. Электрофорез, 22(5), 864-73.
4. Джаванзад., А. Болхассани., Ф. Дустдари., М. Хашеми. и Мовафаг., А. (2013). Метод обратного окрашивания полиакриламидных гелей имидазол-цинковыми солями для обнаружения и очистки капсидного белка L1 в E.coli. Журнал парамедицинских наук (JPS), 4 (2).

Связанные статьи

Основы лабораторной работы —

Инвертированный световой микроскоп: подробное руководство для студентов-микробиологов и лаборантов

Микроскоп является важным инструментом, который используется в большинстве лабораторий. Мы бы ничего не знали об окружающих нас микроорганизмах, если бы этот невероятный прибор делал

1 января 2017 г.

Лабораторные основы —

Полное руководство по дозаторам

Нужны пипетки для вашей лаборатории? Щелкните здесь Будучи партнером Amazon, Conductscience Inc получает доход от соответствующих покупок У современной пипетки яркая история

5 декабря 2017 г.

Сделай сам

DIY Home CRISPR: подробное руководство

Введение CRISPR — это аббревиатура для коротких палиндромных повторов, регулярно расположенных кластерами, которые являются важной частью бактериальной защитной системы и образуют основания

13 декабря 2017 г.

Лабораторные методы

Методы идентификации животных

Научные исследования, доклинические исследования и фармакологические исследования используют в качестве субъектов ряд лабораторных животных. Поэтому правильная идентификация животных становится необходимостью. Методы идентификации животных, кроме

8 июня 2018 г.

Цинк-имидазол положительный: новый метод обнаружения ДНК после электрофореза на агарозных гелях, не нарушающий биологическую целостность ДНК

. 1996 янв.; 17(1):26-9.

doi: 10.1002/elps.1150170105.

Е Харди ¹ , AE Sosa, E Pupo, R Casalvilla, C Fernandez-Patron

принадлежность

• ¹ Опытный завод, Центр генной инженерии и биотехнологии, Гавана, Куба.

• PMID: 8907513
• DOI: 10.1002/элпс.1150170105

Э Харди и др. Электрофорез. 1996 Январь

. 1996 янв.; 17(1):26-9.

doi: 10.1002/elps.1150170105.

Авторы

Е Харди ¹ , А. Э. Соса, Э. Пупо, Р. Касалвилла, К. Фернандес-Патрон

принадлежность

• ¹ Опытный завод, Центр генной инженерии и биотехнологии, Гавана, Куба.

• PMID: 8907513
• DOI: 10. 1002/элпс.1150170105

Абстрактный

Нуклеиновые кислоты, разделенные с помощью гель-электрофореза, обычно выявляют в гелевой матрице при окрашивании бромистым этидием с последующим облучением геля ультрафиолетовым (УФ) светом. Когда отделенные нуклеиновые кислоты должны быть выделены для дальнейшей характеристики или использования, эта методология неприемлема (i) из-за того, что вызывается значительное количество химических повреждений молекул нуклеиновых кислот, что серьезно снижает их биологическую активность, и (ii) из-за вреда для здоровья. опасности из-за кумулятивного прямого контакта с бромидом этидия и воздействия УФ-излучения. В качестве альтернативы, для подготовительных целей, описан новый нетоксичный метод обнаружения с использованием солей цинка и имидазола. После электрофореза гель сначала промывают дистиллированной водой, чтобы по существу удалить оставшиеся реагенты для электрофореза, затем инкубируют в 40 мМ сульфате цинка в течение 10 минут, чтобы обеспечить связывание Zn2+ с ДНК, а затем промывают дистиллированной водой для удаления несвязанного Zn2+ из областей геля. лишенный ДНК. При вымачивании в 0,2 М имидазоле в течение нескольких минут комплексы цинк-ДНК визуализируются как темно-белые (положительные) окрашенные полосы на слегка непрозрачном фоне. Чувствительность аналогична бромистому этидию. Гели можно хранить в дистиллированной воде в течение нескольких месяцев без потери окрашивания. После хелатирования цинка, т.е. с ЭДТА можно количественно восстановить химически интактную и биологически активную ДНК из гелей, как показали эксперименты по реэлектрофорезу и трансформации.

Похожие статьи

• Отрицательное окрашивание цинк-имидазолом нуклеиновых кислот, разделенных гель-электрофорезом.

  Hardy E, Pupo E, Casalvilla R, Sosa AE, Trujillo LE, López E, Castellanos-Serra L. Харди Э. и др. Электрофорез. 1996 октября; 17 (10): 1537-41. doi: 10.1002/elps.1150171006. Электрофорез. 1996. PMID: 8957176

• Чувствительное обратное окрашивание бактериальных липополисахаридов на полиакриламидных гелях с использованием солей цинка и имидазола.

  Харди Э., Пупо Э., Кастельянос-Серра Л., Рейес Х., Фернандес-Патрон К. Харди Э. и др. Анальная биохимия. 1997 г., 1 января; 244 (1): 28–32. doi: 10.1006/abio.1996.9719. Анальная биохимия. 1997. PMID:

  03

• Цинк-имидазол-отрицательное окрашивание молекул ДНК хромосомного размера в агарозных минигелях.

  Леон К., Риверон А.М., Аренсибия О., Лопес-Кановас Л. Леон К. и др. Анальная биохимия. 2010 июль 1; 402 (1): 96-8. doi: 10.1016/j.ab.2010.02.038. Epub 2010 3 марта. Анальная биохимия. 2010. PMID: 20206118

• «Обратное окрашивание» биомолекул в гелях для электрофореза: аналитические и микропрепаративные приложения.

  Hardy E, Кастельянос-Серра LR. Харди Э. и др. Анальная биохимия.

  No related posts.