Золотистый стафилококк у грудничка в кишечнике: Стафилококк у детей — причины, симптомы, диагностика и лечение стафилококка у ребенка в Москве в детской клинике «СМ-Доктор»
Золотистый стафилококк в кишечнике у грудничка — симптомы и лечение
Простенькие и даже «симпатичные» на взгляд под микроскопом золотистые стафилококки показали себя матерыми борцами за выживание даже в самых сложных внешних условиях.
Всего лишь за 50 лет массовой терапии людей антибиотиками по поводу и без, начиная с самого раннего детского возраста, данные микробы умудрились мутировать столь скоро и разнообразно, что на сегодняшний день стали настоящим бичом родильных домов и педиатрических стационаров.
Симптомы золотистого стафилококка
При заражении стафилококком симптомы у грудничка проявляются довольно скоро.
Золотистый стафилококк, норма которого в организме равна нулю – микроб агрессивный и проявляет себя почти сразу от момента заражения. Если инфицирование произошло в условиях роддома, то уже к 3- 5 суткам от момента рождения ребенок станет мучиться животом. Так как у ребенка на грудном вскармливании стул и в норме может быть достаточно частым (после каждого кормления), то на мысль о стафилококковой инфекции может натолкнуть:
сопутствующая кожная сыпь у ребенка
длительно мокнущий пупок
частые срыгивания фонтаном
появление крови в кале
слизи в кале
желтый, пенистый, обильный и частый стул.
У детей старше месяца при заражении стафилококком клиника может протекать по типу токсикоинфекции или по типу гастроэнтероколита.
Диагностика и лечение золотистого стафилококка
Сразу стоит оговориться, что идея о полном избавлении молодого растущего организма от стафилококка – это утопия.
Золотистый стафилококк живет везде. Он прекрасно переносит:
замораживание,
высушивание,
выпаривание,
облучение ультрафиолетом,
большинство антисептиков, включая любимые всеми хлорсодержащие “Доместосы” и прочие ядохимикаты, реклама которых обещает стопроцентное уничтожение коварных бактерий, но на деле не продвигается дальше повышения аллергизации детей и взрослых.
Так, если для детей первых трех лет жизни более характерны стафилококковые поражения желудочно-кишечного тракта и кожи, то у более старших детей бактерии переселяются в нос, околоносовые пазухи и миндалины, обеспечивая своего хозяина на ближайшие годы бесперебойными синуситами, гнойными соплями и ангинами, постепенно переходящими в хронический тонзиллит.
Терапия инфекционного поражения ЖКТ у детей сводится к трем основным направлениям:
борьбе с инфекцией,
коррекции нарушений водно-электролитного баланса,
организации лечебного питания.
Профилактика заражения золотистым стафилококком
Первичную профилактику заражения золотистым стафилококком в месте проживания ребенка стоит направить по пути:
своевременного проветривания помещений
избавления их от пыли
и периодического мытья моющихся поверхностей обычным раствором хозяйственного мыла.
Предметы для детского питания — бутылочки и соски должны мыться и кипятиться.
Так как, к большому сожалению, высокий процент взрослых имеет хронические стафилококковые инфекции ротоглотки, носа, пазух и зубов, то на первый месяц контакты ребенка с посторонними взрослыми разумно исключить. По тем же соображениям нельзя позволять дедушкам и бабушкам, а также многочисленным родственникам и знакомым целовать ребенка до полугода-года куда-либо, кроме пяточек и ножек.
Что касается маниакальной привычки некоторых мам водить ребенка до года:
на профосмотры без показаний,
водить ребенка на массаж в общую поликлинику,
записывать детей младше года в разные развивающие клубы, где предметы общего пользования не обрабатываются должным образом, а скученность детей и их «текучесть» создает все условия для процветания инфекций.
В наше время мамочкам следует тщательно взвешивать риск и пользу от подобных мероприятий.
Стафилококк – симптомы, виды, причины возникновения и лечение заболевания
Возбудитель стафилококка — Staphylococcus aureus — это грамположительные неподвижные и не образующие спор анаэробные бактерии, которые имеют округлую форму (форму кокка) и растут гроздьями, поэтому фактически название микроорганизма означает “золотая гроздь винограда”.
О заболевании
При выращивании в чашке Петри с кровяным агаром колонии золотистого стафилококка имеют характерный золотисто-желтый цвет, отсюда и соответствующее название. Этот микроорганизм чрезвычайно распространен, им колонизировано около четверти населения планеты.
Обычно он распространяется в носовой полости, паховой области, подмышках и других частях кожи, но в большинстве случаев является нормальной частью кожной флоры человека и не вызывает никаких проблем.
Однако при увеличении количества бактерий на коже, они начинают проникать в глубокие слои кожи через микротрещины и могут привести к кожным инфекциям и абсцессам.
Патологические процессы могут затрагивать не только различные внутренние органы, такие как печень, почки, селезенка, головной мозг, но и мышцы, кости и суставы, что ведет к крайне плачевным последствиям, поэтому при подозрении на наличие инфекции, следует немедленно обратиться к доктору.
Виды стафилококковых инфекций
Выделяют несколько наиболее распространенных видов стафилококков:
● Гемолитический стафилококк.
Чаще всего эта инфекция поражает верхние дыхательные пути, вызывая гнойную ангину, фарингит, тонзиллит, бронхит и другие воспалительные заболевания. Данные бактерии очень устойчивы и трудно поддаются терапии.
● Золотистый.
Данный микроорганизм чрезвычайно устойчив почти ко всем видам антибиотиков пенициллинового ряда, антисептикам, высоким температурам, активным прямым солнечным лучам. Он вызывает различные поражения кожи, такие как экзема, абсцесс, фурункулы, поражения желудочно-кишечного тракта, верхних дыхательных путей, слизистых оболочек, в худшем случае приводит к токсическому шоку.
● Эпидермальный.
Этот микроорганизм обитает на поверхности кожи и слизистых любого здорового человека и не несет никакого вреда. Но, если эта бактерия попадает в кровь человека с ослабленным иммунитетом, что чаще всего происходит при хирургических операциях, использовании неправильно обработанных инструментов, катетеров, происходит заражение крови, что ведет к воспалению внутренней оболочки сердца.
● Сапрофитный.
Несмотря на то, что этот вид наименее опасный, при заражении он приводит к общей интоксикации организма, вследствие выделения опасных токсинов и ферментов в процессе своей жизнедеятельности. Данные микроорганизмы часто становятся возбудителями воспаления уретры и мочевого пузыря. Преимущественно это характерно для женщин в силу анатомических особенностей строения их мочеполовой системы. При отсутствии лечения цистит влечет за собой воспаление почек и проблемы с зачатием ребенка.
Симптомы и формы стафилококка у взрослых и детей
Симптомы, которые ощущает больной, сильно разнятся в зависимости от способа и места инфицирования и состояния иммунитета. Но можно выделить ряд наиболее характерных признаков:
● повышенная температура;
● нагноение порезов, отечность, гнойные высыпания на коже и слизистых, зуд и покраснение глаз;
● отсутствие обоняния и носового дыхания;
● першение в горле, болезненность при глотании, сухой кашель;
Одной из самых распространенных форм стафилококков у взрослых людей является его бессимптомное носительство. Здоровый человек не ощущает каких-либо признаков заболевания до тех пор, пока не появится провоцирующий фактор, который даст толчок развитию болезни.
Для женщин наиболее опасен сапрофитная форма, способная привести к возникновению цистита. Это связано с тем, что уретра женщин располагается очень близко к влагалищу, из-за чего велика вероятность попадания патогенной микрофлоры, в том числе и палочки стафилококка, в уретральный канал, а затем и в мочевой пузырь, вызывая его воспаление.
Так как маленькие дети не обладают окрепшей иммунной системой, риск развития инфекции у ребенка достаточно велик. Причем привести к серьезным осложнениям у детей могут даже те виды стафилококка, которые во взрослом возрасте практически не вызывают проблем. Особенную опасность представляет стафилококк у детей в возрасте до года, так как он с легкостью, в кратчайшие сроки способен распространиться по организму и привести к серьезным последствиям вплоть до летального исхода.
Причины возникновения
Наиболее часто бактерия попадает в организм человека через ранки и микротрещины на коже. Инфекция, проникнув через рану, начинает размножаться в крови, распространяясь по организму и поражая легкие, сердце, мозг, печень, почки, суставы.
При стафилококке заболевания могут быть самые различные такие, как пневмония, менингит, остеомиелит, эндокардит, сепсис и многие другие.
Заражение инфекцией стафилококк может произойти следующими способами:
● Контактно-бытовым путем при использовании личных предметов больного;
● Воздушно-капельным при близком общении с зараженным;
● Фекально-оральным на грязных фруктах, овощах и других продуктах питания, грязных посуде и руках;
● Вертикальным при прохождении ребенка через родовые пути зараженной матери при родах.
● Нередко инфицирование происходит во время хирургического вмешательства через медицинский инструментарий и во время проведения различных манипуляций.
Диагностика
Диагностировать наличие инфекции может только врач по результатам проведенного анализа на стафилококк.
Стоит помнить, что проведение анализа рекомендуется только, если присутствуют симптомы болезни. Наличие бактерии в биологическом материале может означать то, что человек является ее носителем, что само по себе является нормой.
Для анализа осуществляется забор материала из области, где предположительно развивается инфекция. Чтобы обнаружить патологический процесс проводятся несколько тестов, чтобы отследить динамику размножения бактерий. Если их число стремительно увеличивается, можно диагностировать наличие стафилококковой инфекции. Также дополнительный анализ позволит определить конкретный вид инфекции, чтобы доктор смог подобрать персональную схему лечения.
Лечение
Лечение стафилококка может проводиться хирургическим способом при наличии гнойного поражения в области заражения. Также может потребоваться удалить инфицированный имплант, катетер и пр.
В качестве консервативного лечения стафилококка применяют антибиотики, антибактериальные средства в сочетании с иммуномодулирующей терапией. Препараты подбираются с учетом устойчивости стафилококка к большому ряду медикаментов. Большую эффективность показало применение бриллиантового зеленого раствора для обработки зараженных ран.
Какие анализы необходимо сдать
В первую очередь, для определения наличия инфекции сдается анализ на стафилококк.
При заболеваниях дыхательных путей сдают мазок из носо- и-ротоглотки, при цистите — мочу, при расстройстве ЖКТ — кал, при кожных поражениях — соскоб с кожи, а, если есть подозрения на обширное заражение, сдают кровь.
Также перед тем как начать лечение с применением антибиотиков, требуется сдать анализ на резистентность к этим медикаментам.
К какому врачу обращаться
Запущенными случаями заболевания занимается инфекционисту.
Но если у вас только появились подозрения и вы хотите получить точный диагноз, для начала вам следует обратиться к терапевту, с детьми – к педиатру. Доктор проведет диагностику и на основании полученных результатов выпишет вам направление к необходимому врачу.
Профилактика стафилококка
Главной мерой профилактики заражения стафилококком является постоянное соблюдение правил гигиены. После пребывания в общественных местах или контакта с предметами общественного пользования необходимо тщательно мыть руки с мылом. Также важно не контактировать с главным источником заражения стафилококком — больными людьми.
Как предотвратить заболевание
Чтобы предотвратить распространение стафилококка в организме и последующее развитие болезни, необходимо укреплять иммунитет. Для этого рекомендуется вести здоровый образ жизни, заниматься физической активностью, правильно питаться, соблюдая баланс витаминов и всех необходимых микроэлементов, потреблять достаточное количество воды.
Крепкий иммунитет сдержит активность патогенного микроорганизма в пределах безопасной нормы.
Будьте здоровы, дорогие пациенты!
Записаться на прием
Введите пожалуйста свои данные
Стафилококк у грудничка: симптомы и лечение
Стафилококк у новорожденных встречается довольно часто. Эта грамположительная бактерия присутствует в незначительном количестве у каждого человека, никак себя не проявляя. Однако при ослаблении иммунитета золотистый стафилококк у детей может вызвать патологические состояния, требующие госпитализации. Особенностью бактерии «золотистый стафилококк» является выделение сильнейших токсинов, способных породить отравление организма. Каковы симптомы заболевание, и каково лечение стафилококка у грудных детей? Внешние проявления инфекции можно увидеть на фото сайта.
Причины заражения
Чаще всего золотистый стафилококк связан напрямую с инфицированием матери. Довольно часто заражение происходит у ослабленных детей, с дисбактериозами и ОРВИ. Бактерию можно встретить и в грудном молоке, в результате чего происходит заражение.
Также болезни, связанные с обострением стафилококка, появляются как следствие:
несоблюдения правил гигиены и неверного ухода за ребенком;
понижения иммунитета у детей;
контакта с зараженными людьми.
Передача бактерии возможна тремя путями:
через пищу, в результате чего стафилококк у новорожденных может быть обнаружен в кале;
через нестерильное медицинское оборудование, предметы быта, игрушки;
воздушно-капельным путем при контакте с больным.
Симптомы
Стафилококк у грудничка может охватывать весь организм или проявляться локально. Инкубационный период составляет от нескольких часов до 4 суток.
Каждая мама должна знать, как выглядит стафилококковая инфекция на теле, и как проявляется в организме. Если обнаружен стафилококк, симптомы будут следующие:
В носу. Проявляется как обычный ринит, при этом интоксикации нет. Могут наблюдаться отсутствие аппетита, слабость.
На коже. Опухают лимфоузлы, возникают очаги нагноения, фурункулы. На слизистых оболочках может проявляться как ангина, конъюнктивит.
В горле. Чаще всего золотистый стафилококк в горле проявляется после ОРВИ. Основные признаки: гнойные отложения на миндалинах, сильная боль при глотании, опухшие лимфоузлы, высокая температура. При ларингитах, вызванных стафилококками, наблюдаются следующие симптомы: сухой кашель, слабый сиплый голос, лихорадка, стеноз гортани. Чтобы выявить стафилококковую инфекцию, необходимо сдать соответствующие анализы.
Пневмония. Чаще всего является следствием ОРЗ. Проявляется остро, возникают бледность кожных покровов, сонливость, рвота, дыхательная недостаточность. Очень опасный вид заболеваний, который может завершиться летальным исходом.
Во рту. Чаще всего возникает как стоматит с язвами на слизистой щек, неба, на языке.
В кишечнике. Если стафилококк был у матери в молоке, может произойти заражение, и бактерия будет обнаружена в кале у ребенка. Чаще всего золотистый стафилококк у детей в кишечнике может стать причиной гастрита. Инкубационный период в кишечнике длится всего несколько часов. Если стафилококк у грудных детей обнаружен в кале, отмечаются такие признаки заражения: рвота, болевые ощущения в желудке, бледность кожи, слабость, жидкий стул со слизью.
Сепсис. Наиболее тяжелая форма проявления заражения у ребенка. Характеризуется крайне тяжелым состоянием, высыпаниями, сильнейшей лихорадкой. Заболевание протекает вяло, с повышенной температурой.
Как выявить стафилококк?
При подозрении на инфекцию проводится ряд анализов, позволяющих выявить возбудителя заболевания. Диагностика производится методом посева. У мамы обязательно берется грудное молоко для исследования, поскольку инфекция может находиться даже в молоке. Существует 3 основных вида анализа:
при заражении носоглотки – мазок со слизистой горла и носа;
при заражении кишечника – инфекция присутствует в кале, соответственно берется мазок;
при поражении мочеполовой системы – анализ мочи.
В кале и в моче бактерия не должна обнаруживаться. В носу она может присутствовать в незначительной степени. Однако есть норма, которая не опасна, но ее нужно лечить, — 10 в четвертой степени. В противном случае норма перерастет в заболевание.
Чем лечить?
После сдачи анализов встает вопрос, как лечить стафилококк у грудных детей. Делать это должен только врач, иначе мамы могут навредить ребенку.
Медики начинают лечить стафилококк у ребенка в опасных состояниях или при чрезмерной концентрации. Первое, что назначается, — это антибактериальные препараты. Для поддержания иммунитета деткам назначают витамины и продолжают кормить грудным молоком, конечно, если в молоке не содержится бактерия.
Комаровский о стафилококке
Свое мнение о том, как лечить стафилококк у ребенка, высказал известный врач Е.Комаровский. Он акцентирует внимание на том, что бактерия может быть обнаружена в кале и кишечнике любого взрослого и ребенка. Комаровский уверяет: не стоит паниковать, если малыш здоров, и поводов для подозрения болезни нет.
Комаровский просит родителей ребенка не лечить стафилококк, а стараться укреплять иммунитет (конечно, если отсутствие лечения не опасны для жизни и здоровья ребенка). Для этого нужно употреблять витамины, а мамам грудничков питаться полноценно.
Комаровский утверждает, что существует норма количества этих бактерий в организме человека. Если норма значительно превышена, стоит обратиться к врачу и продолжать укреплять иммунитет. Только так можно предотвратить распространение стафилококка.
Что делать, обнаружен стафилококк в кале?
Как только малыш появился на свет, он видит и ощущает огромный мир, который не только прекрасен, но еще и таит в себе опасности. Самой большой из них считаются инфекции. Наиболее распространена и опасна стафилококковая инфекция (внутрибольничная). Это заболевание отличается большой нагрузкой еще на несформировавшийся иммунитет малыша. Более того, оно может спровоцировать серьезные последствия.
Условно патогенный микроб
Как правило, самым распространенным патогеном является золотистый стафилококк, который оказывает свое токсическое действие на кишечник только что появившегося на свет малыша. Помимо этого, он может спровоцировать в неокрепшем организме следующие заболевания: парапроктит, энтероколит, энтерит и пищевую интоксикацию. Более подробнее о действии этой инфекции можно посмотреть тут на baby.dn.ua. Выявить можно стафилококк в кале новорожденного. Свидетельствовать о наличии стафилококковой инфекции у ребенка может рвота, понос, высокая температура и наличие микробов в каловых массах ребенка. Однако, не стоит сразу сильно переживать и паниковать, поскольку данная инфекция относится к условно патогенным и может быть обнаружена абсолютно у любого живущего на нашей планете человека.
Симптоматика и лечение золотистого стафилококка
Итак, клинические симптомы присутствия золотистого стафилококка напоминают дисбактериоз либо острую кишечную инфекцию. Стул ребенка представляет собой кашицеобразную массу водянистой консистенции, в которой может присутствовать слизь. Кроме этого, наблюдаются отсутствие аппетита, слабость и вялость, а также боли в животе. Естественно, что первым признаком станет плач ребенка. Родителям следует особое внимание обратить на появление зеленоватого кала и наличие пенистых образований, а также болей в животике. Данные симптомы характеризую наличие инфекции. Для установления точного диагноза должен быть найден стафилококк в кале новорожденного, либо в его мазке. Лечение стафилококковой инфекции проводится посредством приема лекарственных препаратов. Стоит заметить, что оно направлено на устранение причин заболевания. Чтобы повысить эффект лечения нужно укрепить иммунитет с помощью витаминов, иммуномодуляторов и пробиотиков.
Золотистый стафилококк у грудничка в кале не повод для отчаяния
Мы призываем Вас не заниматься самолечением. Если возникают проблемы со здоровьем – обращайтесь к врачу! Статья написана исключительно в ознакомительных целях, и не является руководством к действию.
Доброго времени суток, дорогие друзья блога Алексея Шевченко «Здоровый образ жизни». В наше время золотистый стафилококк у грудничка в кале обнаруживается очень часто. Данная бактерия способна вызывать очень серьезные заболевания, поэтому не удивительно, что подобное сообщение вызывает у родителей панику. Но отчаиваться нет необходимости. Достаточно соблюдать элементарную осторожность, и здоровью ребенка ничего не будет угрожать.
Золотистый стафилококк завоевывает мир
Микрофлора, населяющая желудочно-кишечный тракт человека, богата и разнообразна. Она начинает формироваться непосредственно в период родов, и продолжает свое развитие и изменение на протяжении всей жизни человека.
Получить необходимый набор полезных бактерий новорожденный может только из внешней среды, так как его собственный кишечник не имеет микрофлоры. Таким образом, мы сталкиваемся с парадоксальной ситуацией: чем выше гигиена окружающей среды, тем медленнее происходит заселение кишечника ребенка, тем беднее состав бактерий, и тем менее они жизнеспособны.
А без них невозможно не только нормальное пищеварение, но даже формирование хорошего иммунитета организма. Существует немало исследований, доказывающих, что огромное распространение аллергии и проблем с желудочно-кишечным трактом в развитых странах связано именно с излишним увлечением чистотой и бесконтрольным использованием мощных бактерицидных средств в быту.
К сожалению, золотистый стафилококк (Staphylococcus aureus или S. aureus) прекрасно себя чувствует, даже находясь под постоянным натиском моющих и дезинфицирующих средств, с которыми не могут справиться полезные бактерии. (Об особенностях данного стафилококка также рассказывает и эта статья.) Поэтому он быстро занимает вакантные места в кишечнике младенцев. Массовые анализы показывают, что более 75% детей первого года жизни оказываются инфицированы S. aureus, а среди детей в возрасте до одного месяца эта доля достигает 65%.
Но следует заметить, что в странах третьего мира, где «естественной» и «полезной» грязи хоть отбавляй, ситуация по золотистому стафилококку ничуть не лучше, а даже хуже.
Золотистый стафилококк – дело семейное
Недавно шведские медики опубликовали результаты интересного исследования по вопросу передачи золотистого стафилококка от матери к новорожденному ребенку. Серия лабораторных анализов проводилась по графику новорожденным в возрасте 1, 2, 4 и 8 недель. По этому же графику анализировалась микрофлора рук, носа и сосков у матери, а также рук и носа у отца.
Исследования показали, что у 90% трехдневных новорожденных микрофлора стула была практически идентична той, которая присутствует на коже матери. При этом если у обоих родителей был выявлен S. aureus, то он обнаруживался в кале новорожденных в 96%, и в 91%, если носителем бактерии являлся только один из родителей.
Но даже если оба родителя не имели золотистого стафилококка, он все равно обнаруживался в кале у 37% новорожденных. Таким образом, заражение бактерией даже новорожденных детей не всегда происходит исключительно через кожу родителей.
Усредненные цифры показывают, что у около 75% детей в возрасте до одного года имеется S. aureus в кале. И это хорошо согласуется с тем, что примерно у 70% взрослых золотистый стафилококк может быть обнаружен в носу и на коже. Кроме того, в последнее время растет количество женщин, у которых данный микроб присутствует во влагалище. В этом случае инфицирование ребенка происходит прямо во время родов.
Но излюбленным местом обитания золотистого стафилококка является грудь в период лактации. Поэтому младенцу чрезвычайно трудно избежать заражения, если он получает материнское молоко.
Бактерия очень легко заселяет кишечник ребенка, так как она не встречает конкуренции. Колонизовать кишечник взрослого ей значительно сложнее: микрофлора там значительно богаче и разнообразнее, и, если так можно выразиться, свободных мест там нет.
Некоторые исследователи утверждают, что в семьях, где есть домашние животные, младенцы заражаются золотистым стафилококком несколько реже. Они связывают это с тем фактом, что животное является богатым источником различных бактерий, и к тому же семьи, где есть собаки, кошки и так далее, реже гипертрофированно увлекаются соблюдением чистоты. Поэтому их дети имеют возможность быстрее обзавестись мощным иммунитетом.
Когда S. aureus становится опасным?
Итак, большинство детей и взрослых являются носителями золотистого стафилококка, и не чувствуют при этом ни малейших неудобств. Это вполне естественно: иммунную защиту пробить не так-то легко, даже очень грозным врагам. Наличие же единичных бактерий никак не влияет на состояние организма, так как их негативное воздействие слишком мало.
Но стоит только иммунитету ослабнуть, как бактерии немедленно начинают интенсивно размножаться. Среди новорожденных и детей первого года жизни наибольшей опасности подвергаются дети:
родившиеся намного раньше положенного срока;
с очень низкой массой тела;
находящиеся на искусственном вскармливании;
которым не обеспечен надлежащий гигиенический уход;
сразу после прививок;
болеющие или недавнее переболевшие.
Почему период сразу после любых прививок представляет собой опасность? Дело в том, что иммунитет не формируется мгновенно. На это требуется несколько дней, в течение которых организм становится особенно уязвимым, ведь сил на синтез новых веществ нужно много.
Любая болезнь или даже небольшая простуда в присутствии золотистого стафилококка могут обернуться сильнейшей бедой.
К самым опасным осложнениям, нередко приводящим к инвалидности и даже к гибели, относятся:
сепсис;
токсический шок;
менингит;
эндокардит;
пневмония;
остеомиелит.
Также присутствие золотистого стафилококка может вызывать синдром Риттера (или синдром ошпаренной кожи), который у новорожденных имеет особенно тяжелое течение.
При этом синдроме кожа сначала покрывается большими болезненными пузырями, которые вскоре отслаиваются и покрываются корками. Как правило, болезнь начинается с центральной части лица в виде мелкой красной сыпи, которая быстро распространяется на крупные кожные складки. Образование пузырей и отслаивание эпидермиса начинается уже через несколько часов после появления высыпаний.
Заболевание продолжается в течение 10 дней, а смертность у детей достигает 3%.
Обсемененный кишечник – это не всегда болезнь
Как проявляется инфекция в кишечнике, как лечить? Если золотистый стафилококк атакует кишечник малыша, то болезнь, как правило, носит стремительный характер. Самыми характерными симптомами являются:
О наличии головокружения у маленького ребенка, который не умеет говорить, могут свидетельствовать характерные движения глаз.
Если у младенца появляются подобные симптомы, обратиться к врачу нужно как можно скорее.
Для уточнения диагноза могут быть назначены следующие анализы и обследования:
Анализ кала, чтобы определить, какие именно бактерии присутствуют в желудочно-кишечном тракте.
Общий анализ крови, чтоб определить, есть ли в организме воспалительный процесс.
Анализ мочи, чтобы определить, имеется ли бактериальное поражение мочеполовой системы.
Если у врача возникают подозрения, что воспалительный процесс затронул какие-либо внутренние органы, то он может назначить проведение УЗИ или флюорографию.
Лабораторные анализы позволяют с большой точностью определить степень инфицирования организма, дать прогноз протекания инфекции и назначить лечение, если в нем есть необходимость.
В упрощенном виде расшифровка анализа выглядит следующим образом.
S. aureus в кале 1000. Такое количество бактерий не представляет для организма серьезной опасности. Лечения никакого не требуется. Но нужно иметь в виду, что бактерия может дать осложнения при возникновении других заболеваний, поэтому здоровье ребенка необходимо тщательно оберегать и проводить закаливающие процедуры, которые посоветует врач. (Важности закаливания посвящена статья «виды закаливания и основы здорового образа жизни».)
S. aureus в кале 10000. В этом случае у ребенка на коже могут появляться небольшие высыпания, периодически могут не сильно воспаляться глаза и дыхательные пути. Но все же назначать полноценную антибактериальную терапию еще рано. Ребенок нуждается в пристальном наблюдении и постоянном укреплении здоровья.
S. aureus в кале 10 в 5 степени. Это уже настоящая болезнь, сопровождающаяся болями в животе, пенистым зеленоватым стулом, сильной сыпью. Лекарственная терапия в этом случае включает в себя специфические препараты.
S. aureus в кале 10 в 6 степени. Серьезное поражение организма. Ребенка мучает тошнота, рвота, диарея, воспаление различных слизистых оболочек, кашель. Но даже на этой стадии врачи могут попытаться обойтись без антибиотиков, чтобы не мешать формированию нормальной микрофлоры. Сильнодействующие антибактериальные препараты используют только в тех случаях, когда без них действительно нельзя обойтись.
Лечение заболеваний, вызванных золотистым стафилококком у грудных детей, требует большой осторожности. Родителям приходится набраться терпения и четко выполнять рекомендации врача, не допуская никакой самодеятельности.
Дорогие читатели, если вы решили поделиться статьей с друзьями в социальных сетях, то в этом вам помогут наши удобные кнопочки. Нажимайте их, и ссылки будут появляться автоматически.
Согласно данным международного исследования, открывающего путь к разработке новых подходов к профилактике пищевой аллергии, инфекции, вызванные золотистым стафилококком, могут быть связаны с повышенным риском развития пищевой аллергии у детей раннего возраста с тяжелой формой экземы.
Staphylococcus aureus – это бактерия, которая в норме присутствует в полости носа и на коже здоровых людей, но в большем избытке встречается у детей с экземой, особенно при тяжелой ее форме. Это кожное заболевание также является фактором риска возникновения пищевой аллергии. Таким образом, можно легко предположить, что связь между Staphylococcus aureus и пищевой аллергией у людей с экземой соотносится с тяжестью этого заболевания.
Многоэтапное исследование
Эта гипотеза была проверена группой исследователей с использованием данных, собранных в ходе исследования LEAP*, в рамках которого наблюдались 640 детей с установленным высоким риском возникновения аллергии на арахис (на основании существующей аллергии на яйца или тяжелой экземы либо обоих расстройств) с раннего возраста до 5 лет. Результаты, опубликованные в 2015 году, показали, что профилактика аллергии на арахис может быть обеспечена, как это ни парадоксально, путем введения арахиса в питание детей, подверженных высокому риску развития данного вида аллергии.
S. aureus, виновник обнаружен?
В этой новой части исследования LEAP анализ микробиоты полости носа и кожи детей, участвовавших в исследовании, показал, что чем значительнее было образование колоний Staphylococcus aureus, тем тяжелее протекала экзема и тем сильнее она прогрессировла со временем. Сочетание этих двух заболеваний (инфекция Staphylococcus aureus + экзема) независимо от степени тяжести часто связано с увеличением выработки определенных веществ** как части аллергической реакции на арахис, белок куриных яиц и молоко. Хотя с возрастом она обычно уменьшается, аллергия на яйца сохраняется примерно у 40 % испытуемых детей; аллергия на арахис появляется даже у детей, которые подвергались профилактическому воздействию с самого раннего возраста. Таким образом, наличие золотистого стафилококка в полости носа или на коже может привести к аллергической реакции на некоторые заболевания.
На пути к новому перспективному терапевтическому направлению
По мнению исследователей, S. aureus может помешать развитию естественной толерантности к яйцам и арахису, из-за чего может возникнуть аллергия. Таким образом, они предположили, что устранение S. aureus у детей с экземой может предотвратить возникновение пищевой аллергии, также они утверждают, что необходимо провести дальнейшую работу для выяснения роли этой бактерии в развитии данных двух заболеваний.
* Learning Early About Peanut Allergy – заблаговременное определение аллергии на арахис
** IgE: иммуноглобулин Е – вещество, выделяемое организмом во время аллергической реакции
Источники :
Olympia Tsilochristou, du Toit G, Sayer PH et al. Association of Staphylococcus aureus colonization with food allergy occurs independently of eczema severity. J Allergy Clin Immunol, 2019; doi.org/10.1016/j.jaci.2019.04.025
Стафилококк у грудных детей: симптомы и лечение
Поиск
Беременность
Ведение беременности
Анализы во время беременности
Беременность после 40
Вторая беременность
Документы и выплаты беременным
Женская консультация
Лекарства во время беременности
Многоплодная беременность
Обследования во время беременности
Состояния при беременности
Стоматология беременных
Ликбез для будущей мамы
Вес беременных
Грудное вскармливание при беременности
Одежда и обувь для беременных
Питание во время беременности
Секс во время беременности
Подготовка к беременности
Контрацепция
Определение беременности
Планирование беременности
Проблемы при планировании беременности
ЭКО
Проблемы во время беременности
Аборт
Болезни во время беременности
Варикоз
Внематочная беременность
Выкидыш
Геморрой
Роды
Осложнения во время родов
Кесарево сечение
Преждевременные роды
Подготовка к родам
Выбор роддома
Роды за границей
Роды с мужем
Список вещей в роддом
Стволовые клетки
Что купить к рождению ребенка
Послеродовой период
Восстановление после родов
Физические упражнения после родов
Выписка из роддома
Декретный отпуск
Документы
Документы и выплаты многодетным
Документы и выплаты одиноким матерям
Документы и выплаты после родов
Материнский капитал
Послеродовая депрессия
Секс после родов
Процесс родов
Вторые роды
Естественные роды
Начало родов
Схватки
Эпидуральная анестезия
Новорожденный
Грудное вскармливание
Завершение грудного вскармливания
Начало грудного вскармливания
Образ жизни кормящей женщины
Диета при грудном вскармливании
Лекарства при грудном вскармливании
Проблемы во время грудного вскармливания
Сцеживание
Жизнь с новорожденным
Вес новорожденного
Выбор имени для ребёнка
Детский сон
Коляски
Одежда и обувь для детей
Покупки для новорожденного
Товары для детей
Коляски
Как выбрать прогулочную коляску
Слинги, кенгуру, переноски
Совместный сон
Проблемы новорожденного
Атопический дерматит
Болезни новорожденных
Желтуха новорожденных
Насморк новорожденного
Неврология у новорожденных
Синдром внезапной смертности
Стафилококк у новорожденных
Сыпь у новорожденных
Запоры
Здоровье ребёнка
Безопасность
Ожоги
Отравление
Травмы, переломы
Болезни
Влияние факторов образа жизни на колонизацию кишечника золотистым стафилококком у шведских и итальянских младенцев
Abstract
В последние годы золотистый стафилококк стал обычным колонизатором кишечника у шведских младенцев. Мы стремились идентифицировать факторы хозяина, которые определяют такую колонизацию. Образцы стула 100 итальянских и 100 шведских младенцев были получены семь раз в течение первого года жизни и количественно культивированы на S. aureus. В подгруппе младенцев в каждой когорте отдельные штаммы были идентифицированы с помощью случайного амплифицированного полиморфного анализа ДНК.Колонизация в каждый момент времени была связана со способом родов, количеством братьев и сестер в семье и лечением антибиотиками. В общей сложности у 66% итальянских и 78% шведских младенцев было S. aureus в стуле по крайней мере в один момент времени (p 0,08), а 4% итальянских и 27% шведских младенцев были положительными на минимум шесть из семи исследованных временных точек (p 0,0001). Большинство младенцев, проанализированных на предмет носительства штамма, в течение нескольких месяцев содержали в своей микробиоте один штамм. Популяции стула S. aureus у колонизированных младенцев снизились с 10 7 до 10 4 колониеобразующих единиц / г в возрасте от 1 недели до 1 года в обеих когортах.В многофакторном анализе самый сильный предиктор колонизации S. aureus был рожден в Швеции (OR 3,4 в возрасте 1 недели, p 0,002). Наличие старших братьев и сестер увеличило колонизацию в фазе пика (OR 1,8 через 6 месяцев, p 0,047). Лечение антибиотиками было более распространено среди итальянских младенцев и отрицательно коррелировало с колонизацией S. aureus в возрасте 6 месяцев (OR 0,3, p 0,01). В заключение следует отметить, что S. aureus является более распространенным кишечным колонизатором у шведских детей, чем у итальянских младенцев, и этот факт нельзя приписать способу кормления или доставки.
Кишечное носительство Staphylococcus aureus: как его частота соотносится с частотой носительства и каково его клиническое влияние?
1.
Kluytmans J, van Belkum A, Verbrugh H (1997) Назальное носительство Staphylococcus aureus : эпидемиология, основные механизмы и связанные риски. Clin Microbiol Rev 10: 505–520
PubMed
CAS
Google Scholar
2.
Weinstein HJ (1959) Связь между состоянием носительства стафилококков и частотой послеоперационных осложнений. N Engl J Med 260: 1303–1308
PubMed
CAS
Google Scholar
3.
Wertheim HF, Melles DC, Vos MC, van Leeuwen W., van Belkum A et al (2005) Роль носительства в инфекциях Staphylococcus aureus . Lancet Infect Dis 5: 751–762
PubMed
Статья
Google Scholar
4.
Williams RE (1963) Здоровое носительство Staphylococcus aureus : его распространенность и важность. Bacteriol Rev 27: 56–71
Metan G, Zarakolu P, Unal S (2005) Быстрое обнаружение антибактериальной устойчивости у появляющихся грамположительных кокков. J Hosp Infect 61: 93–99
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
7.
Crossley K, Solliday J (1980) Сравнение ректальных мазков и культур кала для выявления желудочно-кишечного носительства Staphylococcus aureus . J Clin Microbiol 11: 433–434
PubMed
CAS
Google Scholar
8.
Lee DC, Barlas D, Ryan JG, Ward MF, Sama AE et al (2002) Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus и устойчивые к ванкомицину энтерококки: распространенность и предикторы колонизации у пациентов, поступающих в отделение неотложной помощи из домов престарелых.J Am Geriatr Soc 50: 1463–1465
PubMed
Статья
Google Scholar
9.
Meurman O, Routamaa M, Peltonen R (2005) Скрининг на метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus : какие анатомические участки культивировать. J Hosp Infect 61: 351–353
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
10.
Моди Л., Кауфман, Калифорния, Донабедиан С., Зервос М., Брэдли С.Ф. (2008) Эпидемиология колонизации золотистого стафилококка у жителей домов престарелых.Clin Infect Dis 46: 1368–1373
PubMed
Статья
Google Scholar
11.
Drews SJ, Willey BM, Kreiswirth N, Wang M, Ianes T. et al (2006) Проверка теста IDI-MRSA для обнаружения метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в различных типах образцов в основной клинической лаборатории параметр. J Clin Microbiol 44: 3794–3796
PubMed
Статья
Google Scholar
12.
Buehlmann M, Frei R, Fenner L, Dangel M, Fluckiger U et al (2008) Высокоэффективный режим деколонизации метициллин-устойчивых носителей Staphylococcus aureus . Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 29: 510–516
Lee YL, Cesario T, Gupta G, Flionis L, Tran C et al (1997) Наблюдение за колонизацией и инфекцией Staphylococcus aureus , чувствительным или устойчивым к метициллину, в учреждении с квалифицированным медицинским уходом.Am J Infect Control 25: 312–321
PubMed
Статья
Google Scholar
19.
Roghmann MC, Gorman PH, Wallin MT, Kreisel K, Shurland S. et al (2007) Staphylococcus aureus колонизация у людей, живущих в сообществе, с дисфункцией спинного мозга. Arch Phys Med Rehabil 88: 979–983
PubMed
Статья
Google Scholar
20.
Borer A, Gilad J, Yagupsky P, Peled N, Porat N. et al (2002) Внебольничный устойчивый к метициллину Staphylococcus aureus у взрослых в учреждениях с нарушениями развития.Emerg Infect Dis 8: 966–970
PubMed
Google Scholar
21.
Van Hal SJ, Stark D, Lockwood B, Marriott D, Harkness J (2007) Обнаружение метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus (MRSA): сравнение двух молекулярных методов (анализ IDI-MRSA PCR и GenoType MRSA Прямой анализ ПЦР) с тремя селективными агарами MRSA (MRSA ID, MRSASelect и CHROMagar MRSA) для использования с мазками для инфекционного контроля. J Clin Microbiol 45: 2486–2490
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
22.
Aeilts GD, Sapico FL, Canawati HN, Malik GM, Montgomerie JZ (1982) Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus колонизация и инфекция в реабилитационном учреждении. J Clin Microbiol 16: 218–223
PubMed
CAS
Google Scholar
23.
Bishop EJ, Grabsch EA, Ballard SA, Mayall B, Xie S. et al (2006) Параллельный анализ образцов мазков из носа и паха с помощью анализа IDI-MRSA PCR сопоставим с анализом с помощью ПЦР для отдельных образцов и рутинные анализы культур для обнаружения колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus .J Clin Microbiol 44: 2904–2908
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
24.
Cavalcanti SM, Franca ER, Cabral C, Vilela MA, Montenegro F et al (2005) Распространенность Staphylococcus aureus , введенного в отделения интенсивной терапии университетской больницы. Braz J Infect Dis 9: 56–63
PubMed
Статья
Google Scholar
25.
Коэльо Р., Хименес Дж., Гарсия М., Арройо П., Мингес Д. и др. (1994) Проспективное исследование инфекции, колонизации и носительства метициллин-устойчивого золотистого стафилококка во вспышке, затронувшей 990 пациентов.Eur J Clin Microbiol Infect Dis 13: 74–81
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
26.
Darouiche R, Wright C, Hamill R, Koza M, Lewis D et al (1991) Искоренение колонизации метициллин-резистентным Staphylococcus aureus с помощью перорального миноциклина-рифампина и местного мупироцина. Антимикробные агенты Chemother 35: 1612–1615
PubMed
CAS
Google Scholar
27.
Eveillard M, de Lassence A, Lancien E, Barnaud G, Ricard JD et al (2006) Оценка стратегии скрининга нескольких анатомических участков на наличие метициллин-резистентных Staphylococcus aureus при поступлении в учебную больницу. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 27: 181–184
PubMed
Статья
Google Scholar
28.
Gnanalingham KK, Elsaghier A, Kibbler C, Shieff C (2003) Воздействие метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в нейрохирургическом отделении: растущая проблема.J Neurosurg 98: 8–13
PubMed
Google Scholar
29.
Kampf G, Kramer A (2004) Ликвидация метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus с помощью антисептического мыла и назального мупироцина среди колонизированных пациентов — открытое неконтролируемое клиническое испытание. Анн Клин Микробиол Антимикроб 3: 9
PubMed
Статья
Google Scholar
30.
Klotz M, Zimmermann S, Opper S, Heeg K, Mutters R (2005) Возможный риск повторной колонизации метициллин-резистентным Staphylococcus aureus (MRSA) через фекальную передачу.Int J Hyg Environ Health 208: 401–405
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
31.
Lim MS, Marshall CL, Spelman D (2006) Носительство нескольких подтипов метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus пациентами отделения интенсивной терапии. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 27: 1063–1067
Manian FA, Senkel D, Zack J, Meyer L (2002) Обычный скрининг на метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus среди пациентов, впервые поступивших в отделение неотложной реабилитации. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 23: 516–519
PubMed
Статья
Google Scholar
34.
Mylotte JM, Kahler L, Graham R, Young L, Goodnough S (2000) Проспективное наблюдение за устойчивыми к антибиотикам микроорганизмами у пациентов с травмой спинного мозга, поступивших в отделение неотложной реабилитации.Am J Infect Control 28: 291–297
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
35.
Папиа Г., Луи М., Тралла А., Джонсон С., Коллинз В. и др. (1999) Скрининг пациентов из группы высокого риска на наличие метициллин-резистентного золотистого стафилококка при поступлении в больницу: насколько это рентабельно. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 20: 473–477
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
36.
Reyes RC, Stoakes L, Milburn S, Lennox G, Daniel J et al (2008) Оценка новой хромогенной среды для обнаружения метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus на носовых и перианальных образцах. Диагностика Microbiol Infect Dis 60: 225–227
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
37.
Робертс С., Янг Х., Фолкнер С., Билки М., Эйрес С. и др. (2002) Значение бульонных культур в обнаружении метициллин-устойчивых Staphylococcus aureus .NZ Med J 115: U191
Google Scholar
38.
Trick WE, Weinstein RA, DeMarais PL, Kuehnert MJ, Tomaska W. et al (2001) Колонизация жителей учреждения с квалифицированной медицинской помощью патогенами, устойчивыми к противомикробным препаратам. J Am Geriatr Soc 49: 270–276
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
39.
Zhang SX, Drews SJ, Tomassi J, Katz KC (2007) Сравнение двух версий теста IDI-MRSA с использованием тампонов с углем для проспективных назальных и неназальных образцов для наблюдения.J Clin Microbiol 45: 2278–2280
PubMed
Статья
Google Scholar
40.
Simor AE, Ofner-Agostini M, Paton S, McGeer A, Loeb M. et al (2005) Клинические и эпидемиологические особенности метициллин-резистентного Staphylococcus aureus у пожилых госпитализированных пациентов. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 26: 838–841
PubMed
Статья
Google Scholar
41.
Hare R, Ridley M (1958) Дальнейшие исследования передачи Staphylococcus aureus . BMJ 1: 69–73
PubMed
CAS
Google Scholar
42.
Solberg CO (2000) Распространение Staphylococcus aureus в больницах: причины и профилактика. Scand J Infect Dis 32: 587–595
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
43.
Masaki H, Asoh N, Watanabe H, Tao M, Watanabe K et al (2003) Возможная связь между Staphylococcus aureus , колонизирующим дыхательные пути и прямую кишку, и S. aureus изолированы в условиях гериатрической больницы. Intern Med 42: 281–282
PubMed
Статья
Google Scholar
44.
Bhalla A, Aron DC, Donskey CJ (2007) Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S. aureus на коже госпитализированных пациентов. BMC Infect Dis 7: 105
PubMed
Статья
Google Scholar
45.
Boyce JM, Havill NL, Otter JA, Adams NM (2007) Широко распространенное загрязнение окружающей среды, связанное с пациентами с диареей и устойчивостью к метициллину. Staphylococcus aureus колонизация желудочно-кишечного тракта. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 28: 1142–1147
Solberg CO (1965) Исследование носителей Staphylococcus aureus с особым вниманием к количественной оценке бактерий. Acta Med Scand Suppl 436: 1–96
PubMed
CAS
Google Scholar
48.
Squier C, Rihs JD, Risa KJ, Sagnimeni A, Wagener MM et al (2002) Staphylococcus aureus ректальное носительство и его связь с инфекциями у пациентов в хирургическом отделении интенсивной терапии и отделении трансплантации печени.Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 23: 495–501
PubMed
Статья
Google Scholar
49.
Ray AJ, Pultz NJ, Bhalla A, Aron DC, Donskey CJ (2003) Сосуществование устойчивых к ванкомицину энтерококков и Staphylococcus aureus в кишечном тракте госпитализированных пациентов. Clin Infect Dis 37: 875–881
PubMed
Статья
Google Scholar
50.
Van Rijen MM, Bonten M, Wenzel RP, Kluytmans JA (2008) Интраназальный мупироцин для уменьшения Staphylococcus aureus инфекций у хирургических пациентов с носительством носа: систематический обзор.J Antimicrob Chemother 61: 254–261
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
51.
Dupeyron C, Campillo B, Bordes M, Faubert E, Richardet JP et al (2002) Клиническое испытание мупироцина в искоренении метициллин-резистентного Staphylococcus aureus носительства в пищеварительном отделении. J Hosp Infect 52: 281–287
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
52.
Dupeyron C, Campillo B, Richardet JP, Soussy CJ (2006) Долгосрочная эффективность мупироцина в профилактике инфекций метициллин-резистентным Staphylococcus aureus в отделении гастроэнтерологии. J Hosp Infect 63: 385–392
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
53.
Perl TM, Cullen JJ, Wenzel RP, Zimmerman MB, Pfaller MA et al (2002) Интраназальный мупироцин для предотвращения послеоперационных инфекций Staphylococcus aureus .N Engl J Med 346: 1871–1877
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
54.
Harbarth S, Dharan S, Liassine N, Herrault P, Auckenthaler R et al (1999) Рандомизированное плацебо-контролируемое двойное слепое испытание для оценки эффективности мупироцина для искоренения носительства метициллин-устойчивого стафилококка aureus . Противомикробные агенты Chemother 43: 1412–1416
PubMed
CAS
Google Scholar
55.
Wertheim HF, Verveer J, Boelens HA, van Belkum A, Verbrugh HA et al (2005) Влияние лечения мупироцином на носительство в носу, глотке и промежности Staphylococcufs aureus у здоровых взрослых. Антимикробные агенты Chemother 49: 1465–1467
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
56.
Falagas ME, Bliziotis IA, Fragoulis KN (2007) Пероральный рифампицин для искоренения носительства Staphylococcus aureus в здоровых и больных популяциях: систематический обзор данных сравнительных испытаний.Am J Infect Control 35: 106–114
PubMed
Статья
Google Scholar
57.
Falagas ME, Fragoulis KN, Bliziotis IA (2006) Пероральный рифампицин для профилактики Staphylococcus aureus инфекций, связанных с носительством, у пациентов с почечной недостаточностью — метаанализ рандомизированных контролируемых исследований. Трансплантат Nephrol Dial 21: 2536–2542
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
58.
Cerda E, Abella A, de la Cal MA, Lorente JA, Garcia-Hierro P et al (2007) Энтеральный ванкомицин контролирует метициллин-резистентный Staphylococcus aureus в ожоговом отделении интенсивной терапии: 9-летнее проспективное исследование. Ann Surg 245: 397–407
PubMed
Статья
Google Scholar
59.
De la Cal MA, Cerda E, van Saene HK, Garcia-Hierro P, Negro E et al (2004) Эффективность и безопасность энтерального ванкомицина для контроля эндемичности метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в медицинском учреждении. / хирургическое отделение интенсивной терапии.J Hosp Infect 56: 175–183
PubMed
Статья
Google Scholar
60.
Silvestri L, van Saene HK, Milanese M, Fontana F, Gregori D et al (2004) Профилактика пневмонии MRSA с помощью пероральной деконтаминации ванкомицином: рандомизированное исследование. Eur Respir J 23: 921–926
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
61.
Solis A, Brown D, Hughes J, Van Saene HK, Heaf DP (2003) Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus у детей с муковисцидозом: протокол искоренения.Педиатр Pulmonol 36: 189–195
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
62.
Thorburn K, Taylor N, Saladi SM, van Saene HK (2006) Использование контрольных культур и энтерального ванкомицина для борьбы с метициллин-резистентным Staphylococcus aureus в педиатрическом отделении интенсивной терапии. Clin Microbiol Infect 12: 35–42
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
63.
Warren DK, Liao RS, Merz LR, Eveland M, Dunne WM Jr (2004) Обнаружение метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus непосредственно из образцов мазков из носа с помощью анализа ПЦР в реальном времени. J Clin Microbiol 42: 5578–5581
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
64.
Furuno JP, Perencevich EN, Johnson JA, Wright MO, McGregor JC et al (2005) Совместная колонизация устойчивых к метициллину стафилококков Staphylococcus и устойчивых к ванкомицину энтерококков.Emerg Infect Dis 11: 1539–1544
PubMed
CAS
Google Scholar
65.
Chen KT, Huard RC, Della-Latta P, Saiman L (2006) Распространенность метициллин-чувствительного и метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus у беременных женщин. Obstet Gynecol 108: 482–487
PubMed
Google Scholar
66.
Чен К.Т., Кэмпбелл Х., Боррелл Л.Н., Хуард Р.К., Сайман Л. и др. (2007) Предикторы и исходы для беременных с вагинально-ректальным носительством метициллин-резистентного метициллин-устойчивого Staphylococcus для беременных.Am J Perinatol 24: 235–240
PubMed
Статья
Google Scholar
67.
Froberg MK, Palavecino E, Dykoski R, Gerding DN, Peterson LR et al (2004) Staphylococcus aureus и Clostridium difficile вызывают различные псевдомембранозные кишечные заболевания. Clin Infect Dis 39: 747–750
PubMed
Статья
Google Scholar
68.
Gravet A, Rondeau M, Harf-Monteil C, Grunenberger F, Monteil H et al (1999) Преобладающий Staphylococcus aureus , выделенный из диареи, связанной с антибиотиками, имеет клиническое значение и производит энтеротоксин A и двухкомпонентный токсин LukE -lukD.J Clin Microbiol 37: 4012–4019
PubMed
CAS
Google Scholar
69.
Ackermann G, Thomalla S, Ackermann F, Schaumann R, Rodloff AC et al (2005) Распространенность и характеристики бактерий и факторов хозяина в ситуации вспышки диареи, связанной с антибиотиками. J Med Microbiol 54: 149–153
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
70.
Boyce JM, Havill NL, Maria B (2005) Частота и возможные последствия инфекционного контроля колонизации желудочно-кишечного тракта метициллин-резистентным Staphylococcus aureus .J Clin Microbiol 43: 5992–5995
PubMed
Статья
Google Scholar
71.
Flemming K, Ackermann G (2007) Распространенность энтеротоксина, продуцирующего Staphylococcus aureus , в стуле пациентов с нозокомиальной диареей. Инфекция 35: 356–358
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
72.
Asha NJ, Tompkins D, Wilcox MH (2006) Сравнительный анализ распространенности, факторов риска и молекулярной эпидемиологии диареи, связанной с антибиотиками, вызванной Clostridium difficile , Clostridium perfringens и Staphylococcus aureus .J Clin Microbiol 44: 2785–2791
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
73.
Suggs AH, Maranan MC, Boyle-Vavra S, Daum RS (1999) Метициллин-резистентная и пограничная метициллин-резистентная бессимптомная Staphylococcus aureus колонизация у детей без идентифицируемых факторов риска. Pediatr Infect Dis J 18: 410–414
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
74.
Shahin R, Johnson IL, Jamieson F, McGeer A, Tolkin J et al (1999) Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ношение в детском центре после случая заболевания. Исследовательская группа Детского центра Торонто. Arch Pediatr Adolesc Med 153: 864–868
PubMed
CAS
Google Scholar
75.
Эфунтовое М.О., Адетосое А.И. (2003) Энтеротоксигенность и лекарственная чувствительность стафилококков от детей пяти лет и младше со спорадической диареей.East Afr Med J 80: 656–659
PubMed
CAS
Google Scholar
76.
Bjorksten B, Naaber P, Sepp E, Mikelsaar M (1999) Микрофлора кишечника у детей 2-летнего возраста из Эстонии и Швеции с аллергией. Clin Exp Allergy 29: 342–346
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
77.
Lindberg E, Adlerberth I, Hesselmar B, Saalman R, Strannegard IL et al (2004) Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца.J Clin Microbiol 42: 530–534
PubMed
Статья
Google Scholar
78.
Lindberg E, Nowrouzian F, Adlerberth I, Wold AE (2000) Длительное сохранение штаммов Staphylococcus aureus , продуцирующих суперантиген, в микрофлоре кишечника здоровых младенцев. Pediatr Res 48: 741–747
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
79.
Lundell AC, Adlerberth I, Lindberg E, Karlsson H, Ekberg S. et al (2007) Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus .Clin Exp Allergy 37: 62–71
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
80.
Adlerberth I, Strachan DP, Matricardi PM, Ahrne S, Orfei L et al (2007) Микробиота кишечника и развитие атопической экземы в 3 европейских когортах новорожденных. J Allergy Clin Immunol 120: 343–350
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
81.
Kalliomaki M, Collado MC, Salminen S, Isolauri E (2008) Ранние различия в составе фекальной микробиоты у детей могут предсказать избыточный вес.Am J Clin Nutr 87: 534–538
PubMed
CAS
Google Scholar
82.
Bisgaard H, Hermansen MN, Buchvald F, Loland L, Halkjaer LB et al (2007) Детская астма после бактериальной колонизации дыхательных путей у новорожденных. N Engl J Med 357: 1487–1495
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
83.
Michelow IC, Fracchia MS, Kinane TB (2008) Астма и колонизация дыхательных путей новорожденных.N Engl J Med 358: 423–425; ответ автора 424–425
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
84.
Semic-Jusufagic A, Bachert C, Gevaert P, Holtappels G, Lowe L et al (2007) Staphylococcus aureus Сенсибилизация и аллергические заболевания в раннем детстве: популяционное когортное исследование при рождении. J Allergy Clin Immunol 119: 930–936
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
85.
Singh K, Gavin PJ, Vescio T, Thomson RB Jr, Deddish RB et al (2003) Микробиологический надзор с использованием одних только назальных культур достаточен для обнаружения метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus у новорожденных. J Clin Microbiol 41: 2755–2757
PubMed
Статья
Google Scholar
86.
Rosenthal A, White D, Churilla S, Brodie S, Katz KC (2006) Оптимальные места для культивирования для выявления метициллин-резистентных Staphylococcus aureus у новорожденных.J Clin Microbiol 44: 4234–4236
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
87.
Gustafsson EB, Ringberg H, Johansson PJ (2007) MRSA у детей из зарубежных стран, усыновленных в шведские семьи. Acta Paediatr 96: 105–108
Numan SC, Veldkamp P, Kuijper EJ, van den Berg RJ, van Dissel JT (2007) Clostridium difficile -ассоциированная диарея: бычий сывороточный белок против Clostridium difficile для предотвращения рецидивов . Gut 56: 888–889
PubMed
Статья
Google Scholar
90.
Singh N, Squier C, Wannstedt C, Keyes L, Wagener MM et al (2006) Влияние агрессивной стратегии инфекционного контроля на эндемическую инфекцию Staphylococcus aureus у реципиентов трансплантата печени. Инфекционный контроль Hosp Epidemiol 27: 122–126
PubMed
Статья
Google Scholar
91.
Грмек-Косник И., Ихан А., Дермота У, Ремс М., Косник М. и др. (2005) Оценка отдельных и объединенных культур мазков, различных сред, обогащения бульона и анатомических участков скрининга для обнаружения метициллина -резистентный Staphylococcus aureus из клинических образцов.J Hosp Infect 61: 155–161
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
92.
Buttiaux R, Pierret J (1949) Les staphylocoques pathogens dans les selles des nourissons normaux. Ann Inst Pasteur (Париж) 76: 480–482
Google Scholar
93.
Brodie J, Sommerville T, Wilson SGF (1956) Коагулазоположительные стафилококки. Индивидуальное обследование в течение первых шести месяцев обучения медсестер.BMJ 1: 667–669
Статья
Google Scholar
94.
Grun L (1958) Исследования кишечных стафилококков. Arch Hyg Bakteriol 142: 3–7
PubMed
CAS
Google Scholar
95.
Greendyke RM, Constantine HP, Magruder GB, Dean DC, Gardner JH et al. (1958) Стафилококки в медицинском отделении, с особым упором на фекальные носители. Am J Clin Pathol 30: 318–322
PubMed
CAS
Google Scholar
96.
Hofstad T, Wormnes A (1961) Влияние антибиотиков широкого спектра действия на фекальную стафилококковую и монилиальную флору человека. Acta Pathol Microbiol Scand 51: 275–279
PubMed
CAS
Google Scholar
97.
Polakoff S, Richards ID, Parker MT, Lidwell OM (1967) Носительство в носу и на коже Staphylococcus aureus у пациентов, перенесших хирургическую операцию. Дж. Хиг (Лондон) 65: 559–566
CAS
Google Scholar
98.
Bjorksten B, Sepp E, Julge K, Voor T, Mikelsaar M (2001) Развитие аллергии и микрофлора кишечника в течение первого года жизни. J Allergy Clin Immunol 108: 516–520
PubMed
Статья
CAS
Google Scholar
Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных, и потенциальных случаев передачи микробов от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology
Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, взяв образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, которые использовались для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец, а также определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения. гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами мать-младенец определяли с помощью типирования spa , мультилокусного последовательного типирования (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из этих 41 извлеченных S. aureus 18 были устойчивыми к метициллину (MRSA) и 23 — чувствительными к метициллину (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью набора spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней колонизации кишечника S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.
ВВЕДЕНИЕ
Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в сообществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al., 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).
Staphylococcus aureus — это вид, который обычно встречается в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito ). и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).
Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).
В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).
В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus могли быть выделены из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, отследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.
МЕТОДЫ
Сборник образцов
Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (а) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Ранее соски и ареолу молочной железы промывали стерильной водой с мылом и пропитывали хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.
Процедуры отбора проб
изолятов S. aureus
Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l ‘ Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).
Молекулярное типирование изолятов
Молекулярную характеристику изолятов S. aureus проводили различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).
Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)
Когда похожие типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), PFGE провел анализ клонального родства (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклиномин-мантолин, хлорампроциклин, хлорампроциклин, хлорампроциклин и др.). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).
Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm). (A) , мм (B) , мм (C) , мм (F) , мм (T) , msr (A) , msr (B) , миль / час ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ′ ) -Ia , aph (3 ′ ) -IIIa , aac (6 ′ ) — Ie-aph (2 ′ ′ ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus изучали методом ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).
Обнаружение генов вирулентности
Анализ профиля вирулентности был выполнен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( п.н.) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).
Кластер иммунного уклонения
Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были разделены на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Выделение
S. aureus
Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 младенца (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7 день, трех на 14 день и десяти на 35 день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).
Таблица 1.
Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.
.
.
MRSA /
.
№
.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штамм
.
спа тип
.
агр .
SCC МЭК .
MLST / CC a .
Фенотип b .
Генотип
.
IEC тип c .
Другие гены d .
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus от матери ребенку
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Тип изоляторов Молекулярный
Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.
Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов spa (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.
Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).
Анализ PFGE для проверки потенциальной передачи от матери ребенку
Передача S. aureus
spa тип S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Между изолятами от матерей и младенцев из остальных восьми случаев сходства между и типами не наблюдалось.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 обладали фенотипом множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ′ ) -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).
Гены вирулентности
Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( и ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммов S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. Всего 35 изолятов содержали ген aur , а 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).
Анализ генов IEC
Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).
Персистентность
клонов S. aureus
Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).
ОБСУЖДЕНИЕ
Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент госпитализации (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.
Обращает на себя внимание генетическое разнообразие видов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).
Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ′ ). -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).
Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).
Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген эта , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, более распространенный в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).Анализ
PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон был обнаружен в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , которые колонизируют младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al., 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.
Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007). .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).
Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной чертой фекалий грудных детей по сравнению с фекалиями детей, вскармливаемых смесью (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в условиях больницы.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммов S. epidermidis , которые ингибируют in vivo колонизацию S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистой оболочки (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).
В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В этой связи важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.
Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.
ФИНАНСИРОВАНИЕ
Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.
Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.
ССЫЛКИ
Адлерберт
I
Линдберг
E
Aberg
N
et al.
Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация детского кишечника: влияние гигиенического образа жизни
Педиатр Res
2006
59
96
101
Баллард
О
Морроу
AL
Состав грудного молока: нутриенты и биоактивные факторы
Pediatr Clin N Am
2013
60
49
74
Бенито
D
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
et al.
Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании
Микроб Экол
2013
66
105
11
Бхалла
A
Арон
ДЦ
Донски
CJ
Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов
BMC Инфекция Dis
2007
7
105
Björkstén
B
Сепп
E
Julge
K
et al.
Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни
J Allergy Clin Immunol
2001
108
516
20
Бордерон
JC
Lionnet
C
Rondeau
C
et al.
Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки
Патол Биол
1996
44
416
22
Буржуа-Николаос
N
Люцет
JC
Daubié
C
et al.
Колонизация влагалища матери Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах
Paediatr Perinat Ep
2010
24
488
91
Чо
Я
Blaser
MJ
Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни
Nat Rev Genet
2012
13
260
70
Институт стандартов клинической лаборатории
Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24
2014
Уэйн, Пенсильвания, США
CLSI
Cucarella
С
Солано
С
Valle
J
et al.
Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок
Дж Бактериол
2001
183
2888
96
Delgado
S
Гарсия
пол.
Фернандес
L
et al.
Характеристика Staphylococcus aureus штаммов, вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота
FEMS Иммунол Мед Микрофон
2011
62
225
35
Деуренберг
RH
Rijnders
MI
Себастьян
S
et al.
Staphylococcus aureus клон-специфические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности клональных комплексов в пределах spa клональных комплексов
Диагностика Micr Infec Dis
2009
65
116
122
Домингес
E
Саразага
M
Торрес
К
Устойчивость к антибиотикам в изолятах Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей
J Clin Microbiol
2002
40
2638
41
Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)
Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014 г.
Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)
Фернандес
L
Ланга
S
Мартин
V
et al.
Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях
Pharmacol Res
2013
69
1
10
Gries
DM
Земзарс
TF
Gibson
KA
et al.
Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами
Am J Infect Control
2009
37
598
600
Harastani
HH
Арай
GF
Токаджян
ST
Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане
Int J Infect Dis
2014
19
33
8
Хармсен
D
Клаус
H
Witte
W
et al.
Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных
J Clin Microbiol
2003
41
5442
8
Hunt
км
Preuss
Дж
Nissan
C
et al.
Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков
Appl Environ Microb
2012
78
4763
70
Ивасе
Т
Уэхара
Y
Синдзи
H
et al.
Staphylococcus epidermidis sp подавляет Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию носа
Природа
2010
465
346
9
Жарро
S
Mougel
C
Thioulouse
J
et al.
Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетических фоновых факторов вирулентности, agr групп (аллелей) и болезнями человека
Заражение иммунной
2002
70
631
41
Джерниган
JA
Тяга
AL
Цветы
L
et al.
Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации
Инфекция Cont Hosp Ep
2003
24
409
14
Хименес
E
Delgado
S
Мальдонадо
A
et al.
Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей
BMC Microbiol
2008
8
143
Хименес-Трюке
N
Тедески
S
Saye
EJ
et al.
Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация
Передача золотистого стафилококка от матери новорожденному
Pediatr Infect Dis J
2012
31
360
3
Линдберг
E
Адлерберт
I
Hesselmar
B
et al.
Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца
J Clin Microbiol
2004
42
530
4
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
Бенито
D
et al.
Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97
Int J Med Microbiol
2011
301
500
5
Lundell
AC
Адлерберт
Линдберг
E
et al.
Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus
Clin Exp Allergy
2007
37
62
71
Lundell
AC
Хессельмар
B
Nordström
I
et al.
Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы
Clin Exp Allergy
2009
39
662
70
Мартин
Р
Ланга
S
Reviriego
C
et al.
Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков
Trends Food Sci Tech
2004
15
121
7
Масюк
H
Копрон
К
Grumann
D
et al.
Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Panton-valentine и генетическим фоном Staphylococcus aureus
J Clin Microbiol
2010
48
1527
35
Матуссек
А
Taipalensuu
J
Einemo
IM
et al.
Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, выявленная через spa , набрав
Am J Infect Control
2007
35
122
5
Mégevand
C
Жерве
А
Heininger
U
et al.
Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии
Clin Microbiol Infec
2010
16
1414
20
Мурчан
S
Кауфманн
ME
Deplano
A
et al.
Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus: Единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов
J Clin Microbiol
2003
41
1574
85
Отто
М.
Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген
Nat Rev Microbiol
2009
7
555
67
Парк
Б
Ивасе
Т
Лю
GY
Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей
Plos One
2011
6 (10)
e25880
Перес
PF
Доре
Дж
Leclerc
M
et al.
Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?
Педиатрия
2007
119
e724
32
Сабат
А
Kosowska
K
Poulsen
K
et al.
Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus
Заражение иммунной
2000
68
973
6
Шаумбург
F
Кёк
R
Mellmann
A
et al.
Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6 лет
J Clin Microbiol
2012
50
3186
92
Магазин
Б
Матема
В
Alcabes
P
et al.
Распространенность agr групп специфичности среди Staphylococcus aureus штаммов, колонизирующих детей и их опекунов
J Clin Microbiol
2003
41
456
9
Сим
К
Пауэлл
E
Shaw
AG
et al.
Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?
Arch Dis Child-Fetal
2013
98
362
64
Удо
EE
Аль-Свейл
N
Норонья
BC
Хромосомное расположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину
J Антимикробный Chemoth
2003
51
1283
6
Uhlemann
AC
Отто
M
Lowy
FD
et al.
Развитие метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2014
21
563
74
Фургон Белкум
A
Меллес
DC
Nouwen
J
et al.
Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2009
9
32
47
Ван Вамел
WJ
Rooijakkers
SH
Ruyken
M
et al.
Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах
Дж Бактериол
2006
188
1310
5
Vautor
E
Abadie
G
Pont
A
et al.
Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных
Vet Microbiol
2008
127
407
11
Витте
Вт
Стромменгер
В
Stanek
C
et al.
Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа
Emerg Infect Dis
2007
13
255
8
Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных и потенциальных микробных передач от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology
Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, взяв образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, которые использовались для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец, а также определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения. гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами мать-младенец определяли с помощью типирования spa , мультилокусного последовательного типирования (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из этих 41 извлеченных S. aureus 18 были устойчивыми к метициллину (MRSA) и 23 — чувствительными к метициллину (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью набора spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней колонизации кишечника S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.
ВВЕДЕНИЕ
Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в сообществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al., 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).
Staphylococcus aureus — это вид, который обычно встречается в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito ). и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).
Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).
В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).
В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus могли быть выделены из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, отследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.
МЕТОДЫ
Сборник образцов
Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (а) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Ранее соски и ареолу молочной железы промывали стерильной водой с мылом и пропитывали хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.
Процедуры отбора проб
изолятов S. aureus
Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l ‘ Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).
Молекулярное типирование изолятов
Молекулярную характеристику изолятов S. aureus проводили различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).
Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)
Когда похожие типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), PFGE провел анализ клонального родства (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклиномин-мантолин, хлорампроциклин, хлорампроциклин, хлорампроциклин и др.). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).
Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm). (A) , мм (B) , мм (C) , мм (F) , мм (T) , msr (A) , msr (B) , миль / час ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ′ ) -Ia , aph (3 ′ ) -IIIa , aac (6 ′ ) — Ie-aph (2 ′ ′ ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus изучали методом ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).
Обнаружение генов вирулентности
Анализ профиля вирулентности был выполнен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( п.н.) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).
Кластер иммунного уклонения
Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были разделены на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Выделение
S. aureus
Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 младенца (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7 день, трех на 14 день и десяти на 35 день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).
Таблица 1.
Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.
.
.
MRSA /
.
№
.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штамм
.
спа тип
.
агр .
SCC МЭК .
MLST / CC a .
Фенотип b .
Генотип
.
IEC тип c .
Другие гены d .
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus от матери ребенку
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Тип изоляторов Молекулярный
Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.
Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов spa (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.
Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).
Анализ PFGE для проверки потенциальной передачи от матери ребенку
Передача S. aureus
spa тип S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Между изолятами от матерей и младенцев из остальных восьми случаев сходства между и типами не наблюдалось.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 обладали фенотипом множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ′ ) -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).
Гены вирулентности
Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( и ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммов S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. Всего 35 изолятов содержали ген aur , а 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).
Анализ генов IEC
Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).
Персистентность
клонов S. aureus
Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).
ОБСУЖДЕНИЕ
Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент госпитализации (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.
Обращает на себя внимание генетическое разнообразие видов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).
Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ′ ). -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).
Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).
Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген эта , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, более распространенный в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).Анализ
PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон был обнаружен в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , которые колонизируют младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al., 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.
Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007). .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).
Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной чертой фекалий грудных детей по сравнению с фекалиями детей, вскармливаемых смесью (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в условиях больницы.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммов S. epidermidis , которые ингибируют in vivo колонизацию S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистой оболочки (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).
В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В этой связи важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.
Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.
ФИНАНСИРОВАНИЕ
Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.
Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.
ССЫЛКИ
Адлерберт
I
Линдберг
E
Aberg
N
et al.
Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация детского кишечника: влияние гигиенического образа жизни
Педиатр Res
2006
59
96
101
Баллард
О
Морроу
AL
Состав грудного молока: нутриенты и биоактивные факторы
Pediatr Clin N Am
2013
60
49
74
Бенито
D
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
et al.
Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании
Микроб Экол
2013
66
105
11
Бхалла
A
Арон
ДЦ
Донски
CJ
Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов
BMC Инфекция Dis
2007
7
105
Björkstén
B
Сепп
E
Julge
K
et al.
Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни
J Allergy Clin Immunol
2001
108
516
20
Бордерон
JC
Lionnet
C
Rondeau
C
et al.
Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки
Патол Биол
1996
44
416
22
Буржуа-Николаос
N
Люцет
JC
Daubié
C
et al.
Колонизация влагалища матери Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах
Paediatr Perinat Ep
2010
24
488
91
Чо
Я
Blaser
MJ
Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни
Nat Rev Genet
2012
13
260
70
Институт стандартов клинической лаборатории
Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24
2014
Уэйн, Пенсильвания, США
CLSI
Cucarella
С
Солано
С
Valle
J
et al.
Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок
Дж Бактериол
2001
183
2888
96
Delgado
S
Гарсия
пол.
Фернандес
L
et al.
Характеристика Staphylococcus aureus штаммов, вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота
FEMS Иммунол Мед Микрофон
2011
62
225
35
Деуренберг
RH
Rijnders
MI
Себастьян
S
et al.
Staphylococcus aureus клон-специфические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности клональных комплексов в пределах spa клональных комплексов
Диагностика Micr Infec Dis
2009
65
116
122
Домингес
E
Саразага
M
Торрес
К
Устойчивость к антибиотикам в изолятах Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей
J Clin Microbiol
2002
40
2638
41
Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)
Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014 г.
Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)
Фернандес
L
Ланга
S
Мартин
V
et al.
Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях
Pharmacol Res
2013
69
1
10
Gries
DM
Земзарс
TF
Gibson
KA
et al.
Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами
Am J Infect Control
2009
37
598
600
Harastani
HH
Арай
GF
Токаджян
ST
Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане
Int J Infect Dis
2014
19
33
8
Хармсен
D
Клаус
H
Witte
W
et al.
Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных
J Clin Microbiol
2003
41
5442
8
Hunt
км
Preuss
Дж
Nissan
C
et al.
Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков
Appl Environ Microb
2012
78
4763
70
Ивасе
Т
Уэхара
Y
Синдзи
H
et al.
Staphylococcus epidermidis sp подавляет Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию носа
Природа
2010
465
346
9
Жарро
S
Mougel
C
Thioulouse
J
et al.
Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетических фоновых факторов вирулентности, agr групп (аллелей) и болезнями человека
Заражение иммунной
2002
70
631
41
Джерниган
JA
Тяга
AL
Цветы
L
et al.
Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации
Инфекция Cont Hosp Ep
2003
24
409
14
Хименес
E
Delgado
S
Мальдонадо
A
et al.
Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей
BMC Microbiol
2008
8
143
Хименес-Трюке
N
Тедески
S
Saye
EJ
et al.
Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация
Передача золотистого стафилококка от матери новорожденному
Pediatr Infect Dis J
2012
31
360
3
Линдберг
E
Адлерберт
I
Hesselmar
B
et al.
Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца
J Clin Microbiol
2004
42
530
4
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
Бенито
D
et al.
Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97
Int J Med Microbiol
2011
301
500
5
Lundell
AC
Адлерберт
Линдберг
E
et al.
Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus
Clin Exp Allergy
2007
37
62
71
Lundell
AC
Хессельмар
B
Nordström
I
et al.
Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы
Clin Exp Allergy
2009
39
662
70
Мартин
Р
Ланга
S
Reviriego
C
et al.
Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков
Trends Food Sci Tech
2004
15
121
7
Масюк
H
Копрон
К
Grumann
D
et al.
Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Panton-valentine и генетическим фоном Staphylococcus aureus
J Clin Microbiol
2010
48
1527
35
Матуссек
А
Taipalensuu
J
Einemo
IM
et al.
Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, выявленная через spa , набрав
Am J Infect Control
2007
35
122
5
Mégevand
C
Жерве
А
Heininger
U
et al.
Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии
Clin Microbiol Infec
2010
16
1414
20
Мурчан
S
Кауфманн
ME
Deplano
A
et al.
Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus: Единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов
J Clin Microbiol
2003
41
1574
85
Отто
М.
Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген
Nat Rev Microbiol
2009
7
555
67
Парк
Б
Ивасе
Т
Лю
GY
Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей
Plos One
2011
6 (10)
e25880
Перес
PF
Доре
Дж
Leclerc
M
et al.
Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?
Педиатрия
2007
119
e724
32
Сабат
А
Kosowska
K
Poulsen
K
et al.
Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus
Заражение иммунной
2000
68
973
6
Шаумбург
F
Кёк
R
Mellmann
A
et al.
Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6 лет
J Clin Microbiol
2012
50
3186
92
Магазин
Б
Матема
В
Alcabes
P
et al.
Распространенность agr групп специфичности среди Staphylococcus aureus штаммов, колонизирующих детей и их опекунов
J Clin Microbiol
2003
41
456
9
Сим
К
Пауэлл
E
Shaw
AG
et al.
Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?
Arch Dis Child-Fetal
2013
98
362
64
Удо
EE
Аль-Свейл
N
Норонья
BC
Хромосомное расположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину
J Антимикробный Chemoth
2003
51
1283
6
Uhlemann
AC
Отто
M
Lowy
FD
et al.
Развитие метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2014
21
563
74
Фургон Белкум
A
Меллес
DC
Nouwen
J
et al.
Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2009
9
32
47
Ван Вамел
WJ
Rooijakkers
SH
Ruyken
M
et al.
Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах
Дж Бактериол
2006
188
1310
5
Vautor
E
Abadie
G
Pont
A
et al.
Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных
Vet Microbiol
2008
127
407
11
Витте
Вт
Стромменгер
В
Stanek
C
et al.
Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа
Emerg Infect Dis
2007
13
255
8
Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных и потенциальных микробных передач от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology
Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, взяв образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, которые использовались для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец, а также определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения. гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами мать-младенец определяли с помощью типирования spa , мультилокусного последовательного типирования (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из этих 41 извлеченных S. aureus 18 были устойчивыми к метициллину (MRSA) и 23 — чувствительными к метициллину (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью набора spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней колонизации кишечника S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.
ВВЕДЕНИЕ
Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в сообществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al., 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).
Staphylococcus aureus — это вид, который обычно встречается в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito ). и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).
Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).
В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).
В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus могли быть выделены из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, отследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.
МЕТОДЫ
Сборник образцов
Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (а) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Ранее соски и ареолу молочной железы промывали стерильной водой с мылом и пропитывали хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.
Процедуры отбора проб
изолятов S. aureus
Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l ‘ Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).
Молекулярное типирование изолятов
Молекулярную характеристику изолятов S. aureus проводили различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).
Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)
Когда похожие типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), PFGE провел анализ клонального родства (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклиномин-мантолин, хлорампроциклин, хлорампроциклин, хлорампроциклин и др.). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).
Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm). (A) , мм (B) , мм (C) , мм (F) , мм (T) , msr (A) , msr (B) , миль / час ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ′ ) -Ia , aph (3 ′ ) -IIIa , aac (6 ′ ) — Ie-aph (2 ′ ′ ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus изучали методом ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).
Обнаружение генов вирулентности
Анализ профиля вирулентности был выполнен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( п.н.) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).
Кластер иммунного уклонения
Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были разделены на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Выделение
S. aureus
Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 младенца (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7 день, трех на 14 день и десяти на 35 день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).
Таблица 1.
Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.
.
.
MRSA /
.
№
.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штамм
.
спа тип
.
агр .
SCC МЭК .
MLST / CC a .
Фенотип b .
Генотип
.
IEC тип c .
Другие гены d .
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus от матери ребенку
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Тип изоляторов Молекулярный
Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.
Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов spa (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.
Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).
Анализ PFGE для проверки потенциальной передачи от матери ребенку
Передача S. aureus
spa тип S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Между изолятами от матерей и младенцев из остальных восьми случаев сходства между и типами не наблюдалось.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 обладали фенотипом множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ′ ) -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).
Гены вирулентности
Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( и ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммов S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. Всего 35 изолятов содержали ген aur , а 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).
Анализ генов IEC
Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).
Персистентность
клонов S. aureus
Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).
ОБСУЖДЕНИЕ
Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент госпитализации (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.
Обращает на себя внимание генетическое разнообразие видов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).
Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ′ ). -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).
Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).
Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген эта , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, более распространенный в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).Анализ
PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон был обнаружен в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , которые колонизируют младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al., 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.
Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007). .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).
Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной чертой фекалий грудных детей по сравнению с фекалиями детей, вскармливаемых смесью (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в условиях больницы.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммов S. epidermidis , которые ингибируют in vivo колонизацию S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистой оболочки (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).
В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В этой связи важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.
Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.
ФИНАНСИРОВАНИЕ
Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.
Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.
ССЫЛКИ
Адлерберт
I
Линдберг
E
Aberg
N
et al.
Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация детского кишечника: влияние гигиенического образа жизни
Педиатр Res
2006
59
96
101
Баллард
О
Морроу
AL
Состав грудного молока: нутриенты и биоактивные факторы
Pediatr Clin N Am
2013
60
49
74
Бенито
D
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
et al.
Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании
Микроб Экол
2013
66
105
11
Бхалла
A
Арон
ДЦ
Донски
CJ
Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов
BMC Инфекция Dis
2007
7
105
Björkstén
B
Сепп
E
Julge
K
et al.
Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни
J Allergy Clin Immunol
2001
108
516
20
Бордерон
JC
Lionnet
C
Rondeau
C
et al.
Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки
Патол Биол
1996
44
416
22
Буржуа-Николаос
N
Люцет
JC
Daubié
C
et al.
Колонизация влагалища матери Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах
Paediatr Perinat Ep
2010
24
488
91
Чо
Я
Blaser
MJ
Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни
Nat Rev Genet
2012
13
260
70
Институт стандартов клинической лаборатории
Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24
2014
Уэйн, Пенсильвания, США
CLSI
Cucarella
С
Солано
С
Valle
J
et al.
Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок
Дж Бактериол
2001
183
2888
96
Delgado
S
Гарсия
пол.
Фернандес
L
et al.
Характеристика Staphylococcus aureus штаммов, вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота
FEMS Иммунол Мед Микрофон
2011
62
225
35
Деуренберг
RH
Rijnders
MI
Себастьян
S
et al.
Staphylococcus aureus клон-специфические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности клональных комплексов в пределах spa клональных комплексов
Диагностика Micr Infec Dis
2009
65
116
122
Домингес
E
Саразага
M
Торрес
К
Устойчивость к антибиотикам в изолятах Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей
J Clin Microbiol
2002
40
2638
41
Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)
Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014 г.
Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)
Фернандес
L
Ланга
S
Мартин
V
et al.
Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях
Pharmacol Res
2013
69
1
10
Gries
DM
Земзарс
TF
Gibson
KA
et al.
Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами
Am J Infect Control
2009
37
598
600
Harastani
HH
Арай
GF
Токаджян
ST
Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане
Int J Infect Dis
2014
19
33
8
Хармсен
D
Клаус
H
Witte
W
et al.
Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных
J Clin Microbiol
2003
41
5442
8
Hunt
км
Preuss
Дж
Nissan
C
et al.
Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков
Appl Environ Microb
2012
78
4763
70
Ивасе
Т
Уэхара
Y
Синдзи
H
et al.
Staphylococcus epidermidis sp подавляет Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию носа
Природа
2010
465
346
9
Жарро
S
Mougel
C
Thioulouse
J
et al.
Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетических фоновых факторов вирулентности, agr групп (аллелей) и болезнями человека
Заражение иммунной
2002
70
631
41
Джерниган
JA
Тяга
AL
Цветы
L
et al.
Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации
Инфекция Cont Hosp Ep
2003
24
409
14
Хименес
E
Delgado
S
Мальдонадо
A
et al.
Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей
BMC Microbiol
2008
8
143
Хименес-Трюке
N
Тедески
S
Saye
EJ
et al.
Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация
Передача золотистого стафилококка от матери новорожденному
Pediatr Infect Dis J
2012
31
360
3
Линдберг
E
Адлерберт
I
Hesselmar
B
et al.
Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца
J Clin Microbiol
2004
42
530
4
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
Бенито
D
et al.
Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97
Int J Med Microbiol
2011
301
500
5
Lundell
AC
Адлерберт
Линдберг
E
et al.
Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus
Clin Exp Allergy
2007
37
62
71
Lundell
AC
Хессельмар
B
Nordström
I
et al.
Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы
Clin Exp Allergy
2009
39
662
70
Мартин
Р
Ланга
S
Reviriego
C
et al.
Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков
Trends Food Sci Tech
2004
15
121
7
Масюк
H
Копрон
К
Grumann
D
et al.
Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Panton-valentine и генетическим фоном Staphylococcus aureus
J Clin Microbiol
2010
48
1527
35
Матуссек
А
Taipalensuu
J
Einemo
IM
et al.
Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, выявленная через spa , набрав
Am J Infect Control
2007
35
122
5
Mégevand
C
Жерве
А
Heininger
U
et al.
Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии
Clin Microbiol Infec
2010
16
1414
20
Мурчан
S
Кауфманн
ME
Deplano
A
et al.
Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus: Единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов
J Clin Microbiol
2003
41
1574
85
Отто
М.
Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген
Nat Rev Microbiol
2009
7
555
67
Парк
Б
Ивасе
Т
Лю
GY
Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей
Plos One
2011
6 (10)
e25880
Перес
PF
Доре
Дж
Leclerc
M
et al.
Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?
Педиатрия
2007
119
e724
32
Сабат
А
Kosowska
K
Poulsen
K
et al.
Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus
Заражение иммунной
2000
68
973
6
Шаумбург
F
Кёк
R
Mellmann
A
et al.
Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6 лет
J Clin Microbiol
2012
50
3186
92
Магазин
Б
Матема
В
Alcabes
P
et al.
Распространенность agr групп специфичности среди Staphylococcus aureus штаммов, колонизирующих детей и их опекунов
J Clin Microbiol
2003
41
456
9
Сим
К
Пауэлл
E
Shaw
AG
et al.
Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?
Arch Dis Child-Fetal
2013
98
362
64
Удо
EE
Аль-Свейл
N
Норонья
BC
Хромосомное расположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину
J Антимикробный Chemoth
2003
51
1283
6
Uhlemann
AC
Отто
M
Lowy
FD
et al.
Развитие метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2014
21
563
74
Фургон Белкум
A
Меллес
DC
Nouwen
J
et al.
Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2009
9
32
47
Ван Вамел
WJ
Rooijakkers
SH
Ruyken
M
et al.
Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах
Дж Бактериол
2006
188
1310
5
Vautor
E
Abadie
G
Pont
A
et al.
Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных
Vet Microbiol
2008
127
407
11
Витте
Вт
Стромменгер
В
Stanek
C
et al.
Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа
Emerg Infect Dis
2007
13
255
8
Характеристика штаммов Staphylococcus aureus, выделенных из фекалий здоровых новорожденных и потенциальных микробных передач от матери ребенку при грудном вскармливании | FEMS Microbiology Ecology
Двадцать одна женщина и их соответствующие дети-одиночки участвовали в этом исследовании, взяв образцы грудного молока и фекалий (на 7, 14 и 35 дни после рождения), соответственно, которые использовались для выздоровления Staphylococcus aureus .Цель состояла в том, чтобы отследить носительство S. aureus в молоке и детских фекалиях пар мать-младенец, а также определить генетические линии изолятов, их потенциальные клональные отношения и их содержание в кластере устойчивости к противомикробным препаратам, вирулентности и иммунного уклонения. гены. Молекулярная характеристика была выполнена с помощью ПЦР и секвенирования. Клональные отношения между изолятами мать-младенец определяли с помощью типирования spa , мультилокусного последовательного типирования (MLST) и гель-электрофореза в импульсном поле (PFGE). Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 ребенка (25 изолятов). Из этих 41 извлеченных S. aureus 18 были устойчивыми к метициллину (MRSA) и 23 — чувствительными к метициллину (MSSA). Среди S. aureus было обнаружено двенадцать типов differentes spa и восемь типов последовательностей. Преобладающими клональными комплексами были CC5 (43,9%) и CC30 (36,6%). Штаммы MRSA показали профиль множественной лекарственной устойчивости, 65.2% штаммов MSSA содержали ген токсина tsst-1 , а 26,8% всех штаммов несли ген cna . Потенциальная передача S. aureus от матери ребенку была продемонстрирована в четырех случаях с помощью набора spa , MLST и PFGE (передача t322 / ST5 / CC5-PFGE-A, t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C). Грудное вскармливание, по-видимому, способствует ранней колонизации кишечника S. aureus у новорожденных, что может повлиять на развитие иммунной системы.
ВВЕДЕНИЕ
Ранняя жизнь, по-видимому, является решающим периодом для правильного установления микробиоты кишечника с краткосрочными, среднесрочными и долгосрочными последствиями для здоровья хозяина (Sim et al. , 2013). На этом жизненном этапе вертикальная передача микробов от матери ребенку обычно играет ключевую роль в начальной колонизации кишечника новорожденного (Cho and Blaser 2012). Хотя существует множество исследований потенциальной передачи этих бактерий, наиболее часто участвующих в неонатальном сепсисе (например,грамм. Streptococcus agalactiae , Escherichia coli ), данные о других бактериях, которые могут иметь эпидемиологическое значение в сообществе, таких как Staphylococcus aureus , немногочисленны (Bourgeois-Nicolaos et al., 2010; Delgado et al. , 2011; Хименес-Трук и др. , 2012; Лешем и др. , 2012).
Staphylococcus aureus — это вид, который обычно встречается в составе нормальной микробиоты человека, в основном в ротоглотке, носу и коже, хотя его также можно найти как часть микробиоты кишечника (Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Benito ). и другие., 2013) как здоровых, так и госпитализированных хозяев. Золотистый стафилококк — чрезвычайно универсальный условно-патогенный микроорганизм с множеством механизмов, способных вызывать заболевание и обходить иммунную защиту. Следовательно, заселение доношенных новорожденных этим видом может увеличить риск инфицирования в раннем возрасте (van Belkum et al. , 2009). Тем не менее, в других исследованиях сообщается, что перинатальная колонизация S. aureus может иметь положительный эффект на развитие иммунной системы новорожденных (Lundell et al., 2007).
Staphylococcus aureus может содержать или приобретать различные детерминанты устойчивости, и среди них приобретение гена mecA особенно актуально, поскольку он придает устойчивость к метициллину и большинству бета-лактамов. Метициллин-устойчивый S. aureus (MRSA) может поражать как госпитализированных (HA-MRSA), так и местных (CA-MRSA) пациентов. С другой стороны, S. aureus может продуцировать большое количество факторов вирулентности, которые могут усугубить клинический исход стафилококковых инфекций (Jarraud et al., 2002). Некоторые из наиболее важных факторов вирулентности — лейкоцидин Пантона-Валентайна (PVL), токсин 1 синдрома токсического шока (TSST-1), различные гемолизины, эксфолиатины, энтеротоксины и другие факторы вирулентности, которые способствуют клеточной инвазии, росту бактерий и уклонению от иммунитета (Sabat и др. , 2000; Cucarella и др. , 2001; Jarraud и др. , 2002; van Wamel и др. , 2006; Витте и др. , 2007).
В последнее время возник особый интерес к генетическим линиям S.aureus , которые циркулируют в разных средах, чтобы отслеживать их эволюцию в разных нишах и знать потенциальные первоисточники. В этом смысле кластер иммунного уклонения (IEC) может быть важным маркером, разрешающим S . aureus , чтобы избежать действия некоторых компонентов врожденной иммунной системы человека. Изоляты, адаптированные для животных-хозяев, часто не имеют генов системы IEC (Benito et al. , 2013).
В предыдущем исследовании нашей группы оценивалось культивируемое бактериальное разнообразие молока и фекалий 16 кормящих матерей и их младенцев, находящихся на грудном вскармливании, соответственно (Jiménez et al., 2008). Выделенные изолятов S. epidermidis и энтерококков были полностью охарактеризованы (Jiménez et al. , 2008). Кроме того, изолятов S. aureus могли быть выделены из некоторых из этих пар мать-младенец, но они не были охарактеризованы. Целью этого исследования было, во-первых, отследить носительство S. aureus в образцах молока и детских фекалий, предоставленных 21 парой мать-ребенок (включая 16 из предыдущего исследования и 5 дополнительных, привлеченных в этом исследовании). и, позднее, для определения генетических линий изолятов, потенциальных клональных взаимоотношений между этими изолятами, полученных в одной паре мать-младенец, и их содержания в генах устойчивости к противомикробным препаратам, а также в генах вирулентности и IEC.
МЕТОДЫ
Сборник образцов
Всего в исследовании участвовала 21 женщина и их соответствующие дети-одиночки, которые соответствовали следующим характеристикам: (а) здоровые женщины с нормальной доношенной беременностью; (б) вагинальные роды; (c) отсутствие перинатальных проблем у младенца и / или матери, включая мастит, и отсутствие использования антибиотиков во время родов; и (d) младенцы, находящиеся на исключительно грудном вскармливании. Все добровольцы дали письменное информированное согласие на протокол, который был одобрен этическими комитетами больницы Joan XXIII (Таррагона, Испания) и больницы Clínico San Carlos (Мадрид, Испания).Женщины и их младенцы предоставили образцы грудного молока и фекалий соответственно на 7, 14 и 35 дни после рождения. Образцы молока собирали в стерильных условиях в стерильную пробирку путем ручного сцеживания с использованием стерильных перчаток. Ранее соски и ареолу молочной железы промывали стерильной водой с мылом и пропитывали хлоргексидином (Cristalmina, Salvat, Барселона, Испания). Первые капли (~ 500 мкл) были отброшены. Образцы фекалий (~ 5 г) собирали в отдельные стерильные контейнеры для фекалий.Все образцы хранились при 4ºC до доставки в лабораторию (максимум 12 часов) и сразу же обрабатывались.
Процедуры отбора проб
изолятов S. aureus
Разведения образцов высевали на две селективные среды: агар Байрда – Паркера и агар Колумбия – Налидиксовая кислота (BioMerieux, Marcy l ‘ Etoile, Франция). От 5 до 10 репрезентативных изолятов, морфология колоний и другие фенотипические характеристики (форма клеток, окрашивание по Граму, активность каталазы и оксидазы) были совместимы с таковыми для стафилококков (включая, по крайней мере, одного представителя каждой морфологии колонии), были отобраны из каждого питательная среда, выращенная в бульоне BHI и хранящаяся при -80ºC в присутствии глицерина (30%, об. / об.).Все изоляты были идентифицированы до видового уровня с помощью метода мультиплексной ПЦР на основе генов dnaJ (Jiménez et al. , 2008), и идентификация была позже подтверждена с помощью MALDI-TOF (VITEK MS, BioMerieux). Впоследствии в это исследование были включены все изоляты, которые были идентифицированы как S. aureus либо из образцов молока, либо из фекалий. Присутствие гена nuc было также изучено для дальнейшего подтверждения изолятов S. aureus (Lozano et al., 2011).
Молекулярное типирование изолятов
Молекулярную характеристику изолятов S. aureus проводили различными молекулярными методами. Было проведено типирование Spa (Harmsen et al. , 2003) и полученные последовательности проанализированы с использованием программного обеспечения Ridom Staph Type версии 1.5.21 (Ridom GmbH). Определение аллотипов agr — дополнительных регуляторных локусов генов — выполняли с помощью двух мультиплексных ПЦР (Shopsin et al., 2003) для всех изолятов. Мультилокусное типирование последовательностей (MLST) было также выполнено для одного представителя каждого типа spa , обнаруженного в этом исследовании, для определения типа последовательности (ST) и клонального комплекса (CC) изолятов (www.saureus.mlst.net).
Гель-электрофорез в импульсном поле (PFGE)
Когда похожие типы spa были идентифицированы среди изолятов, полученных от данной матери и ее соответствующего ребенка (и, следовательно, предполагая потенциальную передачу от матери ребенку), PFGE провел анализ клонального родства (Murchan и другие., 2003) тотальной ДНК, расщепленной эндонуклеазой Sma I (New England Biolabs). Гель готовили на 1,8% агаре и прогоняли в течение 22 часов при 6 В см –1 , используя время импульса от 5 до 50 с. Электрофорез проводили в системе CHEF DR-II (Bio-Rad). Стандартный ДНК-маркер (Lambda Ladder PFG Marker, New England Biolab) был включен в гель.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Тестирование чувствительности проводилось методом диско-диффузионного агара для 17 противомикробных препаратов (пенициллин, оксациллин, цефокситин, эритромицин, клиндамицин, ципрофлоксацин, гентамицин, стрептомицин, канамицин, тобрамицин, тетрациклиномин-мантолин, хлорампроциклин, хлорампроциклин, хлорампроциклин и др.). фузидиевая кислота) в соответствии с рекомендациями CLSI и EUCAST (CLSI 2014; EUCAST 2014).Кроме того, был проведен D-тест для выявления индуцибельной устойчивости к клиндамицину (CLSI 2014).
Наличие 25 генов устойчивости [ mec (A) , blaZ , tet (M) , tet (K) , tet (L) , tet (O) , erm). (A) , мм (B) , мм (C) , мм (F) , мм (T) , msr (A) , msr (B) , миль / час ( C) , lnu (A) , lnu (B) , vga (A) , ant (4 ′ ) -Ia , aph (3 ′ ) -IIIa , aac (6 ′ ) — Ie-aph (2 ′ ′ ) , aad (A) , aad (E) , str , fus (B) и fus (C) ] в S.aureus изучали методом ПЦР (Удо, Аль-Свейл и Норонха, 2003; Лозано, и др., , 2011; Бенито, и др., , 2013).
Обнаружение генов вирулентности
Анализ профиля вирулентности был выполнен с помощью ПЦР для выявления следующих генетических детерминант: лейкоцидин Пантона-Валентайна ( lukF / lukS- PV ) , токсин синдрома токсического шока ( tsst-1 ) и эксфолиативный токсин A ( eta ), B ( etd ) и D ( etd ).Кроме того, гены, кодирующие лейкоцидины DE ( lukD-lukE ) и M ( lukM ), ауреолизин ( aur ), ассоциированный с биопленкой белок ( п.н.) и коллаген-связывающий белок ( cna ). ) также были изучены с помощью ПЦР (Sabat et al. , 2000; Cucarella et al. , 2001; Witte et al. , 2007; Lozano et al. , 2011; Benito et al. , 2013).
Кластер иммунного уклонения
Пять генов, составляющих IEC ( scn , chp, sak и sea или sep ), были изучены с помощью ПЦР.В зависимости от наличия или отсутствия этих генов и их различных комбинаций все изоляты S. aureus были разделены на семь типов IEC в соответствии с ранее описанными схемами (van Wamel et al. , 2006).
РЕЗУЛЬТАТЫ
Выделение
S. aureus
Staphylococcus aureus был выделен из образцов молока 6 из 21 матери (16 изолятов) и из образцов фекалий 12 из 21 младенца (25 изолятов) (Таблица 1).Более конкретно, S. aureus был получен в образцах фекалий двух младенцев на 7 день, трех на 14 день и десяти на 35 день после рождения (таблица 2). Золотистый стафилококк был обнаружен как в молоке матери, так и в фекалиях младенца в шести из исследованных случаев. Выявлено четыре потенциальных случая передачи инфекции от матери ребенку при грудном вскармливании (таблица 1).
Таблица 1.
Основные характеристики штаммов S. aureus , выделенных от матерей и младенцев в этом исследовании.
.
.
MRSA /
.
№
.
Молекулярное типирование
.
Устойчивость к противомикробным препаратам
.
Факторы вирулентности
.
Чемодан
.
Происхождение
.
MSSA
.
штамм
.
спа тип
.
агр .
SCC МЭК .
MLST / CC a .
Фенотип b .
Генотип
.
IEC тип c .
Другие гены d .
A. Случаи потенциальной передачи S. aureus от матери ребенку
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Staphylococcus aureus штаммов, выделенных из 12 случаев от матери к ребенку и потенциального переноса от матери к ребенку в четырех случаях, по оценке с помощью типирования PFGE -spa -MLST.
.
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
1056 1057 1057 56 57 .
Изоляты детских фекалий
.
.
Оценка PFGE сходных молекулярных линий в фекалиях и молоке
.
Ящики
.
7 дней
.
14 дней
.
35 дней
.
Изоляты молока
.
Штаммы
.
тип спа .
MLST
.
Шаблоны PFGE a .
Корпус 1
C5515
C6429 до C6436
C5515, C6429, C6433, C6435
t322
ST5
C55
C5524, C5525
C5526, C5527
C6438
C5522, C5524, C5526, C6438
t322
ST5
A
C55,
C,
C5535, C5536, C5537
C6437
C5520, C5537, C6437
t136
ST34
B
Корпус 4
C51162 ST1869
C
Корпус 5
C5513
C5514
Корпус 6
C5516
C5517
71162
Корпус 8
C5511, C5512
Корпус 10
C5530
Корпус 11
1162
Корпус 12
C5533
C5532, C5534, C6439, C6440
Тип изоляторов Молекулярный
Всего 41 S.aureus были выделены в этом исследовании от матерей и младенцев, и 18 из них были признаны MRSA, поскольку они показали устойчивость к оксациллину и цефокситину и были положительными по гену mec A. Эти изоляты MRSA были получены от 2 из 21 протестированной матери (9,6%) и от 5 из 21 ребенка (23,8%). Остальные 23 изолята были чувствительны к оксациллину и цефокситину, не имели гена mecA и рассматривались как MSSA.
Результаты полной характеристики всех изолятов MRSA и MSSA, выделенных в этом исследовании, показаны в таблице 1.Было обнаружено двенадцать различных типов spa (t002, t012, t015, t021, t122, t136, t148, t166, t322, t440, t5204 и новый тип spa , зарегистрированный как t10664 в Ridom Spa Server), и большинство Частые agr аллотипов были II и III.
Изоляты Staphylococcus aureus принадлежали к восьми различным типам последовательностей (ST5, ST8, ST15, ST30, ST34, ST45, ST1434 и ST1869), включенным в шесть различных клональных комплексов (CC5, CC8, CC15, CC30, CC45 и CC72).Изоляты MRSA были типированы как ST5 ( spa -322 и spa -t002), отнесены к клональному комплексу CC5 и типизированы как SCC mec IV. Другие ST, идентифицированные среди MSSA, были (приписаны ST / CC): ST8 / CC8, ST15 / CC15, ST30-ST34-ST1869 / CC30, ST45 / CC45 и ST1434 / CC72. Преобладающими клональными комплексами были CC5 и CC30, они составляли 43,9 и 36,6% от общего числа изолятов (таблица 1).
Анализ PFGE для проверки потенциальной передачи от матери ребенку
Передача S. aureus
spa тип S.aureus от матерей и младенцев предполагают потенциальную передачу инфекции от матери к ребенку в четырех парах мать-младенец (случаи 1–4). Чтобы прояснить этот вопрос, сравнивали профили PFGE изолятов с аналогичными типами spa . Было подтверждено совместное использование клона MRSA t322 / ST5 / CC5-PFGE-A между матерями и младенцами в случаях 1 и 2. Точно так же клоны MSSA t136 / ST34 / CC30-PFGE-B и MSSA t021 / ST1869 / CC30-PFGE-C были общими для случая 3 и случая 4 соответственно (таблица 2, рис.1). Между изолятами от матерей и младенцев из остальных восьми случаев сходства между и типами не наблюдалось.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C.Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Рисунок 1. Анализ
PFGE- SmaI изолятов S. aureus в случаях потенциальной передачи от матери ребенку. Строки 1-8 показывают штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаям 1 и 2 с профилем PFGE A. Строки 9-11: штаммы матери и ребенка, принадлежащие к случаю 3 с профилем PFGE B. Строки 12 и 13: штаммы матери и ребенка. младенец из случая 4 с профилем PFGE C. Сокращения. В: младенец; Мо: мама.
Тестирование чувствительности и обнаружение генов устойчивости к противомикробным препаратам
Изоляты MSSA показали чувствительность к большинству протестированных противомикробных препаратов, за исключением двух изолятов, отнесенных к линиям CC30 и CC45, которые проявляли устойчивость к стрептомицину и содержали ген str . С другой стороны, изоляты MRSA-CC5-t322 обладали фенотипом множественной лекарственной устойчивости с устойчивостью к эритромицину, клиндамицину, гентамицину, тобрамицину и канамицину в дополнение к устойчивости к метициллину; эти изоляты несли erm (C) , aac (6 ′ ) -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III , и два из них также несли ген lnu (A) .В дополнение к вышеупомянутым противомикробным препаратам один изолят, типизированный как t002-ST5 / CC5, показал устойчивость к ципрофлоксацину, стрептомицину и фузидовой кислоте, содержащий гены str и fus (C) (Таблица 1).
Гены вирулентности
Различное количество факторов вирулентности было обнаружено среди 41 изолята S. aureus (таблица 1). Интересно, что 15 изолятов MSSA, принадлежащих к клональному комплексу CC30, содержали ген токсина tsst-1 (36.6%), тогда как восемь изолятов (три MRSA-CC5 и пять MSSA-CC30) несли ген эксфолиативного токсина A ( и ). Пять из протестированных младенцев содержали в своих фекалиях TSST-продуцирующие штаммов S. aureus клонального комплекса CC30 (в двух случаях он также был обнаружен в молоке их матерей). Гены lukD – lukE были обнаружены у 30 изолятов (73,2%), из них 18 MRSA и 12 MSSA. Всего 35 изолятов содержали ген aur , а 12 были положительными по гену cna (принадлежащему в основном к клональным комплексам CC30 и CC45).Все изоляты были отрицательными на присутствие генов lukF / lukS- PV, lukM, bap, etb или etd (таблица 1).
Анализ генов IEC
Только шесть изолятов S. aureus MSSA-CC30 из 41 исследованных S. aureus не содержали гены IEC. Среди остальных изолятов были получены следующие типы IEC (тип IEC / CC): A / CC30, B / CC30-CC45-CC8-CC72, C / CC15, E / CC30-CC5 и F / CC5-CC45. Типы IEC D и G не были обнаружены ни в одном из изолятов (таблица 1).
Персистентность
клонов S. aureus
Один и тот же клон S. aureus был выделен от одного и того же младенца, по крайней мере, в два разных периода отбора проб, в случаях 2 и 5, что указывает на клональную персистентность. У остальных младенцев S. aureus было выделено только в одной из трех проб фекалий, полученных в течение исследуемого периода (35 дней).
ОБСУЖДЕНИЕ
Высокий уровень фекального носительства S. aureus (12 из 21 протестированного, 57%) был обнаружен среди здоровых младенцев в этом исследовании в течение первых 35 дней их жизни.Штаммы MRSA были обнаружены у 5 из этих 12 младенцев, что составляет 23,8% от общего числа протестированных младенцев. Ни у одного из MRSA-положительных младенцев, выявленных в этом исследовании, не развилась инфекция MRSA в течение следующих 6 лет жизни (данные не показаны). В предыдущих исследованиях сообщалось о фекальном носительстве S. aureus в диапазоне от 6 до 65% у здоровых младенцев (Björkstén et al. , 2001; Dominguez, Zarazaga and Torres 2002; Lindberg et al. 2004) и заметно более низком MRSA. Показатели вынашивания здоровых детей и людей на момент госпитализации (0–5%) (Dominguez, Zarazaga and Torres, 2002; Jernigan et al., 2003), хотя зарегистрированный процент увеличился среди госпитализированных пациентов (24%) (Klotz et al. , 2005). Кроме того, предыдущее исследование показало, что колонизация кишечника младенца S. aureus была высокой в течение первого месяца жизни, но уменьшалась в последующие недели (Björkstén et al. , 2001). В нашем исследовании самая высокая распространенность у младенцев была обнаружена через 35 дней после рождения. Что касается образцов молока протестированных матерей, два из 21 (9,6%) содержали MRSA, что также свидетельствует о высоком уровне носительства.
Обращает на себя внимание генетическое разнообразие видов spa , выявленных в нашем исследовании (12 различных типов spa , включая новый). Более одной трети штаммов показали типов spa , которые можно отнести к клональному комплексу CC30, линии, которая, по-видимому, успешно колонизирует людей и показала большую повсеместность (Deurenberg et al. , 2009). Этот клональный комплекс, по-видимому, связан с внебольничными инфекциями 9 . Наши штаммы MSSA CC30 показали небольшое количество генов устойчивости к противомикробным препаратам, но замечательный профиль генов вирулентности; Фактически, более 90% штаммов MSSA-CC30 содержат ген токсина синдрома токсического шока ( tsst-1 ).Эта связь между MSSA-CC30 и tsst-1 наблюдалась в других исследованиях (Deurenberg et al. 2009), но в меньших процентах, чем в нашем исследовании (Mégevand et al. , 2010; Lozano et al. , 2011). Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , продуцирующими токсины с суперантигенной функцией (TSST-1), по-видимому, способствует системным ответам IgA у новорожденных, которые отрицательно коррелируют с развитием аллергии (Lundell et al. , 2009).
Примерно одна треть из штаммов S. aureus была типирована как MRSA-t322-ST5-CC5, с agr -II и SCC mec IV. Эти штаммы показали типичный профиль HA-MRSA (Schaumburg et al. , 2012), продемонстрировали множественную лекарственную устойчивость (макролиды, линкозамины и аминоглюкозиды) и различные гены устойчивости к противомикробным препаратам, включая erm (C), aac (6 ′ ). -Ie-aph (2 ′ ′ ), ant (4 ′ ) -Ia и aph (3 ′ ) -III, а также lnu (A) в двух из них .Обнаружение IEC типа F или E во всех этих штаммах дополнительно подтверждает их профиль HA-MRSA (Benito et al. , 2013).
Интересно, что в одном образце фекалий был обнаружен один штамм MSSA t148 / ST1434-CC72; эта клада S aureus ранее была связана со штаммами CA-MRSA, обнаруженными в азиатских странах (Harastani, Araj and Tokajian, 2014), но в нашем случае у штамма CC72 отсутствовали детерминанты устойчивости к метициллину. Точно так же штамм MSSA, типизированный как t10664 / ST8-CC8, не обладал генами токсина PVL и, следовательно, не демонстрировал типичный профиль CA-MRSA (Uhlemann et al., 2014).
Все наши штаммы S. aureus были PVL-отрицательными, а luk-M отрицательными. Более того, ни один из них не содержал ген bap , кодирующий ассоциированный с биопленкой белок (Cucarella et al. , 2001). Ранее предполагалось, что распространенность гена bap среди штаммов S. aureus очень низкая (Vautor et al. , 2008). Кроме того, восемь штаммов (19,5%) несли ген эта , кодирующий эксфолиативный токсин А, и они были отнесены к клональным комплексам CC5 и CC30.Сообщалось, что эти штаммы вызывают стафилококковый синдром ошпаренной кожи и импетиго (Masiuk et al. , 2010). Кроме того, 73,2% наших штаммов несли гены lukD – lukE , которые кодируют лейкотоксин, более распространенный в HA-MRSA (Uhlemann et al. , 2014). Двенадцать штаммов CC8, CC30 или CC45 содержат ген cna , кодирующий коллаген-связывающий белок, в основном связанный с приобретенным сообществом MRSA или MSSA (Deurenberg et al. , 2009).Анализ
PFGE выявил четыре случая возможной передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко (рис. 1). Интересно, что один и тот же клон был обнаружен в образцах молока и фекалий младенцев в двух разных случаях (случаи 1 и 2). Некоторые авторы предполагают, что колонизированная кожа родителей является источником большей части S. aureus , которые колонизируют младенцев или младенческую микробиоту кишечника (Gries et al., 2009), в то время как другие предполагают, что сотрудники родильного отделения могут быть еще одним источником заражения. передача между младенцами и матерями (Matussek et al., 2007). Кроме того, есть исследования, которые постулируют, что увеличение частоты появления S. aureus на коже госпитализированных пациентов может быть потенциальным источником, способствующим внутрибольничной передаче (Bhalla, Aron and Donskey 2007). В нашем исследовании клон t322-CC5, который был обнаружен в двух случаях потенциальной передачи от матери ребенку, мог иметь больничное происхождение, поскольку он обладал типичными характеристиками HA-MRSA. Младенцы случаев 1 и 2 родились в одной больнице, но с разницей в 6 месяцев.
Грудное молоко представляет собой сложную биологическую жидкость, специфичную для каждого вида, адаптированную для удовлетворения пищевых потребностей быстро растущего младенца; Кроме того, он обучает иммунную систему младенца и обеспечивает определенную степень защиты от патогенов. Эти эффекты отражают синергетическое действие многих биоактивных молекул (Ballard et al. , 2013). Кроме того, недавние исследования показали, что грудное молоко является постоянным источником бактерий для кишечника младенца, а исследования как в культуре, так и в микробиоме показали, что стафилококки, в основном ЦНС, составляют доминирующие бактерии в этой биологической жидкости (Fernández et al. ., 2013). Интересно, что и S. aureus , и S. epidermidis относятся к микроорганизмам с самой высокой способностью метаболизировать олигосахариды грудного молока (Hunt et al. , 2012). Различные исследования показывают, что некоторые бактерии, присутствующие в кишечнике матери, включая стафилококки, могут достигать молочной железы на поздних сроках беременности и в период лактации через механизм, включающий моноциты кишечника (Martin et al. , 2004; Pérez et al. , 2007). .Ранняя колонизация кишечника изолятами S. aureus , включая токсигенные изоляты, влияет на уровень растворимого CD14 или IgA, циркулирующих в плазме новорожденных, что влияет на развитие иммунной системы и риск развития аллергии (Lundell et al. , 2007, 2009).
Присутствие S. epidermidis в кишечнике младенца, по-видимому, является отличительной чертой фекалий грудных детей по сравнению с фекалиями детей, вскармливаемых смесью (Borderon et al., 1996; Adlerberth et al. , 2006; Хименес и др. , 2008). В этом контексте обильное присутствие этого вида во всех образцах молока и фекалий, протестированных в этом исследовании (данные не показаны) (Jiménez et al. , 2008), может объяснить, по крайней мере частично, почему все младенцы оставались здоровыми на протяжении всего периода. период обучения, а также в последующие годы. Действительно, ЦНС, обеспечиваемая грудным молоком, может быть особенно полезной для уменьшения приобретения нежелательных патогенов младенцами, находящимися в условиях больницы.Было высказано предположение, что S. epidermidis и другие ЦНС могут выполнять пробиотическую функцию, предотвращая колонизацию хозяина более серьезными патогенами, такими как S. aureus (Otto et al. , 2009). Фактически, некоторые штаммов S. epidermidis , которые ингибируют in vivo колонизацию S. aureus , были постулированы в качестве будущей стратегии по искоренению такого патогена с поверхностей слизистой оболочки (Iwase et al. , 2010; Park, Iwase и Лю 2011).
В заключение, высокий уровень фекального носительства S. aureus наблюдался среди здоровых младенцев в этом исследовании, включая штаммы MRSA. Было выявлено четыре случая передачи S. aureus от матери ребенку через грудное молоко, что подчеркивает способность этого микроорганизма передаваться этим путем и закрепляться в кишечной микробиоте младенца. В этой связи важно отметить, что необходимы дополнительные исследования, чтобы понять последствия или возможную роль этой микробной передачи от матери к ребенку.Дальнейшие исследования должны быть сосредоточены на влиянии этой ранней кишечной колонизации S. aureus у младенцев (включая колонизацию изолятами MRSA) на правильное развитие их иммунной системы, эволюцию колонизации S. aureus в течение первых лет жизни младенца и влияние на создание других бактерий кишечного микробиома.
Мы выражаем признательность за исправление текста, выполненное Ф. Руис-Ларреа.
ФИНАНСИРОВАНИЕ
Эта работа была частично поддержана проектом SAF2012–35474 Министерства экономики и конкуренции Испании и Европейского фонда де Десарролло (FEDER).Даниэль Бенито имеет докторскую стипендию FPI от Министерства экономики и конкуренции Испании, а К. Лозано финансируется проектом SAF2012–35474.
Конфликт интересов . Не существует в связи с этой рукописью.
ССЫЛКИ
Адлерберт
I
Линдберг
E
Aberg
N
et al.
Пониженная энтеробактериальная и повышенная стафилококковая колонизация детского кишечника: влияние гигиенического образа жизни
Педиатр Res
2006
59
96
101
Баллард
О
Морроу
AL
Состав грудного молока: нутриенты и биоактивные факторы
Pediatr Clin N Am
2013
60
49
74
Бенито
D
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
et al.
Обнаружение метициллин-чувствительных штаммов Staphylococcus aureus ST398 и ST133 в кишечной микробиоте здоровых людей в Испании
Микроб Экол
2013
66
105
11
Бхалла
A
Арон
ДЦ
Донски
CJ
Staphylococcus aureus кишечная колонизация связана с повышенной частотой S.aureus на коже госпитализированных пациентов
BMC Инфекция Dis
2007
7
105
Björkstén
B
Сепп
E
Julge
K
et al.
Развитие аллергии и микрофлора кишечника на первом году жизни
J Allergy Clin Immunol
2001
108
516
20
Бордерон
JC
Lionnet
C
Rondeau
C
et al.
Текущие аспекты фекальной флоры новорожденного без антибиотикотерапии в течение первых 7 дней жизни: Enterobacteriaceae , энтерококки, стафилококки
Патол Биол
1996
44
416
22
Буржуа-Николаос
N
Люцет
JC
Daubié
C
et al.
Колонизация влагалища матери Staphylococcus aureus и приобретение новорожденного при родах
Paediatr Perinat Ep
2010
24
488
91
Чо
Я
Blaser
MJ
Микробиом человека: на стыке здоровья и болезни
Nat Rev Genet
2012
13
260
70
Институт стандартов клинической лаборатории
Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: Двадцать два информационных приложения M100-S24
2014
Уэйн, Пенсильвания, США
CLSI
Cucarella
С
Солано
С
Valle
J
et al.
Bap, поверхностный белок Staphylococcus aureus , участвующий в образовании биопленок
Дж Бактериол
2001
183
2888
96
Delgado
S
Гарсия
пол.
Фернандес
L
et al.
Характеристика Staphylococcus aureus штаммов, вызывающих мастит у человека и крупного рогатого скота
FEMS Иммунол Мед Микрофон
2011
62
225
35
Деуренберг
RH
Rijnders
MI
Себастьян
S
et al.
Staphylococcus aureus клон-специфические маркеры коллаген-адгезин и токсин 1 синдрома токсического шока различают мультилокусные последовательности клональных комплексов в пределах spa клональных комплексов
Диагностика Micr Infec Dis
2009
65
116
122
Домингес
E
Саразага
M
Торрес
К
Устойчивость к антибиотикам в изолятах Staphylococcus , полученных из образцов фекалий здоровых детей
J Clin Microbiol
2002
40
2638
41
Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам (EUCAST)
Таблицы контрольных точек для интерпретации MIC и диаметров зон Версия 4.0 , январь 2014 г.
Европейское общество клинической микробиологии и инфекционных заболеваний (ESCMID)
Фернандес
L
Ланга
S
Мартин
V
et al.
Микробиота грудного молока: происхождение и потенциальная роль в здоровье и болезнях
Pharmacol Res
2013
69
1
10
Gries
DM
Земзарс
TF
Gibson
KA
et al.
Пилотное исследование по оценке частоты носительства и путей заражения Staphylococcus aureus здоровыми младенцами
Am J Infect Control
2009
37
598
600
Harastani
HH
Арай
GF
Токаджян
ST
Молекулярные характеристики золотистого стафилококка , выделенного из крупной больницы в Ливане
Int J Infect Dis
2014
19
33
8
Хармсен
D
Клаус
H
Witte
W
et al.
Типирование метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus в условиях университетской больницы с использованием нового программного обеспечения для spa повторное определение и управление базой данных
J Clin Microbiol
2003
41
5442
8
Hunt
км
Preuss
Дж
Nissan
C
et al.
Олигосахариды грудного молока способствуют росту стафилококков
Appl Environ Microb
2012
78
4763
70
Ивасе
Т
Уэхара
Y
Синдзи
H
et al.
Staphylococcus epidermidis sp подавляет Staphylococcus aureus образование биопленок и колонизацию носа
Природа
2010
465
346
9
Жарро
S
Mougel
C
Thioulouse
J
et al.
Взаимосвязь между Staphylococcus aureus генетических фоновых факторов вирулентности, agr групп (аллелей) и болезнями человека
Заражение иммунной
2002
70
631
41
Джерниган
JA
Тяга
AL
Цветы
L
et al.
Распространенность и факторы риска колонизации устойчивым к метициллину Staphylococcus aureus на момент госпитализации
Инфекция Cont Hosp Ep
2003
24
409
14
Хименес
E
Delgado
S
Мальдонадо
A
et al.
Staphylococcus epidermidis : отличительный признак фекальной микробиоты грудных детей
BMC Microbiol
2008
8
143
Хименес-Трюке
N
Тедески
S
Saye
EJ
et al.
Взаимоотношения между матерью и новорожденным Staphylococcus aureus колонизация
Передача золотистого стафилококка от матери новорожденному
Pediatr Infect Dis J
2012
31
360
3
Линдберг
E
Адлерберт
I
Hesselmar
B
et al.
Высокая скорость передачи Staphylococcus aureus с кожи родителей на флору кишечника младенца
J Clin Microbiol
2004
42
530
4
Лозано
C
Gómez-Sanz
E
Бенито
D
et al.
Staphylococcus aureus носительство в носу, признаки вирулентности, механизмы устойчивости к антибиотикам и генетические линии у здоровых людей в Испании, с обнаружением штаммов CC398 и CC97
Int J Med Microbiol
2011
301
500
5
Lundell
AC
Адлерберт
Линдберг
E
et al.
Повышенные уровни циркулирующего растворимого CD14, но не CD83 у младенцев, связаны с ранней кишечной колонизацией Staphylococcus aureus
Clin Exp Allergy
2007
37
62
71
Lundell
AC
Хессельмар
B
Nordström
I
et al.
Высокие уровни циркулирующего иммуноглобулина А у младенцев связаны с кишечным токсигенным Staphylococcus aureus и меньшей частотой экземы
Clin Exp Allergy
2009
39
662
70
Мартин
Р
Ланга
S
Reviriego
C
et al.
Комменсальная микрофлора грудного молока: новые перспективы пищевой бактериотерапии и пробиотиков
Trends Food Sci Tech
2004
15
121
7
Масюк
H
Копрон
К
Grumann
D
et al.
Ассоциация рецидивирующего фурункулеза с лейкоцидином Panton-valentine и генетическим фоном Staphylococcus aureus
J Clin Microbiol
2010
48
1527
35
Матуссек
А
Taipalensuu
J
Einemo
IM
et al.
Передача Staphylococcus aureus от сотрудников родильного отделения новорожденным, выявленная через spa , набрав
Am J Infect Control
2007
35
122
5
Mégevand
C
Жерве
А
Heininger
U
et al.
Молекулярная эпидемиология колонизации носа метициллин-чувствительными Staphylococcus aureus у детей в Швейцарии
Clin Microbiol Infec
2010
16
1414
20
Мурчан
S
Кауфманн
ME
Deplano
A
et al.
Гармонизация протоколов гель-электрофореза в импульсном поле для эпидемиологического типирования штаммов метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus: Единый подход, разработанный консенсусом в 10 европейских лабораториях, и его применение для отслеживания распространения родственных штаммов
J Clin Microbiol
2003
41
1574
85
Отто
М.
Staphylococcus epidermidis ; «случайный» патоген
Nat Rev Microbiol
2009
7
555
67
Парк
Б
Ивасе
Т
Лю
GY
Интраназальное введение S. epidermidis предотвращает колонизацию метициллин-резистентным Staphylococcus aureus у мышей
Plos One
2011
6 (10)
e25880
Перес
PF
Доре
Дж
Leclerc
M
et al.
Бактериальный импринтинг иммунной системы новорожденных: уроки материнских клеток?
Педиатрия
2007
119
e724
32
Сабат
А
Kosowska
K
Poulsen
K
et al.
Две аллельные формы гена ауреолизина ( aur ) в пределах Staphylococcus aureus
Заражение иммунной
2000
68
973
6
Шаумбург
F
Кёк
R
Mellmann
A
et al.
Динамика численности метициллин-устойчивых изолятов Staphylococcus aureus в Германии за 6 лет
J Clin Microbiol
2012
50
3186
92
Магазин
Б
Матема
В
Alcabes
P
et al.
Распространенность agr групп специфичности среди Staphylococcus aureus штаммов, колонизирующих детей и их опекунов
J Clin Microbiol
2003
41
456
9
Сим
К
Пауэлл
E
Shaw
AG
et al.
Микробиота желудочно-кишечного тракта новорожденных: основа здоровья будущего?
Arch Dis Child-Fetal
2013
98
362
64
Удо
EE
Аль-Свейл
N
Норонья
BC
Хромосомное расположение гена mupA в Staphylococcus aureus , экспрессирующем высокий уровень устойчивости к мупироцину
J Антимикробный Chemoth
2003
51
1283
6
Uhlemann
AC
Отто
M
Lowy
FD
et al.
Развитие метициллин-резистентности, связанной с населением и здравоохранением Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2014
21
563
74
Фургон Белкум
A
Меллес
DC
Nouwen
J
et al.
Коэволюционные аспекты колонизации человека и инфицирования Staphylococcus aureus
Заразить Genet Evol
2009
9
32
47
Ван Вамел
WJ
Rooijakkers
SH
Ruyken
M
et al.
Модуляторы врожденного иммунитета, стафилококковый ингибитор комплемента и белок, ингибирующий хемотаксис Staphylococcus aureus , расположены на бета-гемолизин-превращающих бактериофагах
Дж Бактериол
2006
188
1310
5
Vautor
E
Abadie
G
Pont
A
et al.
Оценка присутствия гена bap в изолятах Staphylococcus aureus , выделенных от людей и животных
Vet Microbiol
2008
127
407
11
Витте
Вт
Стромменгер
В
Stanek
C
et al.
Метициллин-устойчивый Staphylococcus aureus ST398 у людей и животных, Центральная Европа
Адлерберт I, Хансон Л.Е., Уолд А.Е. 1999 Онтогенез кишечной флоры.В: Sanderson IR, Walker WA (eds) Развитие желудочно-кишечного тракта . ДО Н.Э. Декер, Гамильтон, Онтарио, 279–292.
Google Scholar
2
Aniansson G, Alm B, Andersson B, Larsson P, Nylen O, Peterson H, Rigner P, Svanborg M, Svanborg C 1992 Колонизация носоглотки в течение первого года жизни. J Infect Dis 165 : 38–42.
Артикул
Google Scholar
3
Blackwell CC, MacKenzie DA, James VS, Elton RA, Zorgani AA, Weir DM, Busuttil A 1999 Токсигенные бактерии и синдром внезапной детской смерти (СВДС): флора носоглотки в течение первого года жизни. FEMS Immunol Med Microbiol 25 : 51–58.
CAS
Статья
Google Scholar
4
Харрисон Л. М., Моррис Дж. А., Телфорд Д. Р., Браун С. М., Джонс К. 1999 Бактериальная флора носоглотки в младенчестве: влияние возраста, пола, времени года, вирусной инфекции верхних дыхательных путей и положения во сне. FEMS Immunol Med Microbiol 25 : 19–28.
CAS
Статья
Google Scholar
5
Вайнс М., Гарсия М. Е., Саенс П., Мора М. А., Мата Л., Сабхарвал Х, Сванборг С. 1997 Колонизация носоглотки у костариканских детей в течение первого года жизни. Pediatr Infect Dis 9 : 852–858.
Google Scholar
6
Stark PL, Lee A 1982 Бактериальная колонизация толстой кишки недоношенных новорожденных с низкой массой тела. J Hyg Camb 89 : 59–67.
CAS
Статья
Google Scholar
7
Lundequist B, Nord CE, Winberg J 1985 Состав фекальной микрофлоры у детей, находящихся на грудном и искусственном вскармливании, от рождения до 8 недель. Acta Paediatr Scand 74 : 54–58.
Артикул
Google Scholar
8
Sepp E, Julge K, Vasar M, Naaber P, Björkstén B, Mikelsaar M 1997 Кишечная микрофлора эстонских и шведских младенцев. Acta Paediatr 86 : 956–961.
Björksten B, Naaber P, Sepp E, Mikelsaar M 1999 Кишечная флора у детей 2-летнего возраста из Эстонии и Швеции с аллергией. Clin Exp Allergy 29 : 342–346.
Артикул
Google Scholar
18
Wold AE 1998 Гипотеза гигиены пересмотрена: является ли рост частоты аллергии следствием изменений кишечной флоры ?. Аллергия 53 : 20
CAS
Статья
Google Scholar
19
Wold AE 1999 Роль бактериальной адгезии в создании нормальной микрофлоры кишечника. В: Hanson LA, Yolken RH (eds) Пробиотики, другие факторы питания и микрофлора кишечника . Липпинкотт-Рэйвен, Филадельфия, 47–61.
Google Scholar
20
Tenover FC, Arbeit R, Archer G, Biddle J, Bryne S 1994 Сравнение традиционных и молекулярных методов типирования изолятов Staphylococcus aureus . J Clin Microbiol 32 : 407–415.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
21
Tambic A, Power EGM, Talsania H, Anthony RM, French GL 1997 Анализ вспышки нефаготипируемого метициллин-устойчивого Staphylococcus aureus с использованием анализа случайно амплифицированной полиморфной ДНК. J Med Microbiol 35 : 3092–3097.
CAS
Google Scholar
22
Hansen SL, Stewart BJ 1978 Надежный тест для идентификации и предполагаемой идентификации некоторых клинически значимых анаэробов. Am J Clin Pathol 69 : 36–40.
CAS
Статья
Google Scholar
23
Джаярао Б.М., Гиллеспи Б.Е., Оливер С.П. 1996 Применение случайным образом амплифицированного дактилоскопирования полиморфной ДНК для идентификации видов бактерий, выделенных из коровьего молока. J Food Protect 59 : 615–620.
CAS
Статья
Google Scholar
24
Мэттьюс К.Р., Оливер С.П. 1994 Дифференциация видов Staphylococcus с помощью ДНК-фингерпринтинга на основе полимеразной цепной реакции. J Food Protect 57 : 486–489.
Артикул
Google Scholar
25
Johansson ML, Quednau M, Molin G, Ahrn’e S 1995 Случайно амплифицированная полиморфная ДНК (RAPD) для типирования штаммов Lactobacillus plantarum . Lett Appl Microbiol 21 : 155–159.
CAS
Статья
Google Scholar
26
Sears HJ, Brownlee I 1951 Дальнейшие наблюдения персистенции отдельных штаммов Escherichia coli в кишечном тракте человека. Дж Бактериол 63 : 47–57.
Google Scholar
27
Tullus K 1988 Колонизация фекалий Р-фибриентами Escherichia coli в возрасте от 0 до 18 месяцев. Эпидемиол. Инфекция 100 : 185–191.
CAS
Статья
Google Scholar
28
Wold AE, Caugant DA, Lidin-Janson G, de Man P, Svanborg C. 1992 Резидентные штаммы Escherichia coli толстой кишки часто проявляют уропатогенные характеристики. J Infect Dis 165 : 46–52.
CAS
Статья
Google Scholar
29
Adlerberth I, Jalil F, Carlsson B, Mellander L, Hanson LÅ, Larsson P, Khalil K, Wold AE 1998 Высокая скорость оборота штаммов Escherichia coli в кишечной флоре младенцев в Пакистане. Эпидемиол. Инфекция 121 : 587–598.
CAS
Статья
Google Scholar
30
Kuhn I, Tullus K, Möllby R 1986 Колонизация и наличие фенотипов Escherichia coli в кишечнике детей в возрасте от 0 до 18 месяцев. Инфекция 14 : 7–12.
CAS
Статья
Google Scholar
31
Adlerberth I, Carlsson B, de Man P, Jalil F, Khan SR, Larsson P, Mellander L, Svanborg C, Wold AE, Hanson LÅ 1991 Колонизация кишечника Enterobacteriaceae у младенцев, доставленных в больницы Пакистана и Швеции . Acta Paediatr Scand 80 : 602–610.
CAS
Статья
Google Scholar
32
Balmer SE, Wharton BA 1989 Рацион и фекальная флора новорожденного; грудное молоко и детские смеси. Arch Dis Child 64 : 1672–1677.
CAS
Статья
Google Scholar
33
Simhon A, Douglas JR, Drasar BS, Soothill JF 1982 Влияние кормления на фекальную флору младенцев. Arch Dis Child 57 : 54–58.
CAS
PubMed
PubMed Central
Google Scholar
34
Hogevik H, Söderqvist B, Tung H-S, Olaison L, Westberg A, Ryden C, Tarkowski A, Andersson R 1998 Факторы вирулентности штаммов Staphylococcus aureus , вызывающих инфекционный эндокардит — сравнение со штаммами от кожных инфекций. APMIS 106 : 901–908.
CAS
Статья
Google Scholar
35
Lehn N, Shaller E, Wagner H, Krönke M 1995 Частота клинических изолятов Staphylococcus aureus, продуцирующих токсины и энтеротоксины, синдрома токсического шока. евро J Clin Microbiol Infect Dis 14 : 43–46.
CAS
Статья
Google Scholar
36
Melconian AK, Burn Y, Fleurette J 1983 Производство энтеротоксинов, фаговое типирование и серотипирование штаммов Staphylococcus aureus , выделенных из клинических материалов и продуктов питания. Дж. Хиг Лондон 91 : 235–242.
CAS
Статья
Google Scholar
37
Здразилек Ю., Петрас П., Срамова Н., Субертова В., Маскова Л. 1988 Staphylococcus aureus в родильном отделении. I. Колонизация матерей и новорожденных и выживание различных S. aureus типов в колонизированных особях. J Hyg Epidemiol Microbiol Immunol 32 : 49–57.
CAS
PubMed
Google Scholar
38
Schlievert PM, Blomster DA 1983 Производство стафилококкового пирогенного экзотоксина типа C: влияние физических и химических факторов. J Infect Dis 147 : 236–242.
CAS
Статья
Google Scholar
39
Herias MV, Midtvedt T, Hanson LÅ, Wold AE 1995 Роль Escherichia coli в кишечной колонизации у гнотобиотических крыс. Infect Immunol 63 : 4781–4789.
Gordon AE, Saadi At, MacKenzie DA, Molony N, James VS, Weir DM, Busuttil A, Blackwell CC 1999 Защитный эффект грудного вскармливания в отношении синдрома внезапной детской смерти (СВДС): ΙΙΙ Обнаружение IgA антитела в грудном молоке, которые связываются с бактериальными токсинами, участвующими в СВДС. FEMS Immunol Med Microbiol 25 : 175–182.
CAS
Статья
Google Scholar
42
МакГанн В.Г., Роллинз Дж. Б., Мейсон Д. В. 1971 Оценка устойчивости к стафилококковому энтеротоксину B: естественно приобретенные антитела человека и обезьяны. J Infect Dis 124 : 206–213.
CAS
Статья
Google Scholar
43
Vergeront JM, Stolz SJ, Crass BA, Nelson DB, Davis JP, Bergdoll MS 1983 Распространенность сывороточных антител к стафилококковому энтеротоксину F среди жителей Висконсина: последствия для синдрома токсического шока. J Infect Dis 148 : 692–698.
CAS
Статья
Google Scholar
44
Аль-Мадани О., Гордон А.Е., Вейр Д.М., Раза М.В., Бусуттил А., Блэквелл С. 1999 Пирогенные токсины Staphylococcus aureus при внезапной неожиданной ночной смерти у взрослых и детей старшего возраста: факторы, влияющие на контроль воспалительных реакций на токсины синдрома токсического шока. FEMS Immunol Med Microbiol 25 : 207–219.
CAS
Статья
Google Scholar
45
Беннет Р., Эрикссон М., Зеттерстрём Р. 1981 Рост заболеваемости неонатальной септицемией: возбудитель и предрасполагающие факторы риска. Acta Paediatr Scand 70 : 207–210.
CAS
Статья
Google Scholar
46
van Camp JM, Tomaselli V, Coran AG 1994 Бактериальная транслокация у новорожденного. Curr Opin Pediatr 6 : 327–333.
CAS
Статья
Google Scholar
47
Sarff LD, McCracken GH, Schiffer MS 1975 Эпидемиология Escherichia coli K1 у здоровых и больных новорожденных. Ланцет 17 : 1099–1104.
