Что дает электрофорез: Электрофорез, сделать процедуру в СПб

Содержание

Электрофорез, сделать процедуру в СПб

Электрофорез – методика лечения, основанная на воздействии на тело пациента током. Через поврежденные участки кожи или слизистых оболочек в организм поступают ионы. Это достигается за счет постоянного либо импульсного тока.

Механизм действия

Ток раздражает кожу, вызывая различные реакции организма. Стимулируются тканевые обмены, кровообращение, процессы восстановления после разных заболеваний. После дозированного воздействия током в верхний слой кожи – эпидермис – поступают ионы лекарства. Потом они медленно распределяются по организму и вымываются лимфо- и кровотоком.

Преимущества электрофореза

Этот метод широко распространен в медицине и знаком практически каждому человеку. В сравнении с другими способами доставки в организм лекарственных средств, электрофорез имеет следующие преимущества:
• Возможность одновременного введения нескольких препаратов.
• Лекарства долго воздействуют на организм, но не вызывают общую интоксикацию.


• Можно напрямую воздействовать на пораженный участок кожного покрова.
• После сеанса лекарственные препараты долго остаются в коже, потому что формируется специальный очаг. Потом они медленно поступают в организм и разносятся по нему с кровью.
• Ионы – это хорошо действующая методика лечения.

Противопоказания

Эта методика категорически противопоказана при следующих состояниях:
• индивидуальная непереносимость;
• дерматозы;
• онкология;
• заболевания сердечно-сосудистой системы;
• частые кровотечения.

Перед началом курса процедур нужно проконсультироваться с лечащим врачом. В «СМ-Клиника» вы можете получить грамотную консультацию любого врача, который пропишет лечение в индивидуальном порядке с учетом протекания болезни и переносимости определенных препаратов.

На подготовительном этапе делается кожная проба. Это слабое воздействие, чтобы определить непереносимость и чувствительность. Только после этого принимается решение о возможности делать электрофорез.

Существует много показаний к применению этой методики. Однако проводить сеансы нужно только под наблюдением врача.

Лекарственный электрофорез

Один из вариантов проведения электрофореза – с использованием цинка. Только в «СМ-Клиника» в Санкт-Петербурге проводятся:

• классические сеансы электрофореза с цинком;
• в гинекологии – по вагинальной методике;
• в урологии – по ректальной технике;
• по трехэлектродному методу;
• по Щербаке;
• по Вермелю;
• по Бургиньону;
• полумаской Бергонье.

«СМ-Клиника» продолжает классические традиции физиотерапии, направленные на лечение, профилактику и восстановление.

Чем полезен цинк? Какова его роль в организме?

Это один из самых главных элементов, входящий в состав более чем 40 ферментов организма человека. Цинк участвует в формировании иммунитета, поддержании уровня гормонов, стабилизирует рост. Цинк содержится в крови, мышцах, печени, костях, почках, сетчатки глаз.

Он способствует долгой жизни и сохранению молодости, устраняет усталость, выполняет функцию антиоксиданта.

Сегодня даже у молодых людей снижено содержание цинка в организме, по оценкам специалистов. Это негативно сказывается на женской репродуктивной функции, состоянии эндокринной системы.

Девушки с нехваткой цинка подвержены недостаточной выработке половых гормонов. У них продолжается рост, когда погодки уже остановились в росте. У них очень длинные конечности, внешне они выглядят инфантильными. Нарушается менструальный цикл и отложение жировой ткани.

У мужчин цинк контролирует рост простаты, профилактирует аденому, бесплодие. Этот элемент активизирует сперматозоиды и в целом половые гормоны.

Важно повышать уровень цинка пожилым людям, потому что иначе теряется слух, прогрессирует атеросклероз, часто возникают инфекции. Если цинк в норме, то хорошо функционирует мозг – сохраняется память, внимание и т. д.

Цинк активизирует витамины Е и А, то есть без него невозможна регенерация кожи, правильная работа сальных желез, рост ногтей и волос. Цинк участвует в борьбе с угрями.

В цинке нуждаются зубы человека. Он обеспечивает профилактику инфекционных болезней полости рта и десен.

При насыщении цинком суставов проходит боль, повышается устойчивость к физическим нагрузкам.

Показания к электрофорезу с раствором цинка

• Акне на теле и лице.
• Повышенные физические нагрузки. Цинк повышает выносливость и силовые показатели.
• Иммунодефицит.
• Сахарный диабет.
• Раны, дерматиты, ожоги, пролежни, экземы.
• Артриты, ревматизм, остеохондроз позвоночника, артрозы.
• Синдром хронической усталости.
• Бесплодие – мужское и женское, – которое вызвано воспалениями (простатит, эндометрит), недостаточностью или нарушением баланса половых гормонов.
• Заболевания органов ЖКТ – язва, гастрит, гепатоз, гепатит, панкреатит, синдром раздраженного кишечника.
• Диффузные и гнездные алопеции.

• Дегенеративно-дистрофические болезни суставов позвоночника и конечностей.

Проконсультируйтесь с врачом, имеются противопоказания.

 

Приём физиотерапевта в наших клиниках

Дунайский проспект, д. 47 (м. Дунайская)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Проспект Ударников, д. 19 корп. 1 (м. Ладожская)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Выборгское ш. , д. 17 корп. 1 (м. Пр-т Просвещения)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Маршала Захарова, д. 20 (м. Ленинский пр-т)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Малая Балканская, д. 23 (м. Купчино)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Электрофорез для детей на воротниковой зоне, также проведения электрофорез для грудничков в Евромед

Проведение лечебных процедур электрофорезом в Омске. Электрофорез — метод введения лечебных препаратов через кожный покров, под действием электрического поля. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме.

  • Консультация
  • Диагностика
  • Лечение

Электрофорез — это метод введения лекарственного вещества под действием электрического поля в организм. Лечение электрофорезом проводится как через кожные покровы (в неврологии, травматологии и др.), так и через слизистые оболочки (в стоматологии, оториноларингологии, гинекологии и др.). Вещество вводится непосредственно в очаг воспаления в малых, но достаточно эффективных дозах, накапливаясь в тканях и действуя продолжительное время.

Поэтому особенно актуален электрофорез для детей, т.к. дает возможность местно использовать лекарства, которые в раннем детском возрасте нельзя применять другими способами. При этом лекарство вводится в наиболее химически активной форме — в виде ионов – и не разрушается, как например, при введении через рот. При проведении электрофореза электрический ток благоприятно влияет на реактивность и иммунобиологический статус тканей.

Этот метод применяется применяется с самого раннего возраста — например, электрофорез для грудничков используется уже спустя 3-6 недель после рождения. Для детей до года при этой процедуре в качестве лекарственного вещества часто используется эуфиллин как средство, снимающее тонус гладкой мускулатуры и улучшающее кровообращение (в основном, проводится электрофорез на воротниковую зону).

В целом выбор зоны проведения электрофорез зависит от заболевания: так, электрофорез воротниковой зоны проводится при заболеваниях нервной или сосудистой системы, электрофорез конечностей — при заболеваниях суставов, электрофорез поясничной зоны — при гинекологических заболеваниях и т.п.

Вернуться на страницу:


Остались вопросы?

 

Электрофорез для детей | Записаться на прием

Аппарат предназначен для местного лечебного воздействия электромагнитным полем высокой частоты. Применяется в клиниках терапевтического, неврологического, хирургического, психиатрического, акушерско-гинекологического профиля и в других лечебных учреждениях.

Аппарат «Тонус ДТГ» предназначен для лечения различных нервно-мышечных заболеваний и болевых состояний со спазмами мышц, возникших в результате растяжений, травм, а также подострого и острого периатрита плеча, люмбаго, ишиалгии, гастроптоза, невралгии, парезов, невралгических радикулитов, невритов и др.

В аппарате также имеется функция гальванизации для воздействия постоянным током на организм человека с лечебными и профилактическими целями и проведения лекарственного электрофореза в лечебных и оздоровительных учреждениях различного профиля.

Аппарат «Тонус ДТГ» представляет собой источник непрерывного импульсного тока синусоидальной формы (частотой 50 и 100 Гц) и различных посылок этого тока, отличающихся по длительности, числу и частоте импульсов, форме нарастания и спада амплитуды.

Генерируемые аппаратом токи обладают болеутоляющим действием, а также вазомоторной активностью, способной рассасывать отечности.

Аппарат соответствует второму классу защиты и эксплуатируется без заземляющего провода, что обеспечивает полную безопасность пациента и обслуживающего персонала.

Аппарат снабжен электронным блокирующим устройством, которое исключает появление тока в цепи пациента, если ручка регулятора установлена не в нулевое положение: при включении аппарата; переключений режимов работы; переключений диапазонов тока, что исключает появление острых болевых ощущений в процессе проведения процедуры и позволяет плавно с минимальной величины устанавливать ток в цепи пациента.

В аппарате имеется встроенный таймер. По истечении установленного времени выполнение процедуры прекращается автоматически и подается звуковой сигнал.

Лечение электрофорезом, лечебный электрофорез в физиотерапии в Алматы – onclinic.kz

Электрофорез физиотерапия проводится специальным аппаратом, который подает постоянный ток через противоположно заряженные электроды. На металлические пластинки электродов надевается влажная ткань, смоченная лекарственным средством. Лекарство под действием тока проникает в организм через наружные ткани тела и оказывает эффективное терапевтическое воздействие.

Применение электрофореза

Лечение электрофорезом позволяет вводить небольшие концентрации препаратов непосредственно в очаг заболевания, оказывая минимальное влияние на весь организм и создавая при этом длительный лечебный эффект. Применение электрофореза назначается при следующих заболеваниях:

  • заболевания дыхательной системы и ЛОР-органов (тонзиллит, синусит, фарингит, бронхит и т.п.)
  • болезни органов зрения (кератит, блефарит)
  • заболевания нервной системы (невралгии, невриты, нарушения спинного и головного мозга
  • болезни пищеварительной системы (гастрит, панкреатит, язвенная болезнь и др.)
  • сердечно-сосудистые патологии (гипертоническая болезнь, атеросклероз, варикоз)
  • электрофорез для лица и другие дерматологические поражения кожи (акне, дерматит, фурункулы и др.)
  • заболевания мочеполовой системы (электрофорез гинекология вагинита, эндометрита, цистита)
  • проблемы опорно-двигательного аппарата (артроз, остеохондроз, артрит)

Виды электрофореза

Виды электрофореза могут отличаться как по способу проведения процедуры, так и по заболеваниям и лекарственным препаратам, которые назначаются доктором.

Электрофорез с карипазимом

Карипазим – растительный препарат для лечения межпозвоночной грыжи. Обычно, чтобы получить устойчивый клинический эффект, назначают 2-3 курса по 15-20 сеансов.

Ванночковый электрофорез

В специальную ванночку, оборудованную электродами помещают назначенные лекарства. Такой способ терапии применяют для лечения заболеваний суставов, артритов, плекситов, полиартритов и других болезней нервной системы.

Электрофорез с эуфиллином

Электрофорез с эуфиллином обладает выраженным бронхорасширяющим действием, улучшает кровоснабжение внутренних органов, имеет болеутоляющий эффект. Эуфиллин применяют для лечения легочных, неврологических, сосудистых заболеваний.

Электрофорез с лидазой

Электротерапия с лидазой улучшает сосудистую и тканевую проницаемость и назначается в гинекологии и хирургии для лечения спаечных процессов.

Электрофорез с кальцием

Применяется для восполнения потерь кальция, как сосудоукрепляющее, противовоспалительное, дезинтоксикационное и противоаллергическое средство.

Электрофорез с калием

Применяется в лечении заболеваний дыхательных путей, бронхиальной астмы, при глазных патологиях.

Польза электрофореза

Электрофорез лекарственный обладает такими преимуществами, как лечение широкого спектра заболеваний и высокая эффективность лечебного курса. Польза электрофореза в том, что медикаментозные препараты, которые вводятся при электрофорезе, хорошо усваиваются благодаря активной ионной форме. Процедура электрофорез — одна из самых популярных и эффективных не только в Казахстане, но и в мире. Это один из проверенных и безопасных методов лечения, который можно применять беременным и новорожденным уже на 3 сутки.

В международном медицинском центре On Clinic Алматы для лечения пациентов успешно применяется такая процедура, как электрофорез. Цена процедуры входит в стоимость комплексного лечения, назначенного врачом. В кабинете физиотерапии On Clinic работают опытные специалисты, которые успешно проводят все виды электрофореза. Заказать услугу можно прямо сейчас на нашем сайте через форму онлайн-записи.ссссс

Электрофорез — что это? | Стоматология Доктора Манапова

2019-12-10

Электрофорез – это метод физиотерапевтического лечения, при котором в организм вводится лекарственный препарат посредством электрического тока малой силы. В основе данной процедуры лежит применение специальных лекарственных средств, которые способны распадаться на определенные ионы и под воздействием тока направленно проникать вглубь тканей даже через кожные покровы, но на небольшую глубину. Как правило, лекарство попадает в кровь и моментально разносится по всему организму. Кроме того, оно скапливается в органах, на которые непосредственно оказывается воздействие.

Основное показание к лечению электрофорезом – это инфицирование каналов зуба при пульпите, периодонтите, а также кистах и гранулемах. Благодаря целенаправленному введению лекарственного препарата происходит быстрое и эффективное восстановление зубных каналов, уменьшение болевого синдрома, удаление бактерий. После лечения проводится обязательная пломбировка каналов.

Противопоказания:

  • аллергические реакции на вводимые препараты
  • гнойные воспалительные процессы в организме
  • наличие кардиостимулятора
  • тяжелая форма бронхиальной астмы
  • злокачественные новообразования
  • острые заболевания сердечно-сосудистой системы.

Показания:

  • кисты и гранулемы
  • пульпит – инфицирование каналов зуба
  • периодонтит
  • болевые ощущения после лечения или удаления зубов
  • альвеолит
  • стоматит.

Электрофорез в стоматологии: технология

  1. специальная прокладка смачивается в лекарственном препарате и фиксируется на пораженном участке. Если требуется лечение пульпита, то препарат вводится внутрь зуба, предварительно обрабатываются каналы,
  2. при помощи специального аппарата, вырабатывающего ток, проводится воздействие на ткань полости рта через прокладку с лекарственным средством.

Длительность одной процедуры – 10-30 минут, проводить их рекомендуется ежедневно или через день. Весь курс занимает от 10 до 20 процедур.

Электрофорез в стоматологии: преимущества

  • безболезненность проведения процедуры: возможно лишь незначительное покалывание и жжение,
  • быстрое снятие воспалительных процессов внутри канала зуба или в тканях, окружающих его верхушку,
  • уменьшение болевого синдрома во время и после лечения различных зубных заболеваний,
  • бактерицидное воздействие на ткани,
  • целенаправленное введение лекарственного средства, его скопление непосредственно в очаге воспаления,
  • минимальный риск развития аллергических реакций на вводимый лекарственный препарат,

увеличение эффективности лекарственных средств: оно медленнее выводится и сохраняется в течение нескольких недель.

Электрофорез в стоматологии: недостатки

  • большое количество противопоказаний для проведения лечения.

Электрофорез – это не самостоятельное средство лечения, а, как и любой метод физиотерапии – лишь дополнительный способ восстановления организма при наличии каких-либо заболеваний полости рта. Главное преимущество электрофореза в том, что введение лекарственного препарата в организм происходит целенаправленно, что гораздо более эффективно даже капельниц, внутривенного введения или приема медикамента внутрь. При необходимости возможно выведение лекарственного средства из организма также посредством электрического тока.

Мифы о физиотерапии

Глава из книги Т. А. Проценко «Физиотерапия для здоровья и долголетия»

Несмотря на большое количество популярной литературы, публикаций в газетах и журналах, специальных передач на радио и телевидении, все же у наших граждан представления о физиотерапевтическом лечении оставляют желать лучшего… Давайте поговорим о наиболее распространенных мифах относительно физиотерапии.

Миф первый. Физиотерапия — вторичный и не столь уж важный вид лечения, без которого вполне можно обойтись. Главное — это терапия медикаментами.

На самом деле использование физиотерапевтических средств позволяет в 1,5 — 2 раза сократить время на лечение, приостановить дальнейшее прогрессирование хронического заболевания и снизить частоту рецидивов. С физиотерапией восстановление организма происходит намного полноценнее, чем только при приеме лекарств. Ведь физиотерапевтические методы стимулируют защитно-компенсаторные силы организма, естественные механизмы самоочищения, самооздоровления и регенерации. Поэтому комплексное лечение с использованием физических средств способствует быстрому выведению шлаков и токсинов, стиранию энергоинформационных следов болезни, резко увеличивает снабжение тканей кислородом и питательными веществами, обновляет клетки, нормализует деятельность эндокринных желез и нервной системы.

А когда проходит острый период болезни, физиотерапия вообще является основным средством медицинской помощи. Кроме того, физиотерапия не только прекрасно сочетается с приемом медикаментов, но часто усиливает их действие, позволяет сократить дозу лекарств, уменьшает вероятность появления побочных эффектов.

Миф второй. Физиотерапия предпочтительнее других методов лечения, она вылечит от всего, а без лекарств можно обойтись.

Это другая крайность. Синтетические препараты, хотя и имеют массу побочных эффектов, засоряют организм и чужды ему по своей природе, но, все же, принимать их необходимо, особенно в остром периоде заболевания. Другое дело, что часто из длинного списка рекомендуемых лекарств действительно необходимы максимум два-три, а остальные вполне можно заменить физиотерапевтическими средствами. Например, при остром инфекционном заболевании бывают нужны антибиотики, иногда — жаропонижающие средства, при обострении радикулита с выраженным болевым синдромом необходимы противовоспалительные и обезболивающие лекарства, при аллергических заболеваниях — антигистаминные и т. д. На фоне такого лечения можно начать использование физиотерапии и, по мере улучшения вашего состояния, постепенно переходить на немедикаментозные средства и все меньше принимать лекарств.

Миф третий. Все физиотерапевтические методы являются прогреваниями и потому потенциально опасны.

На самом деле непосредственно тепловой эффект сопровождает лишь некоторые из видов физиолечения. Никаких подтвержденных данных о вреде, якобы наносимом физиотерапией, на настоящее время нет. Это касается и тепловых воздействий. Рекомендованные к применению аппараты предварительно проходят многочисленные этапы научной и клинической апробации с целью выявления возможных побочных эффектов и противопоказаний. В случае, если данный метод может стимулировать, например, рост имеющегося доброкачественного образования, врач вам его не назначит. Пугаться любой физиопроцедуры – значит отказаться от возможности полноценно пролечиться. Если появились какие-то опасения, нужно поделиться ими с врачом, и будет найдено оптимальное решение.

Миф четвертый. Чем короче курс физиопроцедур, тем лучше.

Начало, развитие и затухание любого заболевания — это циклический процесс, протекающий по своим законам. За три дня никакое заболевание не проходит. Даже если снизилась температура тела, стихла боль, уменьшился отек, это не значит, что уже все в порядке. Организм справился с некоторыми симптомами, компенсировал их мощным выбросом биологически активных веществ, но на клеточном уровне и уровне органов патологические изменения будут сохраняться еще долго. Предстоит длительный процесс восстановления — ликвидация отека и воспаления, удаление продуктов распада, токсинов, накапливание энергетического потенциала, регенерация уцелевших и ускоренный рост новых клеток, приведение в норму деятельности эндокринной, нервной, иммунной систем, восстановление нормального состава крови, лимфы и т. д.

Даже если видимые симптомы заболевания прошли, вы беззащитны, как маленький ребенок, — столько сил потрачено организмом в борьбе за выздоровление! Не долечить заболевание — значит не дать организму полноценно восстановиться, привести в норму все адаптивные и защитные функции. Поэтому так многохронических заболеваний — «более важные» дела заставляют людей мчаться куда-то в то время, когда организму еще нужно как минимум две-три недели для полной компенсации.

Любые методы, которые ускоряют процесс восстановления, — это великое благо, и в этом с физиотерапией не сравнится ничто. Никогда не стоит ориентироваться на самочувствие при решении вопроса — сколько процедур принимать. Следует доверять научно обоснованным разработкам, которых придерживается врач. Возможно, после лечения одним физиотерапевтическим средством он, исходя из практического опыта, назначит курс других физиопроцедур — для вашего блага.

Миф пятый. Чем больше физиопроцедур принимать одновременно, тем быстрее наступит выздоровление.

Вовсе не обязательно. Каждое физиотерапевтическое средство имеет свой специфический механизм действия. Физические методы могут дополнять друг друга, и тогда лечебный эффект усиливается, но бывает, что совмещать их по тем или иным причинам нельзя. Нужно понимать: любое физиолечение — это воздействие на весь организм в целом, при этом запускается сложный комплекс компенсаторно-приспособительных реакций, которые характерны только для используемого вида терапии. Сбивать тонкую настройку организма другим воздействием не всегда целесообразно, а иногда — и вредно. Особенно в острый период заболевания, когда имеющиеся резервные механизмы и так напряжены. Назначение в это время двух и более процедур может привести к еще большему обострению. Кроме того, организмы людей ведь очень различаются.

У одних так много энергетических резервов, что они и лекарств кучу заглотнут, и без особого напряжения выдержат две-три физиопроцедуры, да еще в баньке попарятся. Но здоровье большинства соотечественников находится в более плачевном состоянии. И тут трижды подумать надо, сколько и чего назначить, чтобы не навредить. В этом отношении нужно всецело доверять рекомендациям врача — он назначит вам лечение, исходя из возможностей вашего организма.

Миф шестой. Вам обязательно поможет то, что помогло соседу, куме или попутчику в общественном транспорте.

Многие пациенты настаивают на назначении тех процедур, о которых они слышали похвальные отзывы. Большинству болящих такие процедуры, как электрофорез или ультразвук, кажутся слишком «простыми», чтобы излечить их быстро и качественно. Предварительно выспросив у страдающих примерно тем же заболеванием, что им помогло, люди мчатся в клинику и требуют, например, только «лазер» или «электромассаж» . Все это было бы смешно, но…

Во-первых, заболевание может быть совсем другое. Так, боли в поясничной области могут служить симптомом не только остеохондроза. Во-вторых, различные стадии болезни требуют применения разных физиотерапевтических средств (ваш знакомый мог прийти с хроническим вялотекущим процессом, а у вас — острый период). И наконец — это самое главное! — каждый человек реагирует на то или иное воздействие очень индивидуально. Один хорошо поддается лечению магнитным полем, другой — инфракрасным излучением, третий — тепловым воздействием. Одно из достоинств физиотерапии и заключается в том, что можно подобрать лечение для каждого, исходя из его индивидуальных особенностей. Но это должен делать врач, руководствуясь научными рекомендациями, своим профессиональным опытом и интуицией.

Миф седьмой. Вам обязательно поможет то, что помогло в прошлый раз.

Вопрос сложный. С одной стороны, если человек хорошо реагирует, к примеру, на высокочастотную терапию, то она, конечно, даст определенный лечебный эффект и при повторном применении. Но не обязательно и далеко не всегда в той мере, «как в прошлый раз». Организм — очень сложная и динамичная система, он непрерывно меняется, и его болезни отражают эти изменения. Вот радикулит. В первом случае он мог быть спровоцирован холодом, переохлаждением, а потом — подъемом тяжести. И лечение будет разным. Или: два года назад артериальное давление «шалило», но не очень, а сейчас стабильно повышено, что ограничивает круг физиопроцедур, которые могут применяться. Ну и конечно, если вам когда-то помогла магнитотерапия при тромбофлебите, совсем не факт, что она так же удачно снимет обострение язвенной болезни, и не стоит требовать ее назначения от врача.

Миф восьмой. Процедуры, которые не сопровождаются какими либо ощущениями, ничего не стоят, так себе, слишком слабые.

Очень распространенная просьба: назначить «что-то посильнее» — как правило, она исходит от мужчин. Это означает: пропишите процедуру, дающую достаточно сильные ощущения. Вроде как нет ощущений — нет действия, и нет эффекта. Таков ход мыслей немалого количества людей. Разубедить их может только личный опыт. Когда за несколько процедур магнитотерапии проходят боли, онемение, отек, которые мучили пару месяцев, трудно оставаться скептиком. Но возможно. В других случаях врач назначает таки «ощутимые» методы (если, конечно, нет противопоказаний). Но, говоря откровенно, никакой разницы в эффективности между процедурами «ощутимыми» и «неощутимыми» нет. Иногда последние даже намного полезнее, как ни трудно нашему рассудку в это поверить. Так, электромагнитные волны нетепловой мощности воздействуют на более тонкие структурные и управляющие комплексы организма, их влияние более глубоко и многогранно, однако процедура при этом не является испытанием на мужественность.

Человек, которого по-настоящему беспокоит состояние своего здоровья, который хочет поправиться на долговременную перспективу, конечно, прислушается к рекомендациям врача и будет лечиться так, как тот считает нужным. Но если вдруг попался болящий, для которого главное — снять побыстрее боль, а потом хоть трава не расти, то врач обычно идет ему навстречу: и назначает что-нибудь «сильное». Выздоровление может и пойдет быстрее. Ну а в скором времени — пожалуйте вновь на прием.

Миф девятый. Если уж выбрали время для походов в отделение физиотерапии, нужно пролечить все имеющиеся заболевания.

Совершенное заблуждение. Каждое заболевание — это сложный процесс, в ходе которого происходит борьба патологических изменений и компенсаторных реакций организма. Для каждого из них подходят только определенное физиотерапевтическое средство и определенные методики.

Правда, если два заболевания имеют приблизительно общие причины возникновения и механизмы развития (к примеру, остеохондроз позвоночника и остеоартроз суставов) или представляют собой разные симптомы одного патологического процесса (аллергический насморк и бронхиальная астма), то можно лечить их вместе, может быть, и одним методом физиолечения. Но геморрой и холецистит, артрит и воспаление уха — извините…

Обычно лечат заболевание, симптомы которого наиболее выражены. Именно за него принимаются всеми доступными средствами. А если пациент с острым бронхитом просит заодно «помочь с суставами или пяточной шпорой», врач оказывается в тупике. Организм — не машина, которую можно поставить в гаражи поменять сразу хоть половину деталей. С организмом нужно обращаться бережно и помогать только там, где действительно «горит».

Применение нескольких физических воздействий на разные области по поводу различных заболеваний чревато перегрузкой защитно-компенсаторных систем, что точно принесет вред. Поэтому сопутствующие болезни лечатся только тогда, когда основное заболевание уже переходит в стадию ремиссии, когда пойдет выздоровление.

Миф десятый. Применение бытовых физиотерапевтических приборов полностью заменяет обращение за квалифицированной медицинской помощью.

Начнем с того, что прежде, чем приступить к самолечению, необходимо узнать точный диагноз. Поставить его может только врач на основании осмотра и результатов обследования. Без этого вообще применять физиотерапию, в том числе и на дому, не рекомендуется. К лечению приборами прибегают в основном, когда боль мешает жить. Однако боль — это симптом самых различных заболеваний, и не все из них нужно лечить методами физиотерапии. Большинство осложнений от применения бытовых аппаратов связано именно с этим — кладут на все места, которые болят, сами себе поставив диагноз. Но даже если болезнь установлена, эффект от профессиональной аппаратуры не идет нив какое сравнение с «домашними докторами». Простота в управлении и максимальная безопасность, увы, ограничивают и возможности.

Профессиональные физиотерапевтические устройства имеют большую мощность, гораздо более широкий спектр параметров воздействия, оттого и лечебный эффект обычно выше. Бытовые аппараты целесообразно применять лишь при легком обострении, на стадии восстановления (если нет возможности ходить в поликлинику) и для профилактики заболеваний. Если обострение протекает тяжело, то лечиться лучше в медицинском учреждении. Еще один минус «домашнего» лечения — недисциплинированность пациента. Начинают лечиться с энтузиазмом, но как только «отпустит», все забрасывают, забывая о том, что надо пройти целый, полный курс терапии.

У многих людей в шкафу имеется несколько физиотерапевтических приборчиков, приобретенных «по случаю». Частенько ни с одним из них человек не удосужился подробно ознакомиться, внимательно прочитав инструкцию, рекомендации по лечению. Естественно, в случае заболевания он если и применяет их, то не тогда, не то и не так. Зря потрачены деньги и упущена возможность действительно помочь себе.

Миф одиннадцатый. Если в прошлом была непереносимость какого-либо физиотерапевтического средства, значит, и остальные будут давать побочные эффекты.

Убеждение, совершенно не соответствующее действительности. Бывает, конечно, что пациент плохо переносит, например, электролечение — на месте наложения влажных прокладок появляются высыпания, и ток раздражает, даже если сила его невелика, и после процедуры некоторое время голова кружится и т. д. Но это совсем не значит, что другие методы физиотерапии тоже нельзя применять. В самом факте непереносимости нет ничего страшного, ведь и продукты питания мы не все переносим — просто индивидуальная реакция организма. Кстати, мы должны быть благодарны своему организму за такую острую реакцию: он показывает нам, что толку от лечения все равно не будет, а навредить сможем. Хотя часто то же средство, примененное на другую часть тела и в другой дозировке, прекрасно переносится и оказывает хорошее лечебное действие.

Замена физиопроцедуры — прерогатива врача, именно к нему нужно обращаться в случаях, когда назначенное лечение дает какие-либо побочные эффекты. За всю свою практику автор не встретил ни одного пациента, которому не подходили бы абсолютно все процедуры. Разумная и своевременная корректировка лечения позволяет помочь человеку в любом случае, правда, если нет абсолютных противопоказаний.

Миф двенадцатый. «Сделал уже аж три процедуры, а ничего не помогает».

Немало потрудившись для того, чтобы собрать к 40 годам кучу заболеваний, человек зачастую убежден: сделав одолжение и обратившись наконец-то к врачу, он должен вылечиться от всего, сразу и надолго. Любопытный феномен массовой популярности различных шарлатанов -целителей, экстрасенсов, магов и прочих объясняется, видимо, именно этим нетерпением. Вот они и обещают«с гарантией» оздоровить с головы до пят и навсегда. Не то что скучные рекомендации и прогнозы врачей. Однако такого волшебства не бывает, в том числе — и в медицине.

Любая болезнь имеет латентный, скрытый, период и фазу клинических проявлений. Латентный период длится годами и представляет собой неощущаемую нами упорную борьбу организма с вредоносным фактором, стремление его победить, ограничить или к нему приспособиться. Фаза клинического проявления означает, что организм проиграл, его защитно-компенсаторные возможности истощились и не могут справиться с болезнью. К этому времени патологический процесс уже «встроен» в организм, в его клеточные и энергоинформационные структуры. Стремление человека за несколько дней компенсировать то, что разрушалось годы, и в срочном порядке «вырвать с корнем» болезнь свидетельствует просто о его полном невежестве в области медицины и собственного здоровья.

Нужно время, и немалое, чтобы купировать острые симптомы, помочь организму начать постепенную перестройку из болезненного в компенсированное состояние, восстановить истощенные энергетические ресурсы. В гомеопатии, например, считается, что лечить нужно столько месяцев, сколько лет длится болезнь. Возможно, это действительно так. Во всяком случае, никакое физиотерапевтическое средство не может творить такие невероятные чудеса. С помощью аппарата можно относительно быстро победить боль, снять воспаление, отек и т. д., но хронический процесс требует достаточно длительного лечения. Обычно первые положительные сдвиги ощущаются уже к 56й процедуре. Но вполне может быть, и после 10 сеансов существенного улучшения не будет. К этому нужно быть готовым, раз уж взялись лечиться. Терпение — и болезнь отступит.

Миф тринадцатый. Можно серьезно себе помочь, купив с рук у красноречивого распространителя физиотерапевтический аппаратик неизвестного происхождения.

Привлекает обычно невысокая цена и то, что «не нужно никуда ходить»: ты ему — деньги, он тебе тут же — товар. Дело хозяйское, но необходимо предупредить: продукция в большинстве случаев очень ненадежная, быстро ломается, лечебный эффект крайне сомнительный. Лучше прибавить немного денег и купить с гарантированным качеством и отечественного производства.

Не обращайте внимания на рекламу, и устную, и письменную. Говорить и писать красочно, ярко и убедительно, если нужно что-то продать, у нас уже научились. Но, скорее всего, с действительным положением вещей обещанное не имеет ничего общего. По-настоящему серьезные и эффективные «ноухау» быстро патентуются, организуются солидные фирмы производители, распространение идет по открытым каналам через легально оформленные структуры. Все иное — или подделка, или китайский низкокачественный ширпотреб.

Миф четырнадцатый. Не помогло однажды – не стоит больше и пробовать.

Бывает, что методы физиолечения не дают достаточного эффекта. Это может быть связано с различными причинами. Тяжесть самого заболевания, невосприимчивость пациента к тем видам электромагнитных полей, которыми его лечили, неправильно выбранные параметры воздействия — все это и многое другое может играть роль. Подобный «нулевой» опыт совершенно ничего не значит в долговременном плане. В интересах самого пациента пробовать различные методы физиолечения при различных заболеваниях. Очень может быть, что его скепсис даст, наконец, трещину. Бывают вялотекущие длительные патологические процессы, с трудом поддающиеся любому лечению, в том числе — физиотерапевтическому. Однако случится другое заболевание — и физиотерапия порадует хорошим и быстрым результатом.

Нельзя быть категоричным, рассуждая с дилетантских позиций. Доверьтесь врачу!

Электрофорез с магнезией

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 8-962-400-57-10 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, ул. Умара Алиева 31

8(8782) 26-48-02, +7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Гель-электрофорез — Science Learning Hub

Гель-электрофорез используется для разделения макромолекул, таких как ДНК, РНК и белки. Фрагменты ДНК разделяются по размеру. Белки можно разделить по размеру и заряду (разные белки имеют разный заряд).

Как разделяются фрагменты ДНК с помощью гель-электрофореза?

Раствор молекул ДНК помещается в гель. Поскольку каждая молекула ДНК заряжена отрицательно, ее можно протянуть через гель электрическим полем.Небольшие молекулы ДНК движутся через гель быстрее, чем более крупные молекулы ДНК.

В результате получается серия «полос», каждая из которых содержит молекулы ДНК определенного размера. Полосы, наиболее удаленные от начала геля, содержат мельчайшие фрагменты ДНК. Ближайшие к началу геля полосы содержат наиболее крупные фрагменты ДНК.

Когда гель-электрофорез используется для разделения фрагментов ДНК?

Гель-электрофорез может использоваться для различных целей, например:

Когда гель-электрофорез используется для разделения белков?

Благодаря телешоу, таким как CSI, многие люди знакомы с использованием гель-электрофореза для разделения макромолекул, таких как ДНК.Однако гель-электрофорез также можно использовать для разделения белков.

Различные белки имеют разные размеры, в основном из-за количества аминокислотных строительных блоков в их структуре. Химические модификации, связанные с белком, также влияют на его размер. У разных белков также разные заряды. Это может быть результатом как типов аминокислот, используемых для их создания, так и типов модификаций, присоединенных к ним.

Для получения различной информации используются разные типы гелей для электрофореза.Поэтому тип геля, который вы выбираете, зависит от типа задаваемого вами вопроса.

Разделение по размеру

Обычно гели, изготовленные из полиакриламида, используются для разделения белков на основе их различных размеров. Обычно белки сначала обрабатывают теплом и химическим веществом, называемым SDS, чтобы распутать белок. SDS — это детергент, который придает всем белкам одинаковый общий отрицательный заряд, поэтому при приложении электрического тока к гелю разделение происходит только из-за размера белка.Этот метод называется SDS-PAGE (электрофорез в SDS-полиакриламидном геле).

Небольшие белковые молекулы проходят через гель быстрее, чем более крупные белки, что приводит к появлению серии «полос». Каждая полоса содержит белок определенного размера. Их можно сравнить со стандартами известных размеров.

Гель SDS-PAGE использовался для разделения белков по размеру. Образцы крови различных видов акул. Первая полоса содержит маркеры известных размеров. Крупные белки находятся наверху геля, а мелкие — внизу.

Этот метод может использоваться для многих целей, включая очистку определенного белка, например, для выделения фермента для пищевой промышленности.

Заряд и разделение pH

Изоэлектрическое фокусирование (IEF) и электрофорез в агарозном геле — это два способа разделения белков с помощью их различных электрических зарядов. В отличие от SDS-PAGE, белки обычно сохраняются в своем естественном (свернутом) состоянии. Тип используемого геля и раствор вокруг геля также различаются.

При электрофорезе в агарозном геле белки загружают в середину лунки. Белки с сильным отрицательным зарядом быстрее всего движутся к положительной стороне геля, тогда как положительно заряженные белки движутся в противоположном направлении.

Этот метод может использоваться для разделения белков с одинаковой молекулярной массой, но с разными зарядами, или когда размер не важен (например, для изучения изменений в присутствии разных белков во время развития заболевания).

Двумерный электрофорез

В наши дни разделение заряда (IEF) и размера (SDS-PAGE) часто используется вместе в двумерном электрофорезе, где сначала используется разделение зарядов, а затем эти разделенные белки разделяются на основе по размеру.

Это очень эффективный метод идентификации конкретного белка из ткани, которая может содержать тысячи белков и где могут быть только небольшие различия между контрольными и обработанными образцами (например,грамм. искать белок, участвующий в устойчивости растений к хищничеству насекомых).

Что такое гель-электрофорез? | Факты

Электрофорез — это метод, обычно используемый в лаборатории для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, по размеру.

  • Гель-электрофорез — это метод, обычно используемый в лабораториях для разделения заряженных молекул, таких как ДНК, РНК и белки, в зависимости от их размера.
  • Заряженные молекулы движутся через гель, когда через него пропускают электрический ток.
  • Электрический ток пропускается через гель, так что один конец геля имеет положительный заряд, а другой конец — отрицательный.
  • Движение заряженных молекул называется миграцией. Молекулы движутся навстречу противоположному заряду. Таким образом, молекула с отрицательным зарядом будет притягиваться к положительному концу (противоположности притягиваются!).
  • Гель состоит из проницаемой матрицы, немного похожей на сито, через которую молекулы могут перемещаться при прохождении электрического тока.
  • Более мелкие молекулы мигрируют через гель быстрее и, следовательно, перемещаются дальше, чем более крупные фрагменты, которые мигрируют медленнее и, следовательно, будут перемещаться на меньшее расстояние. В результате молекулы разделяются по размеру.

Гель-электрофорез и ДНК

  • Электрофорез позволяет различать фрагменты ДНК разной длины.
  • ДНК заряжена отрицательно, поэтому при приложении электрического тока к гелю ДНК будет перемещаться к положительно заряженному электроду.
  • Более короткие нити ДНК движутся через гель быстрее, чем более длинные нити, в результате чего фрагменты выстраиваются по размеру.
  • Использование красителей, флуоресцентных меток или радиоактивных меток позволяет увидеть ДНК на геле после их разделения. Они появятся на геле в виде полос.
  • Маркер ДНК с фрагментами известной длины обычно пропускается через гель одновременно с образцами.
  • Сравнивая полосы образцов ДНК с полосами маркера ДНК, вы можете определить приблизительную длину фрагментов ДНК в образцах.

Как проводится гель-электрофорез?

Подготовка геля

  • Агарозные гели обычно используются для визуализации фрагментов ДНК. Концентрация агарозы, используемой для приготовления геля, зависит от размера фрагментов ДНК, с которыми вы работаете.
  • Чем выше концентрация агарозы, тем плотнее матрица и наоборот. Меньшие фрагменты ДНК разделяются при более высоких концентрациях агарозы, в то время как более крупные молекулы требуют более низкой концентрации агарозы.
  • Чтобы сделать гель, порошок агарозы смешивают с буфером для электрофореза и нагревают до высокой температуры, пока весь порошок агарозы не расплавится.
  • Расплавленный гель затем выливают в лоток для отливки геля, и на одном конце помещают «гребешок», чтобы сделать лунки для образца, в который будет помещаться пипетка.
  • Как только гель остынет и затвердеет (теперь он будет непрозрачным, а не прозрачным), гребешок удаляется.
  • Многие люди сейчас используют готовые гели.
  • Затем гель помещают в резервуар для электрофореза, и буфер для электрофореза наливается в резервуар до тех пор, пока поверхность геля не будет покрыта.Буфер проводит электрический ток. Тип используемого буфера зависит от приблизительного размера фрагментов ДНК в образце.

Подготовка ДНК к электрофорезу

  • В образец ДНК перед электрофорезом добавляют краситель, чтобы увеличить вязкость образца, что предотвратит его выплывание из лунок и так, чтобы миграция образца через гель видно.
  • Маркер ДНК (также известный как стандарт размера или лестница ДНК) загружается в первую лунку геля.Фрагменты в маркере имеют известную длину, поэтому их можно использовать для приблизительного определения размера фрагментов в образцах.
  • Подготовленные образцы ДНК затем переносятся в оставшиеся лунки геля.
  • Когда это будет сделано, крышка помещается на резервуар для электрофореза, чтобы убедиться, что ориентация геля, положительного и отрицательного электродов правильная (мы хотим, чтобы ДНК перемещалась через гель к положительному концу).

Разделение фрагментов

  • Затем включается электрический ток, так что отрицательно заряженная ДНК перемещается через гель к положительной стороне геля.
  • Более короткие участки ДНК движутся быстрее, чем более длинные, поэтому перемещаются дальше во время прохождения тока.
  • Расстояние, на которое ДНК мигрировала в геле, можно определить визуально, отслеживая миграцию красителя загрузочного буфера.
  • Электрический ток остается включенным достаточно долго, чтобы гарантировать, что фрагменты ДНК перемещаются по гелю достаточно далеко, чтобы разделить их, но не настолько долго, чтобы они стекали с конца геля.

Иллюстрация оборудования для электрофореза ДНК, используемого для разделения фрагментов ДНК по размеру.Гель находится в резервуаре с буфером. Образцы ДНК помещают в лунки на одном конце геля, и через гель пропускают электрический ток. Отрицательно заряженная ДНК движется к положительному электроду. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Визуализация результатов

  • После того, как ДНК прошла достаточно далеко по гелю, электрический ток отключается, и гель удаляется из емкости для электрофореза.
  • Для визуализации ДНК гель окрашивают флуоресцентным красителем, который связывается с ДНК, и помещают на ультрафиолетовый трансиллюминатор, который показывает окрашенную ДНК в виде ярких полос.
  • В качестве альтернативы краситель можно смешать с гелем перед его заливкой.
  • Если гель растекся правильно, будет видна полосатость ДНК-маркера / стандарта размера.
  • Затем можно судить о размере ДНК в вашем образце, представив горизонтальную линию, проходящую поперек полос маркера ДНК. Затем вы можете оценить размер ДНК в образце, сопоставив их с ближайшей полосой в маркере.

Иллюстрация, показывающая полосы ДНК, разделенные на геле.Длина фрагментов ДНК сравнивается с маркером, содержащим фрагменты известной длины. Изображение предоставлено: Genome Research Limited

Эта страница последний раз обновлялась 25.01.2016

Что включает в себя гель-электрофорез?

Гель-электрофорез — широко используемый метод в лабораториях медико-биологических наук для разделения макромолекул, таких как ДНК, РНК и белки. В этом методе молекулы разделяются на основе их размера и электрического заряда.Гель-электрофорез обычно проводится в лабораториях для анализа образцов ДНК, РНК или белков из различных источников.

Загрузка образцов ДНК в агарозный гель для электрофореза — изображение Авторские права: научное фото, идентификатор изображения: 214331152 через Shutterstock.com

Принципы гель-электрофореза

Метод гель-электрофореза использует разницу в размере и заряде разных молекул в образце. Разделительный образец ДНК или белка наносят на пористый гель, помещенный в ионную буферную среду.При приложении электрического заряда каждая молекула, имеющая разный размер и заряд, будет двигаться через гель с разной скоростью.

Пористый гель, используемый в этой методике, действует как молекулярное сито, отделяющее более крупные молекулы от более мелких. Молекулы меньшего размера перемещаются по гелю быстрее, а более объемные остаются. Подвижность частиц также контролируется их индивидуальным электрическим зарядом. Два противоположно заряженных электрода, которые являются частью системы, притягивают молекулы к себе в зависимости от их заряда.

Демонстрация лаборатории гель-электрофореза ДНК Play

Как это работает?

Гель, используемый при гель-электрофорезе, обычно изготавливается из материала, называемого агарозой, который представляет собой гелеобразное вещество, экстрагированное из морских водорослей. Этот пористый гель можно использовать для разделения макромолекул самых разных размеров. Гель погружают в солевой буферный раствор в камере для электрофореза. Трис-борат-ЭДТА (ТВЭ) обычно используется в качестве буфера. Его основная функция — контролировать pH системы.Камера имеет два электрода — один положительный, а другой отрицательный — на двух концах.

Образцы, которые необходимо проанализировать, затем загружают в крошечные лунки геля с помощью пипетки. По завершении загрузки подается электрический ток 50–150 В. Теперь заряженные молекулы, присутствующие в образце, начинают мигрировать через гель к электродам. Отрицательно заряженные молекулы движутся к положительному электроду, а положительно заряженные молекулы — к отрицательному.

Скорость, с которой каждая молекула проходит через гель, называется ее электрофоретической подвижностью и определяется в основном ее чистым зарядом и размером. Сильно заряженные молекулы движутся быстрее, чем слабо заряженные. Меньшие молекулы бегут быстрее, оставляя большие позади. Таким образом, сильный заряд и малый размер увеличивают электрофоретическую подвижность молекулы, тогда как слабый заряд и большой размер уменьшают подвижность молекулы. Когда все молекулы в образце имеют одинаковый размер, разделение будет основываться исключительно на их размере.

После завершения разделения гель окрашивают красителем, чтобы выявить полосы разделения. Бромид этидия — флуоресцентный краситель, обычно используемый в гель-электрофорезе. Гель замачивают в разбавленном растворе бромистого этидия, а затем помещают в УФ-трансиллюминатор для визуализации разделительных полос.

Полосы немедленно исследуются или фотографируются для дальнейшего использования, поскольку со временем они будут диффундировать в гель. Краситель также может быть загружен в гель заранее, чтобы отслеживать миграцию молекул по мере того, как это происходит.

Применение гель-электрофореза

Гель-электрофорез широко используется в лабораториях молекулярной биологии и биохимии в таких областях, как судебная медицина, консервативная биология и медицина.

Некоторые ключевые области применения этой техники перечислены ниже:

  • В отделении фрагментов ДНК для снятия отпечатков ДНК для расследования места преступления
  • Для анализа результатов полимеразной цепной реакции
  • Для анализа генов, связанных с определенным заболеванием
  • В профилировании ДНК для таксономических исследований для различения различных видов
  • При тестировании на отцовство с помощью снятия отпечатков ДНК
  • При изучении структуры и функции белков
  • В анализе на устойчивость к антибиотикам
  • Блоттинг для анализа макромолекул
  • При изучении эволюционных взаимоотношений путем анализа генетического сходства популяций или видов

Молекулярная биология Играть

Список литературы

Дополнительная литература

Гель-электрофорез — обзор

2.

31.2.2.1 1D SDS-PAGE и 2D-GE

Гель-электрофорез разделяет молекулы на основе физических характеристик, таких как размер, форма или p I в гелевой матрице. Во время SDS-PAGE белки разделяются в соответствии с их электрофоретической подвижностью в зависимости от длины полипептидной цепи или MW [5]. Гель изготовлен с различными концентрациями акриламида и сшивающего агента, что дает полиакриламидные сетки разного размера. Белки денатурируют с помощью SDS, который покрывает белки отрицательным зарядом, прямо пропорциональным его массе, так что отношение массы к заряду ( m / z ) остается постоянным.Денатурированные белки превращаются в длинные стержни вместо сложной третичной формы; следовательно, скорость, с которой белки, покрытые SDS, мигрируют в геле, зависит от его размера, а не от его заряда или формы [5]. Затем разделенные белки переваривают в геле для разделения пептидов и анализа ВЭЖХ-МС / МС.

В 2D-GE два свойства, которые используются для разделения белков, — это p I (pH, при котором молекула не несет чистого электрического заряда — с использованием IEF) и MW (с использованием 1D SDS-PAGE; см. Рисунок 2) ).IEF разделяет белки на основе их относительного содержания кислотных и основных остатков. Белки вводятся в гель, который имеет установленный градиент pH (иммобилизованный градиент pH или полоски IPG). IEF может разделять белки, которые отличаются по значениям p I всего на 0,01, с превосходной воспроизводимостью и высокой емкостью белковой нагрузки, особенно с полосками IPG. IEF широко используется не только в первом измерении разделения в 2D-GE, но также для препаративного фракционирования белков в жидком и гелевом форматах.

Рис. 2. Двумерный гель-электрофорез (2D-GE) изоэлектрического фокусирования (IEF) в диапазоне pH 3,0–10,0. Белки психрофила Pedobacter cryoconitis , растворенные в 12,5% акриламидном геле.

2D-GE по-прежнему считается «рабочей лошадкой» для протеомики, поскольку он хорошо зарекомендовал себя и надежен, а его преимущество состоит в том, что он позволяет одновременно визуализировать тысячи белковых пятен, количественно определять их уровни и обнаруживать ПТМ. Однако он имеет хорошо изученные ограничения, такие как значительная рабочая нагрузка, низкое разрешение для высокогидрофобных белков и чрезвычайно кислые или основные, большие или маленькие белки.Использование автоматизированных систем точечного удаления и оборудования для разложения в геле, а также программного обеспечения для анализа изображений повысило его возможности и производительность. Была разработана альтернатива протоколу 2D-GE для разделения и обнаружения наиболее гидрофобных белков тилакоидной мембраны с использованием электрофореза в 2D-синем нативном (BN) геле, когда солюбилизированные тилакоидные мембраны загружаются красителем для зарядки комплексов для разделения. с последующим SDS-PAGE во втором измерении (2D: BN / SDS-PAGE).Этот протокол сводит к минимуму потери за счет эффективности переноса белка. Другой метод, метод дифференциального электрофореза в геле (DIGE), позволяет проводить анализ нескольких образцов в одном геле. Это достигается за счет использования нескольких флуоресцентных красителей для маркировки образцов белка перед 2D-GE, при этом образцы одновременно разделяются и визуализируются в одном и том же геле, а также уменьшаются технические вариации от геля к гелю.

Электрофорез в агарозном геле — обзор

Примечания к электрофорезу

Мы используем электрофорез для разделения нуклеиновых кислот или белков по размеру и / или заряду, в зависимости от того, что мы добавили в наши решения (больше проблем с SDS-PAGE; см. главу 7).По сути, при гель-электрофорезе вы помещаете свои образцы в гелевую матрицу, и ваши отрицательно заряженные нуклеиновые кислоты (отрицательно заряженные из-за их фосфатной «основы») отталкиваются от отрицательного полюса ваших электродов к положительному полюсу на другом конце электрода. гель. Более крупные РНК и ДНК (и белки в SDS-PAGE) труднее проходят через гелевый матрикс, и поэтому вы можете разделить свои РНК / ДНК / белки по размеру. Кроме того, это единственный способ проверить результаты конечной ПЦР (см. Раздел ПЦР в главе 4).По моему опыту, использование гелей для электрофореза — это баланс между эффективностью и красотой: запуск геля при более высоком напряжении будет перемещать образцы по гелю быстрее, но получающиеся полосы с большей вероятностью будут размазаны (и если вы установите достаточно высокое напряжение, вы растопите гель и разрушите всю свою тяжелую работу). Запустите гели при более низком напряжении, и вы получите более красивую картинку, но вам придется подождать.

У меня есть опыт работы с тремя типами гель-электрофореза: электрофорез в агарозном геле, денатурирующий (формальдегидный) гель-электрофорез и электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE).Гели агарозы дешевы и могут использоваться для исследования стабильности РНК или ДНК. Денатурирующий гель-электрофорез можно использовать с РНК для нозерн-блоттинга, но в большинстве случаев он не нужен, если вашей целью является исследование стабильности РНК, которую можно исследовать с помощью электрофореза в агарозном геле. Хотя для электрофореза в агарозном геле можно приготовить растворы без РНКазы, я считаю, что это необходимо только для загрузочного буфера и воды, но не для геля или буфера. Растворы без РНКазы необходимы, если кто-то решает провести нозерн-блоттинг, которые не обсуждаются в этой книге.SDS-PAGE наиболее полезен для разделения белков и поэтому обсуждается в главе 7.

При электрофорезе в агарозном геле используется один из двух буферов: трис-ацетат-EDTA (TAE) или трис-борат-EDTA (TBE). TBE имеет более высокую буферную емкость, чем TAE. Компоненты буфера ТВЕ выпадают в осадок из раствора при хранении в более высоких концентрациях (например, 10-кратный раствор), поэтому я держу 0,5-кратный запас и избегаю проблем с осаждением и стабильностью.

Визуализация результатов электрофореза в агарозном геле обычно выполняется одним из двух способов: включение ДНК-связывающего флуорофора в раствор геля или сохранение этого флуорофора в буферном растворе, промывание в нем агарозного геля и использование этого раствора для многократного использования. гели.В обоих случаях вы будете использовать ультрафиолет, чтобы возбудить флуорофор и увидеть результаты эксперимента. Наиболее распространенным ДНК-связывающим флуорофором является бромид этидия (EtBr). EtBr токсичен, и ваш местный совет по охране окружающей среды и безопасности дает рекомендации, как с ним обращаться; делай то, что они тебе говорят. Другой распространенный флуорофор, который я использую, — SYBR Safe ™ 1 (Invitrogen). SYBR Safe ™ лучше справляется с тестами на токсичность на лабораторных животных, чем EtBr, но употребление чего-либо, связывающего ДНК, — не лучшая идея.По моему опыту, SYBR Safe ™ со временем разлагается в свободном растворе, но не в хранящемся в нем концентрате 10 000 раз. Таким образом, я получаю стабильные результаты, добавляя SYBR Safe ™ (или EtBr) в раствор геля после того, как он достаточно остынет, перед заливкой геля. Когда флуорофор находится в свободном растворе, необходимо инкубировать гели в течение более длительных периодов времени, чтобы получить эквивалентное окрашивание в повторно используемом растворе; однако, если вы исследуете гели на флуоресценцию, вы не можете сказать, является ли отсутствие флуоресценции результатом того, что эксперимент не сработал, вы недостаточно долго инкубировали в растворе или вам нужно приготовить свежий раствор флуорофора. .Кроме того, промывание в растворе флуорофора обычно требует промывки в воде, чтобы уменьшить фоновый шум, и вы можете оставить его в воде на столько времени, чтобы вымыть флуорофор. В целом, я думаю, что включение флуорофора в гель — это правильный выбор, и вы со временем будете использовать его меньше, если не будете менять раствор для окрашивания каждые пару дней.

Хороший справочник по этому разделу — книга Кэти Баркер At the Bench . 2

8.3: Электрофорез — Биология LibreTexts

Электрофорез использует электрическое поле, приложенное к гелевой матрице, для разделения больших молекул, таких как ДНК, РНК и белки, по заряду и размеру.Образцы загружаются в лунки гелевой матрицы, которая может разделять молекулы по размеру, и к гелю прикладывается электрическое поле. Это поле заставляет отрицательно заряженные молекулы двигаться к положительному электроду. Сама гелевая матрица действует как сито, через которое самые маленькие молекулы проходят быстро, а более длинные молекулы движутся медленнее.

Для ДНК и РНК сортировка молекул по размеру таким способом тривиальна из-за однородного отрицательного заряда на фосфатном скелете. Для белков, которые различаются по своему заряду, необходимо использовать хитрый трюк, чтобы сделать их похожими на нуклеиновые кислоты — см. Электрофорез в полиакриламидном геле (PAGE) ниже. У разных видов гелей разный размер пор. Как и сита с более мелкими или крупными ячейками, одни гели лучше справляются с разделением более мелких молекул, а другие — с более крупными. Гель-электрофорез может использоваться как препаративный метод (то есть при очистке белков или нуклеиновых кислот), но чаще всего он используется как аналитический инструмент.

Электрофорез в агарозном геле

Электрофорез в агарозном геле — это метод, используемый для разделения нуклеиновых кислот в первую очередь по размеру. Агароза — это полисахарид, полученный из морских водорослей (рис. 8.11). Его можно растворить в буфере для кипения и вылить в поддон, где он остынет (рис. 8.12), образуя пластину. Гели агарозы наливают с помощью расчески, чтобы сделать лунки, в которые помещают образцы ДНК или РНК после затвердевания геля. Гель погружают в буфер, и через пластину пропускают ток.Двухцепочечная ДНК имеет однородный отрицательный заряд, который не зависит от состава последовательности молекулы. Следовательно, если фрагменты ДНК поместить в электрическое поле, они будут мигрировать от катода (-) к аноду (+). Скорость миграции напрямую зависит от способности каждой молекулы ДНК проникать через просеивающий гель. Матрица агарозы обеспечивает отверстия для движения макромолекул. Самым крупным макромолекулам труднее всего перемещаться по гелю, тогда как самые маленькие макромолекулы проходят через него быстрее всего.


Рисунок 8.11 — Структура полисахарида агарозы. Википедия

Поскольку при электрофорезе в качестве силы для перемещения молекул через матрицу используется электрический ток, разделяемые молекулы должны быть заряжены. Поскольку отношение размера к заряду для ДНК и РНК постоянно для всех размеров этих нуклеиновых кислот, молекулы просто сортируются на основе их размера — наименьшие перемещаются быстрее, а наибольшие — медленнее.

Все фрагменты заданного размера будут перемещаться по гелю на одинаковое расстояние, образуя так называемые «полосы» на геле.Визуализация фрагментов ДНК в геле становится возможной благодаря добавлению красителя, такого как бромид этидия, который интеркалирует между основаниями и флуоресцирует при просмотре в ультрафиолетовом свете (рис. 8.13). можно определить размеры фрагментов ДНК в образце. Полезно отметить, что по соглашению фрагменты ДНК описываются не их молекулярными массами (в отличие от белков), а их длиной в парах оснований (bp) или килобазах (kb).

Рисунок 8.12 — Разделение ДНК электрофорезом в агарозном геле — оранжевые полосы — это фрагменты ДНК. Wikipedia


Рисунок 8.13 — Полосы ДНК, визуализированные при окрашивании бромидом этидия. Википедия

Электрофорез в полиакриламидном геле (СТРАНИЦА)

Подобно ДНК и РНК, белки представляют собой большие макромолекулы, но в отличие от нуклеиновых кислот белки не обязательно заряжены отрицательно. Заряд каждого белка зависит от его уникальной аминокислотной последовательности. Таким образом, белки в смеси не обязательно будут двигаться к аноду.

Кроме того, в то время как двухцепочечная ДНК имеет форму палочки, большинство белков глобулярны (свернуты). Кроме того, белки значительно меньше нуклеиновых кислот, поэтому отверстия в матрице агарозного геля просто слишком велики, чтобы обеспечить эффективное разделение. Следовательно, неизмененные (нативные) белки не очень перспективны для электрофореза на агарозных гелях. Чтобы разделить белки по массе с помощью электрофореза, необходимо внести несколько модификаций.

Гелевая матрица

Во-первых, используется матрица, полученная путем полимеризации и сшивания акриламидных звеньев.Мономерный акриламид (рис. 8.14) полимеризуется, и полимеры сшиваются с использованием N, N’-метилен-бисакриламида (рис. 8.15), чтобы создать сетчатую структуру. Размер отверстий матрицы / сетки можно легко регулировать, изменяя процентное содержание акриламида в реакции. Более высокий процент акриламида дает меньшие отверстия и более эффективен для разделения более мелких молекул, тогда как более низкий процент акриламида используется при разделении смесей более крупных молекул. (Примечание: полиакриламидные гели также используются для разделения небольших фрагментов нуклеиновых кислот, при этом некоторые акриламидные гели способны разделять фрагменты ДНК, длина которых различается всего на один нуклеотид.)

Рисунок 8.14 — Акриламидный мономер. Википедия


Рис. 8.15 — N, N’-Метиленбисакриламид — сшивающий реагент акриламид. Википедия

Изменение заряда по SDS

Второе соображение заключается в том, что белки должны быть физически изменены, чтобы «представить» себя матрице, как отрицательно заряженные стержни ДНК. Это достигается обработкой белков анионным детергентом, SDS (додецилсульфатом натрия). SDS денатурирует белки, так что они принимают стержнеобразную форму, а молекулы SDS покрывают белки таким образом, что внешняя поверхность нагружается отрицательными зарядами, маскируя исходные заряды на белках и делая заряд на белках более пропорциональным их массе. как основа ДНК.

Поскольку белки обычно имеют дисульфидные связи, которые не позволяют им полностью разворачиваться в детергенте, образцы кипятят с меркаптоэтанолом, чтобы разорвать дисульфидные связи и убедиться, что белки имеют как можно более стержневидную форму в SDS. Такие реагенты, как меркаптоэтанол (а также дитиотреитол), представляют собой сульфгидрилсодержащие реагенты, которые окисляются, поскольку они восстанавливают дисульфидные связи в других молекулах (см. Рис. 8.16)

Рисунок 8.16 — Восстановление дисульфидных связей дитиотреитолом.Википедия

Укладочный гель

Третье соображение заключается в том, что «укладывающийся гель» можно использовать в верхней части полиакриламидного геля, чтобы обеспечить способ сжатия образцов в плотную полоску до того, как они попадут в основной полиакриламидный гель (называемый разделяющим гелем). Точно так же, как фрагменты ДНК при электрофорезе в агарозном геле сортируются по размеру (наибольшее движение — самое медленное, а наименьшее — самое быстрое), белки мигрируют через матрицу геля со скоростью, обратно пропорциональной их размеру. По завершении электрофореза белки можно визуализировать путем окрашивания соединениями, которые связываются с белками, такими как кумасси бриллиантовый синий (рис. 8.17) или нитрат серебра.

Рис. 8.17. Два геля для SDS-PAGE. Белки представляют собой синие полосы (окрашенные кумасси синим). Википедия

Неденатурирующий гель-электрофорез

Метод SDS_PAGE, описанный выше, является наиболее распространенным методом, используемым для электрофоретического разделения белков.Однако в некоторых ситуациях белки могут быть разделены на так называемых «нативных» гелях в отсутствие SDS. В этих условиях на движение белков через гель будет влиять не только их масса, но и их заряд при рН геля. Белки в комплексе с другими молекулами могут перемещаться как единое целое, что позволяет изолировать партнеров связывания интересующих белков.

Изоэлектрическая фокусировка

Белки значительно различаются по своему заряду и, следовательно, по значению pI (pH, при котором их заряд равен нулю).Это можно использовать для разделения белков в смеси. Разделение белков с помощью изоэлектрического фокусирования требует установления градиента pH в пробирке, содержащей матрицу из акриламидного геля. Размер пор геля регулируется так, чтобы он был большим, чтобы уменьшить эффект просеивания в зависимости от размера. Подлежащие разделению молекулы наносят на гель, содержащий градиент pH, и прикладывают электрическое поле. В этих условиях белки будут двигаться в соответствии со своим зарядом.

Положительно заряженные молекулы, например, движутся к отрицательному электроду, но, поскольку они движутся через градиент pH, когда они проходят через него, они достигают области, где их заряд равен нулю, и в этот момент они перестают двигаться.В этой точке они не притягиваются ни к положительному, ни к отрицательному электроду и, таким образом, «сфокусированы» на своей pI (рис. 8.18). Используя изоэлектрическое фокусирование, можно разделить белки, значения pI которых отличаются всего на 0,01 единицы.

Рисунок 8.18 — Изоэлектрическая фокусировка: A. В начале пробега; Б. в конце цикла

2D гель-электрофорез

И SDS-PAGE, и изоэлектрическая фокусировка являются мощными методами, но умная комбинация этих двух является мощным инструментом протеомики — науки об одновременном изучении всех белков клетки / ткани.При 2-мерном гель-электрофорезе сначала готовят лизат из представляющих интерес клеток. Белки в лизате разделяются сначала по их pI с помощью изоэлектрического фокусирования, а затем по размеру с помощью SDS-PAGE.

Рисунок 8.19 — Схема для проведения 2-D гель-анализа. Изображение Aleia Kim

Смесь белков сначала наносится на пробирку или полоску (рис. 8.19, этап 1), где выполняется изоэлектрическое фокусирование для разделения белков по их значениям pI (этап 2). Затем, как показано на рисунке, гель, содержащий белки, разделенные их pI, переворачивают на бок и наносят на верхнюю часть полиакриламидной пластины для SDS-PAGE для разделения в зависимости от размера (этап 3).Белки в матрице изоэлектрической фокусировки подвергаются электрофорезу в полиакриламидном геле и разделяются по размеру. Продукт этого анализа представляет собой двумерный гель, как показано на рисунке 8.20. Сила двумерного гель-электрофореза заключается в том, что практически каждый белок в клетке может быть отделен и появится на геле в виде пятна, определяемого его уникальным размером и размером. Пи. На рисунке точки в левом верхнем углу соответствуют большим положительно заряженным белкам, а точки в правом нижнем углу — небольшим отрицательно заряженным белкам.Каждое пятно на 2-мерном геле можно элюировать и идентифицировать с помощью высокопроизводительной масс-спектрометрии. Это особенно эффективно, когда сравнивают белковые профили между разными тканями или между контрольными и обработанными образцами одной и той же ткани.


Рисунок 8.20 — Результат разделения 2-D гель-электрофорезом. Википедия

Сравнение белковых профилей

Сравнение 2-D гелей белков из незлокачественной ткани и белков из раковой ткани того же типа обеспечивает быструю идентификацию белков, уровень экспрессии которых различается между ними.Подобная информация может быть полезна при разработке методов лечения или для понимания механизма (ов) развития рака.

Определение и объяснение электрофореза

Электрофорез — это термин, используемый для описания движения частиц в геле или жидкости в относительно однородном электрическом поле. Электрофорез можно использовать для разделения молекул на основе заряда, размера и сродства связывания. Этот метод в основном применяется для разделения и анализа биомолекул, таких как ДНК, РНК, белки, нуклеиновые кислоты, плазмиды и фрагменты этих макромолекул.Электрофорез — это один из методов, используемых для идентификации исходной ДНК, как при проверке отцовства, так и в судебной медицине.

Электрофорез анионов или отрицательно заряженных частиц называется анафорезом . Электрофорез катионов или положительно заряженных частиц называется катафорезом .

Электрофорез впервые наблюдал в 1807 году Фердинанд Фредерик Ройсс из Московского государственного университета, который заметил, что частицы глины мигрировали в воде, находящейся под постоянным электрическим полем.

Ключевые выводы: электрофорез

  • Электрофорез — это метод, используемый для разделения молекул в геле или жидкости с помощью электрического поля.
  • Скорость и направление движения частицы в электрическом поле зависит от размера молекулы и электрического заряда.
  • Обычно электрофорез используется для разделения макромолекул, таких как ДНК, РНК или белки.

Как работает электрофорез

В электрофорезе есть два основных фактора, которые определяют, насколько быстро частица может двигаться и в каком направлении.Во-первых, имеет значение плата за образец. Отрицательно заряженные частицы притягиваются к положительному полюсу электрического поля, а положительно заряженные частицы — к отрицательному. Нейтральные частицы могут быть ионизированы, если поле достаточно сильное. В противном случае это не повлияет.

Другой фактор — размер частиц. Маленькие ионы и молекулы могут перемещаться через гель или жидкость намного быстрее, чем более крупные.

В то время как заряженная частица притягивается к противоположному заряду в электрическом поле, существуют другие силы, которые влияют на движение молекулы.Трение и сила электростатического замедления замедляют продвижение частиц через жидкость или гель. В случае гель-электрофореза концентрацию геля можно контролировать для определения размера пор гелевой матрицы, который влияет на подвижность. Также присутствует жидкий буфер, который контролирует pH окружающей среды.

Когда молекулы протягиваются через жидкость или гель, среда нагревается. Это может денатурировать молекулы, а также повлиять на скорость движения. Напряжение регулируется, чтобы попытаться свести к минимуму время, необходимое для разделения молекул, сохраняя при этом хорошее разделение и сохраняя нетронутыми химические частицы.Иногда электрофорез проводят в холодильнике, чтобы компенсировать жару.

Типы электрофореза

Электрофорез включает в себя несколько связанных аналитических методов. Примеры включают:

  • аффинный электрофорез — Аффинный электрофорез — это тип электрофореза, при котором частицы разделяются на основе образования комплекса или биоспецифического взаимодействия
  • капиллярный электрофорез — Капиллярный электрофорез — это тип электрофореза, используемый для разделения ионов в зависимости от атомного радиуса, заряда и вязкости.Как следует из названия, эта техника обычно выполняется в стеклянной трубке. Он дает быстрые результаты и высокое разрешение разделения.
  • гель-электрофорез — Гель-электрофорез — это широко используемый тип электрофореза, при котором молекулы разделяются движением через пористый гель под действием электрического поля. Двумя основными гелевыми материалами являются агароза и полиакриламид. Гель-электрофорез используется для разделения нуклеиновых кислот (ДНК и РНК), фрагментов нуклеиновых кислот и белков.
  • иммуноэлектрофорез — Иммуноэлектрофорез — это общее название, данное множеству электрофоретических методов, используемых для характеристики и разделения белков на основе их реакции на антитела.
  • электроблоттинг — Электроблоттинг — это метод, используемый для выделения нуклеиновых кислот или белков после электрофореза путем переноса их на мембрану. Обычно используются полимеры поливинилиденфторид (ПВДФ) или нитроцеллюлоза. После извлечения образца его можно дополнительно проанализировать с помощью красителей или зондов.Вестерн-блоттинг — это одна из форм электроблоттинга, используемая для обнаружения определенных белков с использованием искусственных антител.
  • Гель-электрофорез в импульсном поле — Электрофорез в импульсном поле используется для разделения макромолекул, таких как ДНК, путем периодического изменения направления электрического поля, приложенного к гелевой матрице. Причина изменения электрического поля заключается в том, что традиционный гель-электрофорез не может эффективно разделить очень большие молекулы, которые все стремятся мигрировать вместе.Изменение направления электрического поля дает молекулам дополнительные направления движения, так что у них есть путь через гель. Напряжение обычно переключается между тремя направлениями: одно проходит вдоль оси геля, а два — под углом 60 градусов в каждую сторону. Хотя этот процесс занимает больше времени, чем традиционный гель-электрофорез, он лучше разделяет большие фрагменты ДНК.
  • изоэлектрическая фокусировка — Изоэлектрическая фокусировка (IEF или электрофокусировка) — это форма электрофореза, при которой молекулы разделяются по разным изоэлектрическим точкам.ИЭФ чаще всего выполняется с белками, потому что их электрический заряд зависит от pH.
.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *