Для электрофореза раствор цинка: цены, описание, инструкция, — 66.ru

Содержание

Электрофорез, сделать процедуру в СПб

Электрофорез – методика лечения, основанная на воздействии на тело пациента током. Через поврежденные участки кожи или слизистых оболочек в организм поступают ионы. Это достигается за счет постоянного либо импульсного тока.

Механизм действия

Ток раздражает кожу, вызывая различные реакции организма. Стимулируются тканевые обмены, кровообращение, процессы восстановления после разных заболеваний. После дозированного воздействия током в верхний слой кожи – эпидермис – поступают ионы лекарства. Потом они медленно распределяются по организму и вымываются лимфо- и кровотоком.

Преимущества электрофореза

Этот метод широко распространен в медицине и знаком практически каждому человеку. В сравнении с другими способами доставки в организм лекарственных средств, электрофорез имеет следующие преимущества:
• Возможность одновременного введения нескольких препаратов.
• Лекарства долго воздействуют на организм, но не вызывают общую интоксикацию.
• Можно напрямую воздействовать на пораженный участок кожного покрова.

• После сеанса лекарственные препараты долго остаются в коже, потому что формируется специальный очаг. Потом они медленно поступают в организм и разносятся по нему с кровью.
• Ионы – это хорошо действующая методика лечения.

Противопоказания

Эта методика категорически противопоказана при следующих состояниях:
• индивидуальная непереносимость;
• дерматозы;
• онкология;
• заболевания сердечно-сосудистой системы;
• частые кровотечения.

Перед началом курса процедур нужно проконсультироваться с лечащим врачом. В «СМ-Клиника» вы можете получить грамотную консультацию любого врача, который пропишет лечение в индивидуальном порядке с учетом протекания болезни и переносимости определенных препаратов.

На подготовительном этапе делается кожная проба. Это слабое воздействие, чтобы определить непереносимость и чувствительность. Только после этого принимается решение о возможности делать электрофорез.

Существует много показаний к применению этой методики. Однако проводить сеансы нужно только под наблюдением врача.

Лекарственный электрофорез

Один из вариантов проведения электрофореза – с использованием цинка. Только в «СМ-Клиника» в Санкт-Петербурге проводятся:
• классические сеансы электрофореза с цинком;
• в гинекологии – по вагинальной методике;
• в урологии – по ректальной технике;
• по трехэлектродному методу;
• по Щербаке;

• по Вермелю;
• по Бургиньону;
• полумаской Бергонье.

«СМ-Клиника» продолжает классические традиции физиотерапии, направленные на лечение, профилактику и восстановление.

Чем полезен цинк? Какова его роль в организме?

Это один из самых главных элементов, входящий в состав более чем 40 ферментов организма человека. Цинк участвует в формировании иммунитета, поддержании уровня гормонов, стабилизирует рост. Цинк содержится в крови, мышцах, печени, костях, почках, сетчатки глаз. Он способствует долгой жизни и сохранению молодости, устраняет усталость, выполняет функцию антиоксиданта.

Сегодня даже у молодых людей снижено содержание цинка в организме, по оценкам специалистов. Это негативно сказывается на женской репродуктивной функции, состоянии эндокринной системы.

Девушки с нехваткой цинка подвержены недостаточной выработке половых гормонов. У них продолжается рост, когда погодки уже остановились в росте. У них очень длинные конечности, внешне они выглядят инфантильными. Нарушается менструальный цикл и отложение жировой ткани.

У мужчин цинк контролирует рост простаты, профилактирует аденому, бесплодие. Этот элемент активизирует сперматозоиды и в целом половые гормоны.

Важно повышать уровень цинка пожилым людям, потому что иначе теряется слух, прогрессирует атеросклероз, часто возникают инфекции. Если цинк в норме, то хорошо функционирует мозг – сохраняется память, внимание и т. д.

Цинк активизирует витамины Е и А, то есть без него невозможна регенерация кожи, правильная работа сальных желез, рост ногтей и волос. Цинк участвует в борьбе с угрями.

В цинке нуждаются зубы человека. Он обеспечивает профилактику инфекционных болезней полости рта и десен.

При насыщении цинком суставов проходит боль, повышается устойчивость к физическим нагрузкам.

Показания к электрофорезу с раствором цинка

• Акне на теле и лице.
• Повышенные физические нагрузки. Цинк повышает выносливость и силовые показатели.
• Иммунодефицит.
• Сахарный диабет.
• Раны, дерматиты, ожоги, пролежни, экземы.
• Артриты, ревматизм, остеохондроз позвоночника, артрозы.

• Синдром хронической усталости.
• Бесплодие – мужское и женское, – которое вызвано воспалениями (простатит, эндометрит), недостаточностью или нарушением баланса половых гормонов.
• Заболевания органов ЖКТ – язва, гастрит, гепатоз, гепатит, панкреатит, синдром раздраженного кишечника.
• Диффузные и гнездные алопеции.
• Дегенеративно-дистрофические болезни суставов позвоночника и конечностей.

Проконсультируйтесь с врачом, имеются противопоказания.

 

Приём физиотерапевта в наших клиниках

Малая Балканская, д. 23 (м. Купчино)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Дунайский проспект, д. 47 (м. Дунайская)

Часы работы:

Ежедневно

с 9.00 до 22.00

Проспект Ударников, д. 19 корп. 1 (м. Ладожская)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Выборгское ш., д. 17 корп. 1 (м. Пр-т Просвещения)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Маршала Захарова, д. 20 (м. Ленинский пр-т)

Часы работы:

Ежедневно
с 9.00 до 22.00

Электрофорез с цинком

АНМО «Ставропольский краевой клинический консультативно-диагностический центр»:

355017, г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное подразделение «Диагностический центр на Западном обходе»:

355029 г. Ставрополь, ул. Западный обход, 64

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-68-89 (факс)

Посмотреть подробнее

Клиника семейного врача:

355017 г. Ставрополь, пр. К. Маркса, 110 (за ЦУМом)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (контактный телефон)

(8652) 31-50-60 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Невинномысский филиал:

357107, г. Невинномысск, ул. Низяева 1

(86554) 95-777, 8-962-400-57-10 (регистратура)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Черкесске :

369000, г. Черкесск, ул. Умара Алиева 31

8(8782) 26-48-02, +7-988-700-81-06 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Элисте :

358000, г. Элиста, ул. Республиканская, 47

8(989) 735-42-07 (контактные телефоны)

Посмотреть подробнее

ЗАО «Краевой клинический диагностический центр»:

355017 г. Ставрополь, ул. Ленина 304

(8652) 951-951, (8652) 35-61-49 (факс)

(8652) 951-951, (8652) 31-51-51 (справочная служба)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Савченко, 38 корп. 9:

355021, г. Ставрополь, ул. Савченко, 38, корп. 9

8 (8652) 316-847 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение на ул. Чехова, 77 :

355000, г. Ставрополь, ул. Чехова, 77

8(8652) 951-943 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Обособленное структурное подразделение в г. Михайловске:

358000, г. Михайловск, ул. Ленина, 201 (в новом жилом районе «Акварель»).

8(988) 099-15-55 (контактный телефон)

Посмотреть подробнее

Физиотерапевтическое лечение в области гинекологии и акушерства

— При каких болезнях физиотерапия является единственным методом лечения?

Я не скажу, что физиотерапия является единственным методом лечения, она считается вспомогательным методом. Наиболее актуальна физиотерапия при спаечном процессе, при воспалении, хронических заболеваниях яичников, придатков, матки, при подготовке к беременности пациенток, имеющих в анамнезе выкидыши, неразвивающиеся беременности.

— Какие положительные эффекты наблюдаются при проведении физиолечения?

Наблюдается улучшение кровотоков в органах. Больше питательных веществ поступают в органы, они лучше снабжаются кислородом, лучше функционируют. Если есть острое воспаление, то после физиотерапии спайки не образуются, уменьшается спайкообразование.

— Какие противопоказания для этого метода?

Онкологические заболевания, кровотечения неясного генеза.

— Какое обследование необходимо перед назначением физиолечения?

Физиолечение подбирается индивидуально. Необходима консультация врача, назначается сдача анализов, например, мазок на флору. Проводится УЗИ, чтобы выбрать тип физиолечения.

— Что включает понятие физиолечение? Какие есть виды?

Физиолечение включает грязелечение, бальнеотерапию (когда используются минеральные воды), но чаще в клиниках используется аппаратная физиотерапия: магнитная терапия, фототерапия, лазерная терапия, электрофорез. Это распространенные методы физиотерапии.

— Есть ли ограничения в возрасте для применения физиотерапии?

Нет, в возрасте ограничений нет. В пожилом возрасте при сенильных атрофических изменениях используют физиотерапию для улучшения состояния, например, при недержаниях мочи.

— Существуют ли четкие показания для каждого метода физиолечения? Есть какие-то различия в назначении того или иного метода?

Чаще всего магнито-лазерная терапия используется при воспалительных заболеваниях. Электрофорез также используется при воспалениях, в послеродовом периоде для профилактики. То есть один метод лечения физиотерапии используется при разных ситуациях, при различных заболеваниях.

— А несколько методов одновременно имеют место быть?

Да, один дополняет другой. Чаще всего комбинируется магнито-лазерная терапия и электрофорез.

— Каков процесс проведения магнито-лазерной терапии и электрофореза при гинекологических заболеваниях?

Магнито-лазерная терапия выполняется двумя способами: полостным (когда во влагалище вводится датчик и действует на влагалище, на шейку матки, на вульву), и вне полостным (когда на поясничную область и живот ставится другой датчик). Существует внутривенно-лазерное облучение крови ВЛОК. Это тоже часто используемая физиотерапия, в том числе в гинекологии.

Электрофорез — это специальный аппарат, имеющий специальные пластины, которые накладываются непосредственно на область применения. Используются различные растворы, обладающие лечебными действиями. Под действием электрического тока растворы проникают в ткани. В гинекологии такие пластины накладываются на низ живота, на поясничную область. При климактерическом синдроме охватывается еще и воротниковая зона.

— Возможны осложнения после проведения магнито-лазерной терапии и электрофореза?

Только в электрофорезе при индивидуальной непереносимости раствора. А в целом, каких-то осложнений не бывает.

— Возможно заранее определить непереносимость с помощью анализов?

Да, это просто. Например, опрашиваем пациента. Если у него уже есть на что-то аллергия, из анамнеза это узнаем. Либо мы делаем контактную пробу: необходимо нанести вещество на кожу, ждать в течение 20 минут проявления негативного воздействия. Если негативной реакции не появилось, процедуру продолжают.

— Можно ли применять физиотерапию при беременности. Если можно, то какие виды?

Можно. Электрофорез магний используется при угрозе прерывания беременности после 8 недель беременности. Также электрофорез используется при токсикозе беременных в первом триместре с целью снятия симптоматики.

— Противопоказания — это сугубо индивидуальный аспект?

Противопоказания для физиолечения во время беременности определяются индивидуально. Если есть отслойка плаценты, началось кровотечение, то физиотерапия не используется. Она применяется при угрозе выкидыша, при болях. При тонусе матки назначают определенные лекарства. Только их не принимают внутрь, не выпивают таблетку, а эти препараты поступают в матку через кожу.

— Комбинировать медикаментозную терапию и физиолечение при беременности возможно?

Возможно, и одно дополняет другое. Комбинированное лечение дает хорошие результаты.

— Существует риск провести много сеансов физиотерапии или неправильно использовать методику?

Именно врач прописывает физиолечение, время воздействия на зону, интенсивность, частоту, периодичность. Некоторые процедуры назначаются ежедневно, некоторые через день или разово. У лечения есть временной промежуток и частота. Магнитотерапия, например, задается с определенной частотой. Если делать бесконтрольно, то это может навредить.

— Какое минимальное и максимальное число сеансов?

Назначается минимум от 10 сеансов. Максимально рассчитывается индивидуально. Врач определяет, насколько процесс благотворно влияет, нужно ли дальше продолжать. Если нужно, то меняется частота или интервал воздействия.

— Вредна ли лазеротерапия для будущего ребенка?

Нет, вредного воздействия лазеротерапии во время беременности не выявлено.

— Какие основные пункты положительного влияния физиотерапии на женщину?

Физиотерапия характеризуется противовоспалительным эффектом, который снимает отечность тканей, болевой синдром. Способствует улучшению кровотоков в органах, тем самым больше питательных веществ поступает в орган и больше кислорода. Улучшается регенерация тканей, восстановление тканей. Улучшается кровоток в эндометрии, особенно у тех, у кого в анамнезе были аборты, выкидыши. Это подготавливает к беременности женщин в плане подготовки слизистой матки. Также используется для подготовки слизистой матки перед ЭКО. При послеоперационном лечении физиотерапия дает бактерицидный эффект.

Физиотерапевт в Саратове в сети клиник «Альфа-Центр Здоровья». Консультация врача физиотерапевта, платные услуги, запись на прием через интернет, цены.

Осмотр (консультация) врача-физиотерапевта820
ИНТЕРФЕРЕНЦТЕРАПИЯ
Воздействие интерференционными токами (1 процедура)356
ГАЛЬВАНИЗАЦИЯ
Гальванизация (1 процедура)380
ФЛЮКТУОРИЗАЦИЯ
Флюктуоризация (1 процедура)345
УЛЬТРАВЫСОКОЧАСТОТНАЯ ТЕРАПИЯ
Ультравысокочастотная терапия (1 процедура)300
СРЕДНЕЧАСТОТНАЯ ЭЛЕКТРОТЕРАПИЯ
Дарсонвализация кожи (1 процедура)380
Внутриполостная дарсонвализация (1 процедура)330
Воздействие электромагнитным излучением дециметрового диапазона (ДМВ) (1 процедура — 15 мин)280
МАГНИТОТЕРАПИЯ
Низкочастотная магнитотерапия (1 процедура)335
УЛЬТРАЗВУКОВАЯ ТЕРАПИЯ
УЗ-терапия (1 процедура)370
ЛЕКАРСТВЕННЫЙ УЛЬТРАФОНОФОРЕЗ
Лекарственный ультрафонофорез (1 процедура)315
Лекарственный ультрафонофорез с 50% раствором анальгина (1 процедура)455
Лекарственный ультрафонофорез с 20% раствором тетрабората натрия в глицерине (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с вазелиновым маслом (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с гелем «Метрогил» (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с гелем «Дип Рилиф» (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с гелем «Долобене» (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с 1% гидрокортизоновой мазью (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с 1% тетрациклиновой мазью (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с мазью «Хондроксид» (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с мазью «Синалар» (1 процедура)365
Лекарственный ультрафонофорез с индометациновой мазью (1 процедура)455
ЛАЗЕРОТЕРАПИЯ
Низкоинтенсивная лазеротерапия (1 процедура)315
МАГНИТОЛАЗЕРОТЕРАПИЯ
Магнитолазеротерапия (1 процедура — 8 мин, аппарат «МИЛТА»)535
Магнитолазеротерапия (1 процедура — 12 мин, аппарат «МИЛТА»)600
Магнитолазеротерапия (1 процедура — 24 мин, аппарат «МИЛТА»)660
АЭРОЗОЛЬТЕРАПИЯ
Аэрозольтерапия с бронхолитином (1 процедура)335
Аэрозольтерапия с настойкой эвкалипта (1 процедура)335
Аэрозоль с минеральной водой «Ессентуки-17» (1 процедура)335
Аэрозольтерапия с беродуалом (1 процедура)335
Аэрозольтерапия с амброксола гидрохлоридом (1 процедура)335
Аэрозольтерапия с 0,9% раствором хлорида натрия (1 процедура)335
ЛЕКАРСТВЕННЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ
Электрофорез (1 процедура)300
Электрофорез с 3% раствором йодида калия (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором фосфата натрия (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором сульфата магния (1 процедура)325
Электрофорез с 2% раствором сульфата меди (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором сульфата меди (1 процедура)325
Электрофорез с 2% раствором сульфата цинка (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором хлорида кальция (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором хлорида натрия (1 процедура)325
Электрофорез с 2% раствором хлорида натрия (1 процедура)325
Электрофорез с 3% раствором бромида натрия (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором метамизола (1 процедура)325
Электрофорез с 2% раствором метамизола (1 процедура)325
Электрофорез с 1% раствором никотиновой кислоты (1 процедура)325
Электрофорез с 0,1% раствором прозерина (1 процедура)325
Электрофорез с 2,4% раствором эуфиллина (1 процедура)325
Электрофорез с 3% раствором новокаина (1 процедура)325
Электрофорез с экстрактом алоэ (1:3) (1 процедура)355
Электрофорез с лидазой (1 процедура)355
Электрофорез с ДМСО (1 процедура)355
Электрофорез с 1% раствором димедрола (1 процедура)325
Электрофорез с 1% раствором дибазола (1 процедура)325
Электрофорез с 0,5% раствором папаверина (1 процедура)325
Электрофорез с 2% раствором тиамина бромида (1 процедура)325
Электрофорез с 5% раствором пиридоксина гидрохлорида (1 процедура)325
Электрофорез с 10% раствором ихтиола (1 процедура)325
Электрофорез с 3% раствором тиосульфата натрия (1 процедура)325
Электрофорез (4 электрода, 1 процедура)385
АМПЛИПУЛЬСТЕРАПИЯ
Амплипульстерапия (1 процедура)315
Амплипульстерапия с 3% раствором йодида калия (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором фосфата натрия (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором сульфата магния (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2% раствором сульфата меди (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором сульфата меди (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2% раствором сульфата цинка (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором хлорида кальция (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором хлорида натрия (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2% раствором хлорида натрия (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 3% раствором бромида натрия (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2% раствором метамизола (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 1% раствором никотиновой кислоты (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 0,1% раствором прозерина (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2,4% раствором эуфиллина (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 3% раствором новокаина (1 процедура)395
Амплипульстерапия с экстрактом алоэ (1:3) (1 процедура)395
Амплипульстерапия с лидазой (1 процедура)395
Амплипульстерапия с ДМСО (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 1% раствором димедрола (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 1 % раствором дибазола (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 0,5% раствором папаверина (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 2% раствором тиамина бромида (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 5% раствором пиридоксина гидрохлорида (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 10% раствором ихтиола (1 процедура)395
Амплипульстерапия с 3% раствором тиосульфата натрия (1 процедура)395
ФОТОТЕРАПИЯ
Фототерапия кожи (фототерапия тубусная, 1 процедура)275
МИОЭЛЕКТРОСТИМУЛЯЦИЯ
Электростимуляция мышц (1 процедура)365
УЛЬТРАФИОЛЕТОВОЕ ОБЛУЧЕНИЕ
Коротковолновое ультрафиолетовое облучение (КУФ) 1 процедура230
МАГНИТОТЕРМОТЕРАПИЯ
Магнитотермотерапия (1 процедура)565
КРИОТЕРАПИЯ
Криотерапия локальная875

Notification information 0356300009714000037

Full auction name (contract subject): Кальция хлорид 5%100мл для электрофореза Цинка сульфат 5% 100мл раствор для электрофореза Калия иодид 3% 200мл раствор для электрофореза Уксусная кислота 3% 30мл раствор для кольпоскопии Кальция хлорид 2%100мл раствор для электрофореза Перекись водорода 30% 300 мл раствор для обработки инструментов Магнезии сульфат 2% 200мл раствор для электрофореза Йод 0,1+Калия иодид 0,2+ вода дистиллированная 30мл раствор для кольпоскопии Натрия бромид 5% 100мл раствор для электрофореза Новокаин 2% 200мл для электрофореза Анальгин 5% 200мл+Димексид 200мл раствор для электрофореза Калия иодид 5% 200мл раствор для электрофореза Магнезии сульфат 5% 200мл раствор для электрофореза

The name of the product, works, services: Кальция хлорид 5%100мл для электрофореза
Цинка сульфат 5% 100мл раствор для электрофореза
Калия иодид 3% 200мл раствор для электрофореза
Уксусная кислота 3% 30мл раствор для кольпоскопии
Кальция хлорид 2%100мл раствор для электрофореза
Перекись водорода 30% 300 мл раствор для обработки инструментов
Магнезии сульфат 2% 200мл раствор для электрофореза
Йод 0,1+Калия иодид 0,2+ вода дистиллированная 30мл раствор для кольпоскопии
Натрия бромид 5% 100мл раствор для электрофореза
Новокаин 2% 200мл для электрофореза
Анальгин 5% 200мл+Димексид 200мл раствор для электрофореза
Калия иодид 5% 200мл раствор для электрофореза
Магнезии сульфат 5% 200мл раствор для электрофореза

Classification of product, works, services: Хлорид кальция жидкий
Сульфат цинка (купорос цинковый)
Йодид калия
Кислота уксусная
Хлорид кальция жидкий
Пероксид водорода (перекись водорода)
Сульфат магния
Йодид калия
Бромид натрия
Новокаин
Анальгин
Йодид калия
Сульфат магния

Quantity of supplied product, works, services:

Location of delivery of products, works, services: Пермский край, г. Чайковский, с. Фоки, ул. Кирова, 124

Term of delivery of products, works, services: Три раза в месяц, в течение 2014 года партиями по заявке

Bid security: 3 768 руб

Экстемпоральные лекарственные формы ГОСАПТЕК | Сеть аптек ГОСАПТЕКА

Лекарственная формаЕд. изм
Анальгин 2%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Анальгин 3%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Анальгин 5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Анестезин 8,0, масла подсолнечного 80,0 наружн.   д/анестезии в стом. каб.фл.
Аскорбиновая к-та 1%-200мл р-р для э/форезафл.
Ацетилсалициловая к-та 0,33% р-р -200мл. Димексид 40,0 наружнофл.
Ацетилсалициловая к-та 0,33%-100мл р-р для э/форезафл.
Ацетилсалициловая к-та 0,33%-200мл раствор д/электрофорезафл.
Ацетилсалициловая к-та р-р 5% с Димексидом 50%-100мл р-р для физиолеченияфл.
Борная кислота 50,0 пор. для присыпания ранфл.
Вазелиновое масло 10,0 Стерильно! для катетеровфл.
Вазелиновое масло 30.0 Стерильно!,д/обработки кожифл.
Вода очищенная 100мл р- р Стерильно, для разведения смесифл.
Вода очищенная 10мл р-р Стерильно! д/обр. лица новорожд.фл.
Вода очищенная 10мл р-р Стерильно! д/питья новорожд.фл.
Вода очищенная 200мл Стерильно! р-р д/разведения смеси.фл.
Вода очищенная 300мл р-р Стерильно! для разведения смесифл.
Вода очищенная 30мл р-р Стерильно! для питья новорожд.фл.
Вода очищенная 400мл Стерильно! р-р для обраб. кувезовфл.
Вода очищенная 50мл р-р Стерильно!для обр. новорожденныхфл.
Вода очищенная 50мл р-р Стерильно!для развед. смесифл.
Вода очищенная 90мл Стерильно р-р для разведения смесифл.
Глюкоза 5%-10мл р-р Стерильно! д/зондового вскармливан.фл.
Глюкоза 75,0 пор. внутр., д/глюкозотолерантн. тестафл.
Дибазол 1%-100мл р-р д/физиолеченияфл.
Дибазол 1%-200мл р-р для э/форезафл.
Димедрол 0,25 кальция хлорида 0,25 вода очищ. 100мл р-рфл.
Димедрол 0,5%-200мл р-р для э/форезафл.
Димедрол 1%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Димедрол 1%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Ихтиол 0,3,Вазелин 7,7, Ланолин 1,4, Вода оч. 0,6 наружнофл.
Йод 0,25 Калия иодид 0,5 Воды 25мл ( р-р Люголя) д/лаб иссл.фл.
Йод 0,3 Калия иодид 0,6 Вода очищ. 100мл .Для кольпоскопиифл.
Йод 0,9 Калия иодид 1,8 Воды очищ.30мл (р-р Люголя) д/кольпоскопиифл.
Йод 1,0 Калия иодид 2,0 Вода очищенная 100 мл, р-р   наружн. д/обраб. слизистойфл.
Йод 1,0 Калия иодид 2,0 Воды оч 100 мл, р-р наружн. д/гинек. процед.(кольпоск.)фл.
Йод 1,0 Калия иодид 2,0 Воды очищ. 100 мл, р-р для лаборатории (реактив)фл.
Йод 1,0Калия иодид 2,0 Воды очищ. 300мл р-р Для кольпоскопиифл.
Йод 2,0 Калия иодид 4,0 Воды очищ. 200 мл, р-р для кольпоскопии)фл.
Йод 4,0 Калия иодид 8,0 Воды 400 мл (р-р Люголя 1%), д/лабораториифл.
Калия иодид 2%-100мл р-р для э/форезафл.
Калия иодид 3%-100мл р-р для э/форезафл.
Калия иодид 3%-10мл р-р Стерильно! Глазные каплифл.
Калия иодид 3%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Калия иодид 3%-250мл р-р д/электрофорезафл.
Калия иодид 5%-10мл р-р для э/форезафл.
Калия иодид р-р 1% — 100млфл.
Калия иодид р-р 2% — 100млфл.
Калия иодид р-р 2% — 200млфл.
Калия иодид р-р 3% — 200млфл.
Калия перманганат 0,05%-100мл р-р для аптечки (пром. слизист.)фл.
Калия перманганат 0,05%-200мл р-р д/промыв. слух. проходафл.
Калия перманганат 0,05%-25мл р-р для обр. слизистой ( в аптечку)фл.
Калия перманганат 0,05%-30мл р-р д/ обр.слизист.(аптечки по ВИЧ)фл.
Калия перманганат 0,05%-50мл р-р для аптечки (обр. слизистой)фл.
Калия перманганат 0,1%-100мл р-р д/демеркуризациифл.
Калия перманганат 0,2%-50мл р-р д/утилизации ртутифл.
Калия перманганат 1%-30мл р-р Для лечения ранфл.
Калия перманганат 2%-400мл хлористов. к-та 8,3% 2мл р-р д-демеркуризациифл.
Калия перманганат 2%-400мл Для промыв. ушн. рак.фл.
Калия перманганат 3%-400мл Для обработки троф. язвфл.
Калия перманганат 5%-100мл   р-р для обработки пролежнейфл.
Калия перманганат 5%-100мл р-р Д/обр. ран, кожифл.
Калия перманганат 5%-100мл р-р Для обработки промежностифл.
Калия перманганат 5%-100мл р-р Для обработки шейки маткифл.
Калия перманганат 5%-10мл р-р для обработки ранфл.
Калия перманганат 5%-10мл р-р Асептически! для обработки пуповфл.
Калия перманганат 5%-200мл р-р Для обработки швовфл.
Калия перманганат 5%-200мл р-р Для обработки швов асептическифл.
Калия перманганат 5%-30мл р-р Для обработки пролежнейфл.
Калия перманганат 5%-50мл р-р Для обработки ранфл.
Калия перманганат 5%-50мл р-р Для обработки швовфл.
Калия перманганат 5%-50мл р-р Для обработки шейки маткифл.
Калия перманганат 5%-5мл р-р Асептически! д/обр. пупочной ранкифл.
Калия хлорид 1,0 № 60 порошкифл.
Калия хлорид 7,5%-100мл р-р Стерильно! в/в капельнофл.
Калия хлорид 7,5%-200мл р-р Стерильно! в/в капельнофл.
Калия хлорид 7,5%-50мл р-р Стерильно! в/в капельнофл.
Кальция хлорид 10%-50мл р-р Стерильно! в/вфл.
Кальция хлорид 10%-20мл р-р для лабораториифл.
Кальция хлорид 2%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Кальция хлорид 2%-200мл р-р для э/форезафл.
Кальция хлорид 3% -400мл р-р д/электрофорезафл.
Кальция хлорид 3%-100мл р-р для э/форезафл.
Кальция хлорид 3%-200мл р-р для э/форезафл.
Кальция хлорид 5%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Кальция хлорид 5%-200мл р-р для э/форезафл.
Кальция хлорид 5%-300мл р-р для э/форезафл.
Кальция хлорид 5%-400мл р-р для э/форезафл.
Колларгол 1%-200мл р-р д/инстилляции асептич.фл.
Колларгол 2%-100мл р-р Асептически! для леч. мочевого пузыряфл.
Колларгол 2,0 Глицерин 1.0. Вода очищ. 20кап. наружное р(д/изм. внутригл. давл.)фл.
Колларгол 2,0 Глицерин 2,0. Вода очищ. 30кап. наружное(д/изм. внутригл. давл.)фл.
Колларгол 2,0 Глицерин 20кап. Вода очищ. 10кап. наружное(д/изм. внутригл. давл.)фл.
Колларгол 2,0 Глицерин 20кап. Вода очищ. 20кап. р/р для   изм. внутригл. давл .фл.
Колларгол 2,0 Глицерин 20кап. Вода очищ. 20кап. р/р для   смаз. площадки тономет.фл.
Коффеин-бензоат натрия 1%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Коффеин-бензоат натрия 1%, Натрия гидрокарбоната 5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Коффеин-натрия бензоат р-р 1%-100млфл.
Ксероформ 10,0 порошок(трибромфенолят висмута и висмута оксид) д/ обработки ранфл.
Ксероформ 5,0 пор. для обработки ранфл.
Магния сульфат 2%-100мл р-р для э/форезафл.
Магния сульфат 2%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Магния сульфат 3%-100мл р-р для э/форезафл.
Магния сульфат 3%-300мл р-р д/электрофорезафл.
Магния сульфат 3%-400мл р-р д/электрофорезафл.
Магния сульфат 33%-300мл р-р Для зондированияфл.
Магния сульфат 33%-400мл р-р Для внутреннего прим.фл.
Магния сульфат 33%-400мл р-р Для зондированияфл.
Магния сульфат 5%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Магния сульфат 5%-400мл р-р д/электрофорезафл.
Магния сульфат р-р 1%-100млфл.
Мазь адр.г/хл8кап,1димедрол 0,06 новокаин 0,6вазелин.40,0 ланолин б/в28,0фл.
Мазь Анальгина 1%-100,0 д/перевязокфл.
Мазь анестезин 2,0димедрол 0,6 ментол0,2вазелин.30,0 ланолин б/в21,0вода9,0фл.
Мазь Анестезиновая 1%-100,0 д/перевязокфл.
Мазь в нос: адреналина г/х 0,1% 10к ментол 0,1 ланолинб/в 0,7 вода очищ. 0,3 вазфл.
Мазь вазелин 50,0 салиц. к-та 2,5 сера 5,0фл.
Мазь вазелин 50,0 салиц. к-та 5,0 сера 5,0фл.
Мазь Димедрол 1%-100,0 Для обработки кожи, ранфл.
Мазь ихтиол 0,3вазелин 7,7 ланолин 1,4 вода оч. 0,6фл.
Мазь Ихтиоловая 3%-10,0 Наружно ( повязка на веко)фл.
Мазь окись цинка0,5 ихтиол0,2вазелин7,8ланолин1,4вода0,6фл.
Мазь фурацилина 0,2% — 100,0 наружно д/обр. ранфл.
Мазь:анальгина р-р 50%-2мл,сусп.гидрокортизона 20мл,ланолина 45,0,вазелина 10,0фл.
Меди сульфат 3%-300мл р-р д/электрофорезафл.
Меди сульфат р-р 2%-100млфл.
Меди сульфат р-р 3% — 200 млфл.
Натрия бромид 2%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия бромид 2%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия бромид 2,0 н-ка валер. 4,0 н-ка пустырника 2,0 магн.сульф.2,0 вода 200млфл.
Натрия бромид 3%-100мл р-р для э/форезафл.
Натрия бромид 3%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия бромид 3%-250мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия бромид 3%-400мл р-р для э/форезафл.
Натрия бромид 3,0 н-ка валер. 4,0 н-ка пустырника 3,0 магн.сульф.3,0 вода 200млфл.
Натрия бромид 4,0 н-ка валер. 6,0 н-ка пустырника 5,0 магн.сульф.4,0 вода 200млфл.
Натрия бромид 5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия бромид р-р 1% — 200млфл.
Натрия бромид р-р 1% — 50млфл.
Натрия бромид р-р 2% — 200млфл.
Натрия бромид р-р 2%-100млфл.
Натрия гидрок. 0,5 глицерин 5,0 вода очищ. 5,0фл.
Натрия гидрокарбонат р-р 1% — 30млфл.
Натрия гидрокарбонат 2%-100мл р-р д/орб шейки маткифл.
Натрия гидрокарбонат 2%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия гидрокарбонат 4%-190мл р-р Стерильно! в/в капельнофл.
Натрия гидрокарбонат 4%-400мл р-р для зондированияфл.
Натрия гидрокарбонат 4%-50мл р-р Стерильно! в/в капельнофл.
Натрия гидрокарбонат 8%-200мл р-р д/обр. влагалищафл.
Натрия тиосульфат р-р 1%-100млфл.
Натрия тиосульфат р-р 5% — 200млфл.
Натрия тиосульфат 5%-100 мл р-р д/электрофарезафл.
Натрия тиосульфат 5%-400 мл р-р д/электрофорезафл.
Натрия хлорид 10%-100мл р-р Стерильно! для перевязок(обр. ран)фл.
Натрия хлорид 10%-190мл р-р Стерильно! в/веннофл.
Натрия хлорид 10%-200мл р-р Стерильно! для перевязок(обр.ран)фл.
Натрия хлорид 10%-200мл раствор для клизм стерильнофл.
Натрия хлорид 10%-400мл раствор для клизмфл.
Натрия хлорид 5,85%-100мл раствор Стерильно! внутривеннофл.
Натрия хлорид 5,85%-100мл раствор Стерильно! для обр. ранфл.
Натрия хлорид 5,85%-200мл р-р Стерильно! внутривенно, капельнофл.
Натрия хлорид 5,85%-200мл р-р Стерильно! д/обр. ранфл.
Натрия хлорид 5,85%-50мл р-р Стерильно! внутривеннофл.
Натрия хлорид р-р 5% 50млфл.
Натрия цитрат 5%-50мл. р-р для анализовфл.
Никотиновая к-та 0,1%-200мл р-р для э/форезафл.
Никотиновая к-та 0,5%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Никотиновая к-та 1%-100мл р-р для э/форезафл.
Никотиновая к-та 1%-200мл р-р для э/форезафл.
Новокаин 1%-100мл р-р д/физиолеченияфл.
Новокаин 2%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 2%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 2%-250мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 2%-400мл р-р д/обраб. полости ртафл.
Новокаин 2%-400мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 3%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 5%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Новокаин 5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Папаверина г/хл 0,1%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Папаверина г/хл 0,1%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Папаверина г/хл 0,5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Папаверина г/хл 1%-100мл р-р д/электрофорезафл.
Папаверина г/хл 1%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Перекись водорода 0,1%-400мл р-р д/пром. ушн. раковинфл.
Перекись водорода 0,1%-400мл р-р д/промывания   миндалинфл.
Перекись водорода 3%-10мл р-р Асептически! для обработки пупкафл.
Перекись водорода 3%-190мл р-р д/обр. ранфл.
Перекись водорода 30%-400мл р-р д/обработки инструментарияфл.
Перекись водорода 33%-400мл р-р д/обработки инструментарияфл.
Перекись водорода 4% — 250мл р-р д/обработки инструментовфл.
Перекись водорода 6%-200мл р-р для обработки инструментовфл.
Перекись водорода 6%-300мл р-р д/обработки инструментарияфл.
Перекись водорода 6%-400мл р-р д/обработки инструментовфл.
Подсолнечное масло 10,0 Стерильно! д/обработки кожи новорожд.фл.
Подсолнечное масло 25,0 Стерильно! для обраб. кожи новорожд.фл.
Подсолнечное масло 50,0 Стерильно! для обработки кожифл.
Протаргол 2%-10мл р-р Асептически! капли в носфл.
Сера 7,0, Стрептоцид 7,0, сп. Салиц. 50,0, р-р к-ты Борной 2%-50,0 наружнофл.
Уксусная к-та 1% 50мл р-р д/обр. шкафов,столовфл.
Уксусная к-та 1%-200мл р-р для обработки поверх.фл.
Уксусная к-та 10% 50мл р-р д/обр. педикулезафл.
Уксусная к-та 2%-300мл р-р Для обработки стенфл.
Уксусная к-та 3%-100мл р-р д/анализа (кольпоскопии)фл.
Уксусная к-та 3%-200мл р-р Для анализа кровифл.
Уксусная к-та 3%-200мл р-р Для кольпоскопиифл.
Уксусная к-та 3%-300мл р-р Для анализовфл.
Уксусная к-та 3%-50мл р-р д/кольпоскопии (обр. слизистой)фл.
Уксусная к-та 3%-50мл р-р д/обр. оборудов.фл.
Уксусная к-та 3%-50мл р-р д/физиолеченияфл.
Уксусная к-та 30%-300 мл р-р для обработки стенфл.
Уксусная к-та 30%-400 мл р-р для обработки стенфл.
Уксусная к-та 5%-100мл р-р д/обр. волос. части головыфл.
Фенолфталеин 1%-100мл р-р спиртовой для пробфл.
Фенолфталеин 1%-50мл р-р спиртовой для пробфл.
Формалин 10%-100мл р-р д/биопсийного материалафл.
Формалин 10%-400мл р-р д/биопс. матер.фл.
Формалин 10%-400мл р-р д/консерв. последовфл.
Формалин 10%-50мл р-р для хранения биопсийного материалафл.
Формалин 20%-100мл р-р для биопсийного материалафл.
Формалин 40%-30мл р-р для стом. д/замеш. пастыфл.
Формалин 40%-50мл для стом. д/замеш. пастыфл.
Фурацилин ( нитрофурал) 0,01%-100мл р-р Стерильно ! д/перевязокфл.
Фурацилин 0,01% р-р -400мл, натрия хлорид 3,6 стерильнофл.
Фурацилин 0,01%-10мл р-р Стерильно ! для обработки   кожи вокруг глазфл.
Фурацилин 0,01%-200мл р-р Стерильно ! д/перевязок (леч. ран)фл.
Фурацилин 0,01%-200мл р-р Стерильно ! д/санации лор органовфл.
Фурацилин 0,01%-250мл р-р Стерильно ! д/обработки кожифл.
Фурацилин 0,01%-400мл р-р для полоскания зевафл.
Фурацилин 0,01%-400мл р-р Стерильно ! для обработки ран, кожифл.
Фурацилин 0,01%-400мл р-р Стерильно ! для перевязокфл.
Фурацилин 0,02%-400мл р-р для обработки слизист.зевафл.
Фурацилин 0,02%-400мл р-р для полоскания горлафл.
Хлоргексидина 0,02%-100мл р-р Стерильно! д/промывки каналовфл.
Хлоргексидина 0,02%-400мл р-р Стерильно!д/обработки ранфл.
Хлоргексидина 0,05%-400 мл р-р Стерильно для обработки ран,полостейфл.
Хлоргексидина биглюконат 0,02%-10мл р-р Стерильно! д/обр. слизист.фл.
Хлоргексидина биглюконат 0,05%-200мл р-р Стерильно! Для перевязокфл.
Хлоргексидина биглюконат 0,2%-100мл р-р Асептически! для обработки ранфл.
Хлоргексидина биглюконат 0,5%-100мл р-р Асептически!   д/обработки ранфл.
Хлоргексидина биглюконат 0,5%-200мл р-р спиртовой Для обработки рукфл.
Хлоргексидина биглюконат 0,5%-400мл р-р спиртовой Для   обр. рукфл.
Хлоргексидина биглюконат 2% 100мл р-р д/обраб. каналов зубафл.
Хлористоводородная к-та 0,1%-200мл р-р д/разведения лидазыфл.
Хлористоводородная к-та 0,1%-300мл р-р д/электрофорезафл.
Цинка окись 5,0, Димед. 0,5,Ланол. 17,5, Анест. 1,0,Н-ка пуст. 10,0 Вода оч.7,5упак
Цинка сульфат р-р 2% — 100млфл.
Цинка сульфат р-р 5 % — 300млфл.
Цинка сульфат р-р 5% — 100млфл.
Цинка сульфат 1%-100мл р-р для электрофарезафл.
Цинка сульфат 2%-100мл р-р для физиолеченияфл.
Цинка сульфат 2%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Цинка сульфат 2%-300мл р-р д/электрофорезафл.
Эуфиллин 0,5 %- 50 мл р-р для электрофорезафл.
Эуфиллин 0,5%-100мл р-р для э/форезафл.
Эуфиллин 0,5%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Эуфиллин 0,5%-400мл р-р для э/форезафл.
Эуфиллин 1%-200мл р-р д/электрофорезафл.
Эуфиллина р-р 1%-150мл.фл.
Эуфиллина р-р 1%-200мл.фл.
Эуфиллина р-р 1%-250мл.фл.

Электрофорез — Отделение физиотерапии Класс Клиник в Омске

Электрофорез – это воздействие на организм постоянным электрическим током в сочетании с введением через кожу лекарственных веществ.

Электрофорез является одним из наиболее эффективных методов лечения различнызх заболеваний. Он является одним из самых выжных этапов комплексной терапии большинства болезней. И позволяет в короткие сроки избавиться не только от симптомов, но и устранить ее первопричину.

Как действует электрофорез:

Во время процедуры в организм пациента вводится высокая концентрация лекарственного препарата, который с помощью постоянного тока поступает в самый очаг болезни через кожу. При этом кожные покровы не повреждаются, сохраняя свою целостность. Прокладка, смоченная раствором лекарства, накладывается на тело пациента. А сверху – защитная прокладка, через которую пропускают электрический ток. Ионы лекарства проникают через слизистые оболочки в организм, и равномерно распределяются в клетках и межклеточной жидкости. Благодаря электрофорезу, лекарственный препарат доставляется через кровь и лимфу к любым органам и тканям.

Преимущества лечения электрофорезом:

  • снижение интенсивности воспалительного процесса
  • снятие болевого синдрома и отеков
  • ускорение регенерации и микроциркуляции тканей
  • стимуляция выработки биологически активных веществ (витаминов, микроэлементов, гормонов)
  • доставка лекарств в низких дозах, комфортно и безболезненно в нужную область тела, при этом воздействие на другие органы, среды организма не оказывается
  • длительный эффект воздействия за счет накопления и медленного поступления лекарственного препарата в кровоток

При электрофорезе активные лекарственные вещества максимально накапливаются в патологическом очаге, т. к. прокладка с медикаментом накладывается непосредственно на проблемное место, и в несколько раз превышают дозу, вводимую инъекционно или перорально. Поэтому эффективность лекарственного электрофореза достаточно высока. Минуя желудочно-кишечный тракт, фармакопрепарат практически не вызывает побочных действий на организм.

Показания к лечению:

  • Заболевания мочеполовой системы у мужчин (цистит, уретрит, простатит)
  • Заболевания мочеполовой системы у женщин (аднексит, эндометрит, цервицит, вагинит, эрозия шейки матки, миома)
  • Восстановление мышц тазового дна после родов
  • Заболевания нервной системы (неврит, невралгия, радикулит, мигрень, неврозы, грыжы, бессонница)
  • Заболевания опорно-двигательной системы (остеохондроз, артрит, спондилез)
  • Заболевания эндокринной системы (сахарный диабет)
  • Кожные заболевания (акне, себорея, рубцы, псориаз, дерматит, фурункулез)

В медицинском центре Класс Клиник процедуры электрофореза делают с различными лекарствеными препаратами: лидаза, полиминеральные препараты, солевой раствор Рапа, органо-минеральные препараты, цинк, медь, йодистый калий, Кортексин, Карипаин.

Перед курсом процедур обязательно проводится подробная консультация профильного врача (невролога, гинеколога, дерматолога, уролога), по результатам которой доктор назначаети интенсивный курс лечения с учетом особенностей течения заболевания, пола, возраста, образа жизни, сопутсвующих заболеваний пациента.

Запишитесь на прием онлайн в удобное для вас время.

Данные не передаются третьим лицам и служат только для записи на прием

Отрицательное окрашивание цинк-имидазолом нуклеиновых кислот, разделенных гель-электрофорезом

Соли цинка и имидазола применяли для обнаружения нуклеиновых кислот на полиакриламиде агарозных гелей. После электрофореза полиакриламидные гели промывают дистиллированной водой для удаления большей части остаточных реагентов для электрофореза, затем инкубируют в 10 мМ сульфате цинка в течение 10 минут и затем погружают в 0,2 М имидазол на 3 минуты.В результате соли цинка осаждаются на поверхности геля, за исключением позиций, занимаемых нуклеиновыми кислотами, которые выглядят как прозрачные бесцветные полосы. Окрашивание нуклеиновых кислот на агарозных гелях может быть выполнено путем инкубации в 40 мМ сульфате цинка в течение 10 минут с последующим погружением в 0,2 М имидазол на 5 минут для образования темно-белого фона. После замачивания в 2 М имидазоле в течение 45 минут имидазол-индуцированный цинковый осадок удаляется из положений, в которых расположены нуклеиновые кислоты, что приводит к негативному изображению бесцветных и прозрачных полос нуклеиновых кислот на белом фоне.Чувствительность этого красителя составляет от 5 до 7 нг / полосу для небольшой (от 1 до 0,2 т.п.н.) ДНК, от 7,8 до 13 нг / полосу для различных 22-основных олигонуклеотидов, от 62 до 125 нг / полосу для большой (от 20 до 2 т.п.н.) ДНК и составляет 1 микрограмм / полосу для РНК моноцитов периферической крови человека. После хелатирования цинка с ЭДТА нуклеиновые кислоты могут быть количественно извлечены из геля. Принципиальное преимущество этого метода перед окрашиванием бромистым этидием очевидно для препаративных целей. Использование цинк-имидазола для обнаружения очищенного pBACIB.1 (2,8 т.п.н.) плазмидной ДНК и ДНК фрагмента одноцепочечного Fv антитела против HBsAg (0,7 т.п.н.) с последующим элюированием из срезов геля, лигированием и трансформацией компетентных клеток E. coli XL-1 Blue, количество трансформантов заметно увеличивалось от 280 (получено обычным окрашиванием бромистым этидием плюс УФ-облучение при 312 нм) до 10000.

методов окрашивания протеиновых гелей | Thermo Fisher Scientific

После разделения белков с помощью электрофореза их можно визуализировать с помощью различных методов определения в геле, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки.За последние несколько десятилетий потребность в улучшенной чувствительности для образцов небольшого размера и совместимости с последующими приложениями и приборами для обнаружения стимулировала разработку нескольких основных методов окрашивания. Здесь мы обсуждаем общие принципы окрашивания белкового геля и описываем несколько методов окрашивания.

Изучите пятна Кумасси Изучите пятна серебра



Общие принципы окрашивания гелем

Чтобы сделать белки видимыми, с белками в геле может быть проведена специфическая для белков химическая реакция связывания красителя или окрашивания.В зависимости от конкретного химического состава красителя необходимы различные шаги для удержания или фиксации белков в гелевой матрице и для облегчения необходимой химической реакции. Все этапы выполняются в растворе, то есть с гелем, подвешенным на поддоне, заполненном тем или иным жидким реагентом. Как правило, белки все еще связаны с анионным детергентом (SDS), и вся гелевая матрица насыщается в рабочем буфере после электрофореза.

Учитывая общие ограничения этого формата, большинство методов окрашивания включают некоторые версии тех же общих этапов инкубации:

  • Промывка водой для удаления буферов для электрофореза из гелевой матрицы
  • Промывка кислотой или спиртом для кондиционирования или фиксации геля для ограничения диффузии белковых полос из матрицы
  • Обработка окрашивающим реагентом, чтобы позволить красителю или химическому веществу диффундировать в гель и связываться с белками (или реагировать с ними)
  • Обесцвечивание для удаления избытка красителя с фона гелевой матрицы

В зависимости от конкретного метода окрашивания, две или более из этих функций могут быть выполнены за один шаг.Например, краситель, составленный в кислотном буфере, может эффективно фиксировать и окрашивать за один этап. И наоборот, некоторые функции требуют нескольких шагов. Например, окрашивание серебром требует как стадии окрашивающего реагента, так и стадии проявителя для получения окрашенного продукта реакции.

Пятна от красителя кумасси

Наиболее распространенный метод определения белка в геле — окрашивание красителем Кумасси. Для этих красителей используется либо форма красителя G-250 («коллоидная»), либо форма R-250.Коллоидные красители кумасси могут быть составлены для эффективного окрашивания белков в течение 1 часа и требуют только воды (без метанола или уксусной кислоты) для обесцвечивания.

Пример геля, окрашенного красителем Simply Blue Safe Coomassie Stain. Образцы разделяли на геле NuPAGE 4-12% Bis-Tris и окрашивали SimplyBlue SafeStain.

  • Дорожка 1: 6 мкг смеси белков
  • Дорожка 2: 1 мкг кроличьего IgG
  • Дорожка 3: 1 мкг восстановленного БСА
  • Дорожка 4: 5 мкг E.coli лизат
  • Дорожка 5: 20 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 6: 10 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 7: 7 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 8: 3 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 9, 10: Mark12 неокрашенный стандартный
Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание Кумасси 5-25 нг 10-135 мин Visual Совместимость с масс-спектрометрией (МС) и секвенированием, вестерн-блоттинг (только нефиксирующие методы)
  • Быстрые и простые протоколы окрашивания
  • Обратимый: без постоянной химической модификации

В кислых условиях краситель Кумасси связывается с основными и гидрофобными остатками протеина. eins, меняющий цвет от тусклого красновато-коричневого до насыщенного синего.Как и все методы окрашивания, окрашивание кумасси выявляет одни белки лучше, чем другие, в зависимости от химии действия и различий в составе белков. Таким образом, окрашивание кумасси может обнаружить всего 8–10 нг на полосу для некоторых белков и 25 нг на полосу для большинства белков.

Окрашивание красителем Кумасси особенно удобно, потому что оно включает в себя один готовый к использованию реагент и не приводит к постоянному химическому изменению целевых белков. Первоначальная промывка водой необходима для удаления остаточного SDS, который препятствует связыванию красителя.Затем добавляют окрашивающий реагент, обычно примерно на 1 час; наконец, стадия обесцвечивания водой или простым метанолом: уксусной кислотой используется для вымывания избытка несвязанного красителя с гелевой матрицы. Поскольку не происходит химической модификации, полосы вырезанных белков могут быть полностью обесцвечены, а белки извлечены для анализа с помощью масс-спектрометрии или секвенирования.

Исследовать: Пятна Кумасси

Окрашивание серебром

Окрашивание серебром — наиболее чувствительный колориметрический метод определения общего белка.Этот метод включает осаждение металлического серебра на поверхность геля в местах расположения полос белка. Ионы серебра (из нитрата серебра в окрашивающем реагенте) взаимодействуют и связываются с определенными функциональными группами белка. Наиболее сильные взаимодействия происходят с группами карбоновых кислот (Asp и Glu), имидазолом (His), сульфгидрилами (Cys) и аминами (Lys). Различные реагенты-сенсибилизаторы и усилители необходимы для контроля специфичности и эффективности связывания ионов серебра с белками и эффективного преобразования (развития) связанного серебра в металлическое серебро.Процесс проявления практически такой же, как и для фотопленки: ионы серебра восстанавливаются до металлического серебра, в результате чего получается коричнево-черный цвет.

Пример геля, окрашенного с помощью SilverXpress Silver Staining Kit. Образцы разделяли на NuPAGE 4–12% Bis-Tris Protein Gel и окрашивали с помощью SilverXpress Kit.

  • Дорожки 1–5: Неокрашенный стандарт Invitrogen Mark12 (смесь 12 очищенных белков), серийные 2-кратные разведения в диапазоне от 1: 4 до 1:64
  • Дорожка 6: 1.6 нг БСА
  • Дорожка 7: 0,8 нг БСА
  • Дорожка 8: Лизат E. coli , разведенный 1:20
  • Дорожка 9: Лизат E. coli , разведенный 1:80
  • Дорожка 10: копия дорожки 1
Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание серебром 0.25-0,5 нг 30-120 мин Visual Некоторые составы совместимы с MS Самые низкие пределы обнаружения, не требующие специального оборудования

Протоколы окрашивания серебром требуют нескольких этапов, на которые влияет качество реагента, а также время инкубации и толщина геля. Преимущество имеющихся в продаже наборов для окрашивания серебром заключается в том, что составы и протоколы оптимизированы и последовательно производятся, что помогает обеспечить максимальную согласованность результатов от эксперимента к эксперименту.Наборы с оптимизированными протоколами надежны и просты в использовании, обнаруживая менее 0,5 нг белка в типичных гелях.

При окрашивании серебром в качестве усилителя используется глутаральдегид или формальдегид. Эти реагенты могут вызывать химическое сшивание белков в гелевой матрице, ограничивая совместимость с методами обесцвечивания и элюирования для анализа с помощью масс-спектрометрии (МС). Таким образом, оптимизация чувствительности по сравнению с возможностью восстановления белка имеет решающее значение при использовании окрашивания серебром как части рабочего процесса МС.

Препараты для окрашивания серебром могут быть изготовлены так, чтобы полосы белка окрашивались в черный, сине-коричневый, красный или желтый цвет, в зависимости от их заряда и других характеристик. Это особенно полезно для различения перекрывающихся пятен на 2D-гелях.

Исследуйте Серебряные пятна

Окрашивание флуоресцентным красителем

Недавние улучшения в приборах флуоресцентной визуализации и флуоресцентных приложениях привели к большему спросу на флуоресцентные красители. В последние годы было введено несколько флуоресцентных красителей для определения общего белка.Новые флуоресцентные красители на общий белок обеспечивают исключительную эффективность флуоресцентного окрашивания с быстрыми и простыми процедурами. Наиболее полезными являются те, у которых максимумы возбуждения и излучения соответствуют обычным наборам фильтров и настройкам лазера популярных приборов флуоресцентной визуализации.

Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна флуоресцентного красителя 0.25-0,5 нг 60 мин УФ-трансиллюминаторы или трансиллюминаторы синего / зеленого света или инструменты для визуализации с соответствующими фильтрами Большинство красителей совместимы с МС, вестерн-блоттинг Широкий линейный динамический диапазон с низкими пределами обнаружения

Большинство флуоресцентные красители связаны с простыми механизмами связывания красителей, а не с химическими реакциями, которые изменяют функциональные группы белков. Поэтому большинство из них совместимы с методами обесцвечивания и выделения белка для последующего анализа с помощью МС или вестерн-блоттинга.Соответственно, эти пятна часто используются как в одномерных, так и в двухмерных приложениях.

Изучить: Флуоресцентные красители
Изучить: Флуоресцентное маркирование для нормализации белка

Окрашивание цинком

Окрашивание цинком отличается от всех других методов окрашивания. Вместо окрашивания белков эта процедура окрашивает все области полиакриламидного геля, в которых нет белков. Ионы цинка образуют комплекс с имидазолом, который осаждается в гелевой матрице, за исключением тех мест, где находятся белки, насыщенные SDS.Молочно-белый осадок делает фон непрозрачным, в то время как полосы белка остаются прозрачными. Процесс короткий (около 15 минут), и гель можно сфотографировать, рассматривая его на темном фоне. Окрашивание цинком так же чувствительно, как и обычное окрашивание серебром (обнаруживает менее 1 нг белка), и никаких шагов фиксации не требуется. Кроме того, пятно легко удаляется, что делает этот метод совместимым с МС или вестерн-блоттингом.

Пример геля, окрашенного цинковым пятном. Серии 2-кратных разведений белковой смеси разделяли электрофорезом в белковом геле с использованием 15-луночного мини-геля. Затем гель окрашивали с помощью набора для обратимого окрашивания Thermo Scientific Pierce Zinc Reversible Stain Kit, а затем фотографировали с гелем, помещенным на темно-синий фон. Чувствительность этого геля составляет 0,25 нг, на что указывают полосы, которые видны на последней полосе.

Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна цинка 0.25-0,5 нг 15 мин Visual MS-совместимый, вестерн-блоттинг Без химической модификации белков; полосы видны, потому что фон окрашен (не полосы)

Пятна, специфичные для функциональной группы

Иногда желательно обнаружить подмножество белков, а не все белки в образце. Доступны методы дифференциального окрашивания для конкретных модификаций белков, таких как гликопротеины и фосфопротеины.Различные методы окрашивания белкового геля, как колориметрические, так и флуоресцентные, также были разработаны для обнаружения слитых белков с меткой His и слитых белков с меткой Lumino.

Когда химия связывания красителя или окрашивания может быть разработана для обнаружения одной из этих функциональных групп, ее можно использовать в качестве основы для определенного гелевого окрашивания.

Белки, которые были посттрансляционно модифицированы путем гликозилирования, могут быть обнаружены с помощью процедуры, которая включает химическую активацию углевода в реактивную группу.Этот метод работает, фиксируя белки в геле, а затем окисляя остатки сахара метапериодатом натрия. Затем полученные альдегидные группы можно подвергнуть взаимодействию с аминосодержащим красителем. В более ранней литературе этот метод известен как метод периодатной кислоты – Шиффа (PAS). Последующая стадия восстановления стабилизирует связь краситель-белок. Для этого метода использовались как колориметрические, так и флуоресцентные красители, а также коммерчески доступны наборы для окрашивания гликопротеинов.

Пример окрашенного геля для визуализации фосфопротеина и общих белков в 2D-геле. Белковые лизаты, полученные из линии Т-клеточной лимфомы Jurkat, разделяли с помощью 2D-гель-электрофореза и затем окрашивали красителем на фосфопротеиновом геле Invitrogen Pro-Q Diamond (синий) с последующим окрашиванием белковым гелем SYPRO Ruby (красный). Гель сушили и отображали на сканере FLA-3000 (Fuji). Показано составное наложенное цифровое псевдоцветное изображение.

Изучить: Пятна функциональной группы


Рекомендуемая литература

  1. Diezel W, Kopperschläger G, Hofmann E.Усовершенствованная процедура окрашивания белков в полиакриламидных гелях с новым типом кумасси бриллиантового синего. Анал. Biochem. 48 (2), 617–620 (1972).
  2. О’Фаррелл PH. 2D-электрофорез белков высокого разрешения. J. Biol. Chem. 250 (10), 4007–4021 (1975).
  3. Chevalier F, Rofidal V, Vanova P, Bergoin A, Rossignol M. Протеомная способность современных флуоресцентных красителей окрашивать белки. Фитохимия 65 (11), 1499–1506 (2004).
  4. Рабийуд Т.Сравнение низкофонового окрашивания диаммином серебра и белком нитрата серебра. Электрофорез 13 (7), 429–439 (1992).
  5. Фернандес-Патрон С., Кастелланос-Серра Л., Харди Е. и др. Понимание механизма окрашивания биомакромолекул ионами цинка в гелях для электрофореза: обобщение метода обратного окрашивания. Электрофорез 19 (14), 2398–2406 (1998).

Дополнительные ресурсы

Способы окрашивания протеиновых гелей | Thermo Fisher Scientific

После разделения белков с помощью электрофореза их можно визуализировать с помощью различных методов определения в геле, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки.За последние несколько десятилетий потребность в улучшенной чувствительности для образцов небольшого размера и совместимости с последующими приложениями и приборами для обнаружения стимулировала разработку нескольких основных методов окрашивания. Здесь мы обсуждаем общие принципы окрашивания белкового геля и описываем несколько методов окрашивания.

Изучите пятна Кумасси Изучите пятна серебра



Общие принципы окрашивания гелем

Чтобы сделать белки видимыми, с белками в геле может быть проведена специфическая для белков химическая реакция связывания красителя или окрашивания.В зависимости от конкретного химического состава красителя необходимы различные шаги для удержания или фиксации белков в гелевой матрице и для облегчения необходимой химической реакции. Все этапы выполняются в растворе, то есть с гелем, подвешенным на поддоне, заполненном тем или иным жидким реагентом. Как правило, белки все еще связаны с анионным детергентом (SDS), и вся гелевая матрица насыщается в рабочем буфере после электрофореза.

Учитывая общие ограничения этого формата, большинство методов окрашивания включают некоторые версии тех же общих этапов инкубации:

  • Промывка водой для удаления буферов для электрофореза из гелевой матрицы
  • Промывка кислотой или спиртом для кондиционирования или фиксации геля для ограничения диффузии белковых полос из матрицы
  • Обработка окрашивающим реагентом, чтобы позволить красителю или химическому веществу диффундировать в гель и связываться с белками (или реагировать с ними)
  • Обесцвечивание для удаления избытка красителя с фона гелевой матрицы

В зависимости от конкретного метода окрашивания, две или более из этих функций могут быть выполнены за один шаг.Например, краситель, составленный в кислотном буфере, может эффективно фиксировать и окрашивать за один этап. И наоборот, некоторые функции требуют нескольких шагов. Например, окрашивание серебром требует как стадии окрашивающего реагента, так и стадии проявителя для получения окрашенного продукта реакции.

Пятна от красителя кумасси

Наиболее распространенный метод определения белка в геле — окрашивание красителем Кумасси. Для этих красителей используется либо форма красителя G-250 («коллоидная»), либо форма R-250.Коллоидные красители кумасси могут быть составлены для эффективного окрашивания белков в течение 1 часа и требуют только воды (без метанола или уксусной кислоты) для обесцвечивания.

Пример геля, окрашенного красителем Simply Blue Safe Coomassie Stain. Образцы разделяли на геле NuPAGE 4-12% Bis-Tris и окрашивали SimplyBlue SafeStain.

  • Дорожка 1: 6 мкг смеси белков
  • Дорожка 2: 1 мкг кроличьего IgG
  • Дорожка 3: 1 мкг восстановленного БСА
  • Дорожка 4: 5 мкг E.coli лизат
  • Дорожка 5: 20 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 6: 10 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 7: 7 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 8: 3 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 9, 10: Mark12 неокрашенный стандартный
Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание Кумасси 5-25 нг 10-135 мин Visual Совместимость с масс-спектрометрией (МС) и секвенированием, вестерн-блоттинг (только нефиксирующие методы)
  • Быстрые и простые протоколы окрашивания
  • Обратимый: без постоянной химической модификации

В кислых условиях краситель Кумасси связывается с основными и гидрофобными остатками протеина. eins, меняющий цвет от тусклого красновато-коричневого до насыщенного синего.Как и все методы окрашивания, окрашивание кумасси выявляет одни белки лучше, чем другие, в зависимости от химии действия и различий в составе белков. Таким образом, окрашивание кумасси может обнаружить всего 8–10 нг на полосу для некоторых белков и 25 нг на полосу для большинства белков.

Окрашивание красителем Кумасси особенно удобно, потому что оно включает в себя один готовый к использованию реагент и не приводит к постоянному химическому изменению целевых белков. Первоначальная промывка водой необходима для удаления остаточного SDS, который препятствует связыванию красителя.Затем добавляют окрашивающий реагент, обычно примерно на 1 час; наконец, стадия обесцвечивания водой или простым метанолом: уксусной кислотой используется для вымывания избытка несвязанного красителя с гелевой матрицы. Поскольку не происходит химической модификации, полосы вырезанных белков могут быть полностью обесцвечены, а белки извлечены для анализа с помощью масс-спектрометрии или секвенирования.

Исследовать: Пятна Кумасси

Окрашивание серебром

Окрашивание серебром — наиболее чувствительный колориметрический метод определения общего белка.Этот метод включает осаждение металлического серебра на поверхность геля в местах расположения полос белка. Ионы серебра (из нитрата серебра в окрашивающем реагенте) взаимодействуют и связываются с определенными функциональными группами белка. Наиболее сильные взаимодействия происходят с группами карбоновых кислот (Asp и Glu), имидазолом (His), сульфгидрилами (Cys) и аминами (Lys). Различные реагенты-сенсибилизаторы и усилители необходимы для контроля специфичности и эффективности связывания ионов серебра с белками и эффективного преобразования (развития) связанного серебра в металлическое серебро.Процесс проявления практически такой же, как и для фотопленки: ионы серебра восстанавливаются до металлического серебра, в результате чего получается коричнево-черный цвет.

Пример геля, окрашенного с помощью SilverXpress Silver Staining Kit. Образцы разделяли на NuPAGE 4–12% Bis-Tris Protein Gel и окрашивали с помощью SilverXpress Kit.

  • Дорожки 1–5: Неокрашенный стандарт Invitrogen Mark12 (смесь 12 очищенных белков), серийные 2-кратные разведения в диапазоне от 1: 4 до 1:64
  • Дорожка 6: 1.6 нг БСА
  • Дорожка 7: 0,8 нг БСА
  • Дорожка 8: Лизат E. coli , разведенный 1:20
  • Дорожка 9: Лизат E. coli , разведенный 1:80
  • Дорожка 10: копия дорожки 1
Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание серебром 0.25-0,5 нг 30-120 мин Visual Некоторые составы совместимы с MS Самые низкие пределы обнаружения, не требующие специального оборудования

Протоколы окрашивания серебром требуют нескольких этапов, на которые влияет качество реагента, а также время инкубации и толщина геля. Преимущество имеющихся в продаже наборов для окрашивания серебром заключается в том, что составы и протоколы оптимизированы и последовательно производятся, что помогает обеспечить максимальную согласованность результатов от эксперимента к эксперименту.Наборы с оптимизированными протоколами надежны и просты в использовании, обнаруживая менее 0,5 нг белка в типичных гелях.

При окрашивании серебром в качестве усилителя используется глутаральдегид или формальдегид. Эти реагенты могут вызывать химическое сшивание белков в гелевой матрице, ограничивая совместимость с методами обесцвечивания и элюирования для анализа с помощью масс-спектрометрии (МС). Таким образом, оптимизация чувствительности по сравнению с возможностью восстановления белка имеет решающее значение при использовании окрашивания серебром как части рабочего процесса МС.

Препараты для окрашивания серебром могут быть изготовлены так, чтобы полосы белка окрашивались в черный, сине-коричневый, красный или желтый цвет, в зависимости от их заряда и других характеристик. Это особенно полезно для различения перекрывающихся пятен на 2D-гелях.

Исследуйте Серебряные пятна

Окрашивание флуоресцентным красителем

Недавние улучшения в приборах флуоресцентной визуализации и флуоресцентных приложениях привели к большему спросу на флуоресцентные красители. В последние годы было введено несколько флуоресцентных красителей для определения общего белка.Новые флуоресцентные красители на общий белок обеспечивают исключительную эффективность флуоресцентного окрашивания с быстрыми и простыми процедурами. Наиболее полезными являются те, у которых максимумы возбуждения и излучения соответствуют обычным наборам фильтров и настройкам лазера популярных приборов флуоресцентной визуализации.

Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна флуоресцентного красителя 0.25-0,5 нг 60 мин УФ-трансиллюминаторы или трансиллюминаторы синего / зеленого света или инструменты для визуализации с соответствующими фильтрами Большинство красителей совместимы с МС, вестерн-блоттинг Широкий линейный динамический диапазон с низкими пределами обнаружения

Большинство флуоресцентные красители связаны с простыми механизмами связывания красителей, а не с химическими реакциями, которые изменяют функциональные группы белков. Поэтому большинство из них совместимы с методами обесцвечивания и выделения белка для последующего анализа с помощью МС или вестерн-блоттинга.Соответственно, эти пятна часто используются как в одномерных, так и в двухмерных приложениях.

Изучить: Флуоресцентные красители
Изучить: Флуоресцентное маркирование для нормализации белка

Окрашивание цинком

Окрашивание цинком отличается от всех других методов окрашивания. Вместо окрашивания белков эта процедура окрашивает все области полиакриламидного геля, в которых нет белков. Ионы цинка образуют комплекс с имидазолом, который осаждается в гелевой матрице, за исключением тех мест, где находятся белки, насыщенные SDS.Молочно-белый осадок делает фон непрозрачным, в то время как полосы белка остаются прозрачными. Процесс короткий (около 15 минут), и гель можно сфотографировать, рассматривая его на темном фоне. Окрашивание цинком так же чувствительно, как и обычное окрашивание серебром (обнаруживает менее 1 нг белка), и никаких шагов фиксации не требуется. Кроме того, пятно легко удаляется, что делает этот метод совместимым с МС или вестерн-блоттингом.

Пример геля, окрашенного цинковым пятном. Серии 2-кратных разведений белковой смеси разделяли электрофорезом в белковом геле с использованием 15-луночного мини-геля. Затем гель окрашивали с помощью набора для обратимого окрашивания Thermo Scientific Pierce Zinc Reversible Stain Kit, а затем фотографировали с гелем, помещенным на темно-синий фон. Чувствительность этого геля составляет 0,25 нг, на что указывают полосы, которые видны на последней полосе.

Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна цинка 0.25-0,5 нг 15 мин Visual MS-совместимый, вестерн-блоттинг Без химической модификации белков; полосы видны, потому что фон окрашен (не полосы)

Пятна, специфичные для функциональной группы

Иногда желательно обнаружить подмножество белков, а не все белки в образце. Доступны методы дифференциального окрашивания для конкретных модификаций белков, таких как гликопротеины и фосфопротеины.Различные методы окрашивания белкового геля, как колориметрические, так и флуоресцентные, также были разработаны для обнаружения слитых белков с меткой His и слитых белков с меткой Lumino.

Когда химия связывания красителя или окрашивания может быть разработана для обнаружения одной из этих функциональных групп, ее можно использовать в качестве основы для определенного гелевого окрашивания.

Белки, которые были посттрансляционно модифицированы путем гликозилирования, могут быть обнаружены с помощью процедуры, которая включает химическую активацию углевода в реактивную группу.Этот метод работает, фиксируя белки в геле, а затем окисляя остатки сахара метапериодатом натрия. Затем полученные альдегидные группы можно подвергнуть взаимодействию с аминосодержащим красителем. В более ранней литературе этот метод известен как метод периодатной кислоты – Шиффа (PAS). Последующая стадия восстановления стабилизирует связь краситель-белок. Для этого метода использовались как колориметрические, так и флуоресцентные красители, а также коммерчески доступны наборы для окрашивания гликопротеинов.

Пример окрашенного геля для визуализации фосфопротеина и общих белков в 2D-геле. Белковые лизаты, полученные из линии Т-клеточной лимфомы Jurkat, разделяли с помощью 2D-гель-электрофореза и затем окрашивали красителем на фосфопротеиновом геле Invitrogen Pro-Q Diamond (синий) с последующим окрашиванием белковым гелем SYPRO Ruby (красный). Гель сушили и отображали на сканере FLA-3000 (Fuji). Показано составное наложенное цифровое псевдоцветное изображение.

Изучить: Пятна функциональной группы


Рекомендуемая литература

  1. Diezel W, Kopperschläger G, Hofmann E.Усовершенствованная процедура окрашивания белков в полиакриламидных гелях с новым типом кумасси бриллиантового синего. Анал. Biochem. 48 (2), 617–620 (1972).
  2. О’Фаррелл PH. 2D-электрофорез белков высокого разрешения. J. Biol. Chem. 250 (10), 4007–4021 (1975).
  3. Chevalier F, Rofidal V, Vanova P, Bergoin A, Rossignol M. Протеомная способность современных флуоресцентных красителей окрашивать белки. Фитохимия 65 (11), 1499–1506 (2004).
  4. Рабийуд Т.Сравнение низкофонового окрашивания диаммином серебра и белком нитрата серебра. Электрофорез 13 (7), 429–439 (1992).
  5. Фернандес-Патрон С., Кастелланос-Серра Л., Харди Е. и др. Понимание механизма окрашивания биомакромолекул ионами цинка в гелях для электрофореза: обобщение метода обратного окрашивания. Электрофорез 19 (14), 2398–2406 (1998).

Дополнительные ресурсы

Способы окрашивания протеиновых гелей | Thermo Fisher Scientific

После разделения белков с помощью электрофореза их можно визуализировать с помощью различных методов определения в геле, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки.За последние несколько десятилетий потребность в улучшенной чувствительности для образцов небольшого размера и совместимости с последующими приложениями и приборами для обнаружения стимулировала разработку нескольких основных методов окрашивания. Здесь мы обсуждаем общие принципы окрашивания белкового геля и описываем несколько методов окрашивания.

Изучите пятна Кумасси Изучите пятна серебра



Общие принципы окрашивания гелем

Чтобы сделать белки видимыми, с белками в геле может быть проведена специфическая для белков химическая реакция связывания красителя или окрашивания.В зависимости от конкретного химического состава красителя необходимы различные шаги для удержания или фиксации белков в гелевой матрице и для облегчения необходимой химической реакции. Все этапы выполняются в растворе, то есть с гелем, подвешенным на поддоне, заполненном тем или иным жидким реагентом. Как правило, белки все еще связаны с анионным детергентом (SDS), и вся гелевая матрица насыщается в рабочем буфере после электрофореза.

Учитывая общие ограничения этого формата, большинство методов окрашивания включают некоторые версии тех же общих этапов инкубации:

  • Промывка водой для удаления буферов для электрофореза из гелевой матрицы
  • Промывка кислотой или спиртом для кондиционирования или фиксации геля для ограничения диффузии белковых полос из матрицы
  • Обработка окрашивающим реагентом, чтобы позволить красителю или химическому веществу диффундировать в гель и связываться с белками (или реагировать с ними)
  • Обесцвечивание для удаления избытка красителя с фона гелевой матрицы

В зависимости от конкретного метода окрашивания, две или более из этих функций могут быть выполнены за один шаг.Например, краситель, составленный в кислотном буфере, может эффективно фиксировать и окрашивать за один этап. И наоборот, некоторые функции требуют нескольких шагов. Например, окрашивание серебром требует как стадии окрашивающего реагента, так и стадии проявителя для получения окрашенного продукта реакции.

Пятна от красителя кумасси

Наиболее распространенный метод определения белка в геле — окрашивание красителем Кумасси. Для этих красителей используется либо форма красителя G-250 («коллоидная»), либо форма R-250.Коллоидные красители кумасси могут быть составлены для эффективного окрашивания белков в течение 1 часа и требуют только воды (без метанола или уксусной кислоты) для обесцвечивания.

Пример геля, окрашенного красителем Simply Blue Safe Coomassie Stain. Образцы разделяли на геле NuPAGE 4-12% Bis-Tris и окрашивали SimplyBlue SafeStain.

  • Дорожка 1: 6 мкг смеси белков
  • Дорожка 2: 1 мкг кроличьего IgG
  • Дорожка 3: 1 мкг восстановленного БСА
  • Дорожка 4: 5 мкг E.coli лизат
  • Дорожка 5: 20 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 6: 10 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 7: 7 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 8: 3 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 9, 10: Mark12 неокрашенный стандартный
Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание Кумасси 5-25 нг 10-135 мин Visual Совместимость с масс-спектрометрией (МС) и секвенированием, вестерн-блоттинг (только нефиксирующие методы)
  • Быстрые и простые протоколы окрашивания
  • Обратимый: без постоянной химической модификации

В кислых условиях краситель Кумасси связывается с основными и гидрофобными остатками протеина. eins, меняющий цвет от тусклого красновато-коричневого до насыщенного синего.Как и все методы окрашивания, окрашивание кумасси выявляет одни белки лучше, чем другие, в зависимости от химии действия и различий в составе белков. Таким образом, окрашивание кумасси может обнаружить всего 8–10 нг на полосу для некоторых белков и 25 нг на полосу для большинства белков.

Окрашивание красителем Кумасси особенно удобно, потому что оно включает в себя один готовый к использованию реагент и не приводит к постоянному химическому изменению целевых белков. Первоначальная промывка водой необходима для удаления остаточного SDS, который препятствует связыванию красителя.Затем добавляют окрашивающий реагент, обычно примерно на 1 час; наконец, стадия обесцвечивания водой или простым метанолом: уксусной кислотой используется для вымывания избытка несвязанного красителя с гелевой матрицы. Поскольку не происходит химической модификации, полосы вырезанных белков могут быть полностью обесцвечены, а белки извлечены для анализа с помощью масс-спектрометрии или секвенирования.

Исследовать: Пятна Кумасси

Окрашивание серебром

Окрашивание серебром — наиболее чувствительный колориметрический метод определения общего белка.Этот метод включает осаждение металлического серебра на поверхность геля в местах расположения полос белка. Ионы серебра (из нитрата серебра в окрашивающем реагенте) взаимодействуют и связываются с определенными функциональными группами белка. Наиболее сильные взаимодействия происходят с группами карбоновых кислот (Asp и Glu), имидазолом (His), сульфгидрилами (Cys) и аминами (Lys). Различные реагенты-сенсибилизаторы и усилители необходимы для контроля специфичности и эффективности связывания ионов серебра с белками и эффективного преобразования (развития) связанного серебра в металлическое серебро.Процесс проявления практически такой же, как и для фотопленки: ионы серебра восстанавливаются до металлического серебра, в результате чего получается коричнево-черный цвет.

Пример геля, окрашенного с помощью SilverXpress Silver Staining Kit. Образцы разделяли на NuPAGE 4–12% Bis-Tris Protein Gel и окрашивали с помощью SilverXpress Kit.

  • Дорожки 1–5: Неокрашенный стандарт Invitrogen Mark12 (смесь 12 очищенных белков), серийные 2-кратные разведения в диапазоне от 1: 4 до 1:64
  • Дорожка 6: 1.6 нг БСА
  • Дорожка 7: 0,8 нг БСА
  • Дорожка 8: Лизат E. coli , разведенный 1:20
  • Дорожка 9: Лизат E. coli , разведенный 1:80
  • Дорожка 10: копия дорожки 1
Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание серебром 0.25-0,5 нг 30-120 мин Visual Некоторые составы совместимы с MS Самые низкие пределы обнаружения, не требующие специального оборудования

Протоколы окрашивания серебром требуют нескольких этапов, на которые влияет качество реагента, а также время инкубации и толщина геля. Преимущество имеющихся в продаже наборов для окрашивания серебром заключается в том, что составы и протоколы оптимизированы и последовательно производятся, что помогает обеспечить максимальную согласованность результатов от эксперимента к эксперименту.Наборы с оптимизированными протоколами надежны и просты в использовании, обнаруживая менее 0,5 нг белка в типичных гелях.

При окрашивании серебром в качестве усилителя используется глутаральдегид или формальдегид. Эти реагенты могут вызывать химическое сшивание белков в гелевой матрице, ограничивая совместимость с методами обесцвечивания и элюирования для анализа с помощью масс-спектрометрии (МС). Таким образом, оптимизация чувствительности по сравнению с возможностью восстановления белка имеет решающее значение при использовании окрашивания серебром как части рабочего процесса МС.

Препараты для окрашивания серебром могут быть изготовлены так, чтобы полосы белка окрашивались в черный, сине-коричневый, красный или желтый цвет, в зависимости от их заряда и других характеристик. Это особенно полезно для различения перекрывающихся пятен на 2D-гелях.

Исследуйте Серебряные пятна

Окрашивание флуоресцентным красителем

Недавние улучшения в приборах флуоресцентной визуализации и флуоресцентных приложениях привели к большему спросу на флуоресцентные красители. В последние годы было введено несколько флуоресцентных красителей для определения общего белка.Новые флуоресцентные красители на общий белок обеспечивают исключительную эффективность флуоресцентного окрашивания с быстрыми и простыми процедурами. Наиболее полезными являются те, у которых максимумы возбуждения и излучения соответствуют обычным наборам фильтров и настройкам лазера популярных приборов флуоресцентной визуализации.

Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна флуоресцентного красителя 0.25-0,5 нг 60 мин УФ-трансиллюминаторы или трансиллюминаторы синего / зеленого света или инструменты для визуализации с соответствующими фильтрами Большинство красителей совместимы с МС, вестерн-блоттинг Широкий линейный динамический диапазон с низкими пределами обнаружения

Большинство флуоресцентные красители связаны с простыми механизмами связывания красителей, а не с химическими реакциями, которые изменяют функциональные группы белков. Поэтому большинство из них совместимы с методами обесцвечивания и выделения белка для последующего анализа с помощью МС или вестерн-блоттинга.Соответственно, эти пятна часто используются как в одномерных, так и в двухмерных приложениях.

Изучить: Флуоресцентные красители
Изучить: Флуоресцентное маркирование для нормализации белка

Окрашивание цинком

Окрашивание цинком отличается от всех других методов окрашивания. Вместо окрашивания белков эта процедура окрашивает все области полиакриламидного геля, в которых нет белков. Ионы цинка образуют комплекс с имидазолом, который осаждается в гелевой матрице, за исключением тех мест, где находятся белки, насыщенные SDS.Молочно-белый осадок делает фон непрозрачным, в то время как полосы белка остаются прозрачными. Процесс короткий (около 15 минут), и гель можно сфотографировать, рассматривая его на темном фоне. Окрашивание цинком так же чувствительно, как и обычное окрашивание серебром (обнаруживает менее 1 нг белка), и никаких шагов фиксации не требуется. Кроме того, пятно легко удаляется, что делает этот метод совместимым с МС или вестерн-блоттингом.

Пример геля, окрашенного цинковым пятном. Серии 2-кратных разведений белковой смеси разделяли электрофорезом в белковом геле с использованием 15-луночного мини-геля. Затем гель окрашивали с помощью набора для обратимого окрашивания Thermo Scientific Pierce Zinc Reversible Stain Kit, а затем фотографировали с гелем, помещенным на темно-синий фон. Чувствительность этого геля составляет 0,25 нг, на что указывают полосы, которые видны на последней полосе.

Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна цинка 0.25-0,5 нг 15 мин Visual MS-совместимый, вестерн-блоттинг Без химической модификации белков; полосы видны, потому что фон окрашен (не полосы)

Пятна, специфичные для функциональной группы

Иногда желательно обнаружить подмножество белков, а не все белки в образце. Доступны методы дифференциального окрашивания для конкретных модификаций белков, таких как гликопротеины и фосфопротеины.Различные методы окрашивания белкового геля, как колориметрические, так и флуоресцентные, также были разработаны для обнаружения слитых белков с меткой His и слитых белков с меткой Lumino.

Когда химия связывания красителя или окрашивания может быть разработана для обнаружения одной из этих функциональных групп, ее можно использовать в качестве основы для определенного гелевого окрашивания.

Белки, которые были посттрансляционно модифицированы путем гликозилирования, могут быть обнаружены с помощью процедуры, которая включает химическую активацию углевода в реактивную группу.Этот метод работает, фиксируя белки в геле, а затем окисляя остатки сахара метапериодатом натрия. Затем полученные альдегидные группы можно подвергнуть взаимодействию с аминосодержащим красителем. В более ранней литературе этот метод известен как метод периодатной кислоты – Шиффа (PAS). Последующая стадия восстановления стабилизирует связь краситель-белок. Для этого метода использовались как колориметрические, так и флуоресцентные красители, а также коммерчески доступны наборы для окрашивания гликопротеинов.

Пример окрашенного геля для визуализации фосфопротеина и общих белков в 2D-геле. Белковые лизаты, полученные из линии Т-клеточной лимфомы Jurkat, разделяли с помощью 2D-гель-электрофореза и затем окрашивали красителем на фосфопротеиновом геле Invitrogen Pro-Q Diamond (синий) с последующим окрашиванием белковым гелем SYPRO Ruby (красный). Гель сушили и отображали на сканере FLA-3000 (Fuji). Показано составное наложенное цифровое псевдоцветное изображение.

Изучить: Пятна функциональной группы


Рекомендуемая литература

  1. Diezel W, Kopperschläger G, Hofmann E.Усовершенствованная процедура окрашивания белков в полиакриламидных гелях с новым типом кумасси бриллиантового синего. Анал. Biochem. 48 (2), 617–620 (1972).
  2. О’Фаррелл PH. 2D-электрофорез белков высокого разрешения. J. Biol. Chem. 250 (10), 4007–4021 (1975).
  3. Chevalier F, Rofidal V, Vanova P, Bergoin A, Rossignol M. Протеомная способность современных флуоресцентных красителей окрашивать белки. Фитохимия 65 (11), 1499–1506 (2004).
  4. Рабийуд Т.Сравнение низкофонового окрашивания диаммином серебра и белком нитрата серебра. Электрофорез 13 (7), 429–439 (1992).
  5. Фернандес-Патрон С., Кастелланос-Серра Л., Харди Е. и др. Понимание механизма окрашивания биомакромолекул ионами цинка в гелях для электрофореза: обобщение метода обратного окрашивания. Электрофорез 19 (14), 2398–2406 (1998).

Дополнительные ресурсы

Способы окрашивания протеиновых гелей | Thermo Fisher Scientific

После разделения белков с помощью электрофореза их можно визуализировать с помощью различных методов определения в геле, каждый из которых имеет свои преимущества и недостатки.За последние несколько десятилетий потребность в улучшенной чувствительности для образцов небольшого размера и совместимости с последующими приложениями и приборами для обнаружения стимулировала разработку нескольких основных методов окрашивания. Здесь мы обсуждаем общие принципы окрашивания белкового геля и описываем несколько методов окрашивания.

Изучите пятна Кумасси Изучите пятна серебра



Общие принципы окрашивания гелем

Чтобы сделать белки видимыми, с белками в геле может быть проведена специфическая для белков химическая реакция связывания красителя или окрашивания.В зависимости от конкретного химического состава красителя необходимы различные шаги для удержания или фиксации белков в гелевой матрице и для облегчения необходимой химической реакции. Все этапы выполняются в растворе, то есть с гелем, подвешенным на поддоне, заполненном тем или иным жидким реагентом. Как правило, белки все еще связаны с анионным детергентом (SDS), и вся гелевая матрица насыщается в рабочем буфере после электрофореза.

Учитывая общие ограничения этого формата, большинство методов окрашивания включают некоторые версии тех же общих этапов инкубации:

  • Промывка водой для удаления буферов для электрофореза из гелевой матрицы
  • Промывка кислотой или спиртом для кондиционирования или фиксации геля для ограничения диффузии белковых полос из матрицы
  • Обработка окрашивающим реагентом, чтобы позволить красителю или химическому веществу диффундировать в гель и связываться с белками (или реагировать с ними)
  • Обесцвечивание для удаления избытка красителя с фона гелевой матрицы

В зависимости от конкретного метода окрашивания, две или более из этих функций могут быть выполнены за один шаг.Например, краситель, составленный в кислотном буфере, может эффективно фиксировать и окрашивать за один этап. И наоборот, некоторые функции требуют нескольких шагов. Например, окрашивание серебром требует как стадии окрашивающего реагента, так и стадии проявителя для получения окрашенного продукта реакции.

Пятна от красителя кумасси

Наиболее распространенный метод определения белка в геле — окрашивание красителем Кумасси. Для этих красителей используется либо форма красителя G-250 («коллоидная»), либо форма R-250.Коллоидные красители кумасси могут быть составлены для эффективного окрашивания белков в течение 1 часа и требуют только воды (без метанола или уксусной кислоты) для обесцвечивания.

Пример геля, окрашенного красителем Simply Blue Safe Coomassie Stain. Образцы разделяли на геле NuPAGE 4-12% Bis-Tris и окрашивали SimplyBlue SafeStain.

  • Дорожка 1: 6 мкг смеси белков
  • Дорожка 2: 1 мкг кроличьего IgG
  • Дорожка 3: 1 мкг восстановленного БСА
  • Дорожка 4: 5 мкг E.coli лизат
  • Дорожка 5: 20 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 6: 10 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 7: 7 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 8: 3 нг восстановленного BSA
  • Дорожка 9, 10: Mark12 неокрашенный стандартный
Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание Кумасси 5-25 нг 10-135 мин Visual Совместимость с масс-спектрометрией (МС) и секвенированием, вестерн-блоттинг (только нефиксирующие методы)
  • Быстрые и простые протоколы окрашивания
  • Обратимый: без постоянной химической модификации

В кислых условиях краситель Кумасси связывается с основными и гидрофобными остатками протеина. eins, меняющий цвет от тусклого красновато-коричневого до насыщенного синего.Как и все методы окрашивания, окрашивание кумасси выявляет одни белки лучше, чем другие, в зависимости от химии действия и различий в составе белков. Таким образом, окрашивание кумасси может обнаружить всего 8–10 нг на полосу для некоторых белков и 25 нг на полосу для большинства белков.

Окрашивание красителем Кумасси особенно удобно, потому что оно включает в себя один готовый к использованию реагент и не приводит к постоянному химическому изменению целевых белков. Первоначальная промывка водой необходима для удаления остаточного SDS, который препятствует связыванию красителя.Затем добавляют окрашивающий реагент, обычно примерно на 1 час; наконец, стадия обесцвечивания водой или простым метанолом: уксусной кислотой используется для вымывания избытка несвязанного красителя с гелевой матрицы. Поскольку не происходит химической модификации, полосы вырезанных белков могут быть полностью обесцвечены, а белки извлечены для анализа с помощью масс-спектрометрии или секвенирования.

Исследовать: Пятна Кумасси

Окрашивание серебром

Окрашивание серебром — наиболее чувствительный колориметрический метод определения общего белка.Этот метод включает осаждение металлического серебра на поверхность геля в местах расположения полос белка. Ионы серебра (из нитрата серебра в окрашивающем реагенте) взаимодействуют и связываются с определенными функциональными группами белка. Наиболее сильные взаимодействия происходят с группами карбоновых кислот (Asp и Glu), имидазолом (His), сульфгидрилами (Cys) и аминами (Lys). Различные реагенты-сенсибилизаторы и усилители необходимы для контроля специфичности и эффективности связывания ионов серебра с белками и эффективного преобразования (развития) связанного серебра в металлическое серебро.Процесс проявления практически такой же, как и для фотопленки: ионы серебра восстанавливаются до металлического серебра, в результате чего получается коричнево-черный цвет.

Пример геля, окрашенного с помощью SilverXpress Silver Staining Kit. Образцы разделяли на NuPAGE 4–12% Bis-Tris Protein Gel и окрашивали с помощью SilverXpress Kit.

  • Дорожки 1–5: Неокрашенный стандарт Invitrogen Mark12 (смесь 12 очищенных белков), серийные 2-кратные разведения в диапазоне от 1: 4 до 1:64
  • Дорожка 6: 1.6 нг БСА
  • Дорожка 7: 0,8 нг БСА
  • Дорожка 8: Лизат E. coli , разведенный 1:20
  • Дорожка 9: Лизат E. coli , разведенный 1:80
  • Дорожка 10: копия дорожки 1
Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Окрашивание серебром 0.25-0,5 нг 30-120 мин Visual Некоторые составы совместимы с MS Самые низкие пределы обнаружения, не требующие специального оборудования

Протоколы окрашивания серебром требуют нескольких этапов, на которые влияет качество реагента, а также время инкубации и толщина геля. Преимущество имеющихся в продаже наборов для окрашивания серебром заключается в том, что составы и протоколы оптимизированы и последовательно производятся, что помогает обеспечить максимальную согласованность результатов от эксперимента к эксперименту.Наборы с оптимизированными протоколами надежны и просты в использовании, обнаруживая менее 0,5 нг белка в типичных гелях.

При окрашивании серебром в качестве усилителя используется глутаральдегид или формальдегид. Эти реагенты могут вызывать химическое сшивание белков в гелевой матрице, ограничивая совместимость с методами обесцвечивания и элюирования для анализа с помощью масс-спектрометрии (МС). Таким образом, оптимизация чувствительности по сравнению с возможностью восстановления белка имеет решающее значение при использовании окрашивания серебром как части рабочего процесса МС.

Препараты для окрашивания серебром могут быть изготовлены так, чтобы полосы белка окрашивались в черный, сине-коричневый, красный или желтый цвет, в зависимости от их заряда и других характеристик. Это особенно полезно для различения перекрывающихся пятен на 2D-гелях.

Исследуйте Серебряные пятна

Окрашивание флуоресцентным красителем

Недавние улучшения в приборах флуоресцентной визуализации и флуоресцентных приложениях привели к большему спросу на флуоресцентные красители. В последние годы было введено несколько флуоресцентных красителей для определения общего белка.Новые флуоресцентные красители на общий белок обеспечивают исключительную эффективность флуоресцентного окрашивания с быстрыми и простыми процедурами. Наиболее полезными являются те, у которых максимумы возбуждения и излучения соответствуют обычным наборам фильтров и настройкам лазера популярных приборов флуоресцентной визуализации.

Чувствительность Стандартное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна флуоресцентного красителя 0.25-0,5 нг 60 мин УФ-трансиллюминаторы или трансиллюминаторы синего / зеленого света или инструменты для визуализации с соответствующими фильтрами Большинство красителей совместимы с МС, вестерн-блоттинг Широкий линейный динамический диапазон с низкими пределами обнаружения

Большинство флуоресцентные красители связаны с простыми механизмами связывания красителей, а не с химическими реакциями, которые изменяют функциональные группы белков. Поэтому большинство из них совместимы с методами обесцвечивания и выделения белка для последующего анализа с помощью МС или вестерн-блоттинга.Соответственно, эти пятна часто используются как в одномерных, так и в двухмерных приложениях.

Изучить: Флуоресцентные красители
Изучить: Флуоресцентное маркирование для нормализации белка

Окрашивание цинком

Окрашивание цинком отличается от всех других методов окрашивания. Вместо окрашивания белков эта процедура окрашивает все области полиакриламидного геля, в которых нет белков. Ионы цинка образуют комплекс с имидазолом, который осаждается в гелевой матрице, за исключением тех мест, где находятся белки, насыщенные SDS.Молочно-белый осадок делает фон непрозрачным, в то время как полосы белка остаются прозрачными. Процесс короткий (около 15 минут), и гель можно сфотографировать, рассматривая его на темном фоне. Окрашивание цинком так же чувствительно, как и обычное окрашивание серебром (обнаруживает менее 1 нг белка), и никаких шагов фиксации не требуется. Кроме того, пятно легко удаляется, что делает этот метод совместимым с МС или вестерн-блоттингом.

Пример геля, окрашенного цинковым пятном. Серии 2-кратных разведений белковой смеси разделяли электрофорезом в белковом геле с использованием 15-луночного мини-геля. Затем гель окрашивали с помощью набора для обратимого окрашивания Thermo Scientific Pierce Zinc Reversible Stain Kit, а затем фотографировали с гелем, помещенным на темно-синий фон. Чувствительность этого геля составляет 0,25 нг, на что указывают полосы, которые видны на последней полосе.

Чувствительность Типичное время протокола Обнаружение Совместимость с последующими приложениями Преимущества
Пятна цинка 0.25-0,5 нг 15 мин Visual MS-совместимый, вестерн-блоттинг Без химической модификации белков; полосы видны, потому что фон окрашен (не полосы)

Пятна, специфичные для функциональной группы

Иногда желательно обнаружить подмножество белков, а не все белки в образце. Доступны методы дифференциального окрашивания для конкретных модификаций белков, таких как гликопротеины и фосфопротеины.Различные методы окрашивания белкового геля, как колориметрические, так и флуоресцентные, также были разработаны для обнаружения слитых белков с меткой His и слитых белков с меткой Lumino.

Когда химия связывания красителя или окрашивания может быть разработана для обнаружения одной из этих функциональных групп, ее можно использовать в качестве основы для определенного гелевого окрашивания.

Белки, которые были посттрансляционно модифицированы путем гликозилирования, могут быть обнаружены с помощью процедуры, которая включает химическую активацию углевода в реактивную группу.Этот метод работает, фиксируя белки в геле, а затем окисляя остатки сахара метапериодатом натрия. Затем полученные альдегидные группы можно подвергнуть взаимодействию с аминосодержащим красителем. В более ранней литературе этот метод известен как метод периодатной кислоты – Шиффа (PAS). Последующая стадия восстановления стабилизирует связь краситель-белок. Для этого метода использовались как колориметрические, так и флуоресцентные красители, а также коммерчески доступны наборы для окрашивания гликопротеинов.

Пример окрашенного геля для визуализации фосфопротеина и общих белков в 2D-геле. Белковые лизаты, полученные из линии Т-клеточной лимфомы Jurkat, разделяли с помощью 2D-гель-электрофореза и затем окрашивали красителем на фосфопротеиновом геле Invitrogen Pro-Q Diamond (синий) с последующим окрашиванием белковым гелем SYPRO Ruby (красный). Гель сушили и отображали на сканере FLA-3000 (Fuji). Показано составное наложенное цифровое псевдоцветное изображение.

Изучить: Пятна функциональной группы


Рекомендуемая литература

  1. Diezel W, Kopperschläger G, Hofmann E.Усовершенствованная процедура окрашивания белков в полиакриламидных гелях с новым типом кумасси бриллиантового синего. Анал. Biochem. 48 (2), 617–620 (1972).
  2. О’Фаррелл PH. 2D-электрофорез белков высокого разрешения. J. Biol. Chem. 250 (10), 4007–4021 (1975).
  3. Chevalier F, Rofidal V, Vanova P, Bergoin A, Rossignol M. Протеомная способность современных флуоресцентных красителей окрашивать белки. Фитохимия 65 (11), 1499–1506 (2004).
  4. Рабийуд Т.Сравнение низкофонового окрашивания диаммином серебра и белком нитрата серебра. Электрофорез 13 (7), 429–439 (1992).
  5. Фернандес-Патрон С., Кастелланос-Серра Л., Харди Е. и др. Понимание механизма окрашивания биомакромолекул ионами цинка в гелях для электрофореза: обобщение метода обратного окрашивания. Электрофорез 19 (14), 2398–2406 (1998).

Дополнительные ресурсы

(PDF) Отрицательное окрашивание цинк-имидазолом нуклеиновых кислот, разделенных гель-электрофорезом

Электрофорез

1996,

17,

1537-1541

Цинк-имидазол-отрицательное окрашивание

нуклеиновых кислот 1539

кислотных осадков [I], 98%.Меченые фрагменты

,

отделяли от не включенного АТФ путем окрашивания центрифугированием

a)

Колоночная хроматография на сефадексе G-50.

оставшихся неинкорпорированных меченых АТФ представляют менее чем 1% общей радиоактивности в образце ДНК.

Таблица

1.

Пределы обнаружения

ДНК-маркерных фрагментов

по цинк-имидазолу

Методы 0.2 kpb 0,52 kpb

1

kpb 2 kpb 6,5 kpb

9

kpb 20 kpb

(раздел 3.2.1)

2.5.2.2000 DNA

125 нг

74

нг 62 нг 62 нг

(Раздел 3.2.2)

a)

Наименьшее определяемое количество каждой ДНК

было

было

по

визуальная оценка серии разведений.

Идентичные образцы меченых фрагментов ДНК подвергали электрофорезу на параллельных дорожках акриамидного (3,5%) геля.

Дорожки в трех повторностях окрашивали цинк-имидазолом (см.

, раздел 2.3.1) или бромидом этидия. Полосы ДНК

и

вырезали и инкубировали в трех сменах

(по 5 мин каждая) трис-ацетатного буфера с добавлением

10 мМ EDTA при осторожном перемешивании. После этого срезы геля

погружали в трис-ацетат (2

X

5 мин) и

, затем инкубировали в

0.5

M

ацетат аммония, 10 мМ магний-

ацетат ниезия,

1

мМ EDTA, 0,1% SDS в течение 16 ч при 37 ° C

для элюирования путем диффузии ДНК, как описано в

[l].

В качестве контроля

меченые фрагменты ДНК вырезали из

трех неокрашенных дорожек и элюировали параллельно с

из окрашенных срезов. Радиоактивность в гелевых срезах

измеряли на сцинтилляционном счетчике 1214 Rackbeta

(LKB Wallac) до окрашивания (определяемого как 10000 / o), после обесцвечивания

(в случае цинк-имидазола) и после элюирования

т.Восстановление ДНК после элюирования определяли с помощью

, измеряя радиоактивность в буфере для элюции.

2,6

Эксперименты по трансформации

Плазмида pPACIB.l / VH-L-VL

[9]

(20 пг) была расщеплена

60 единицами ферментов

EcoRI

и рестрикционных ферментов Hind111

. при 37 ° C для

1

ч и двух фрагментов

pPACIB.1

(вектор) из 2.Были получены 8 kbp и анти-HBsAg scFv (полоса)

0,7 kbp

. Фрагменты ДНК разделяли на

1

Yo

агарозных гелей с низкой температурой гелеобразования и

окрашивали бромидом этидия [l] или цинк-имида-

зола, как описано в разделе 2.3.2. Сразу после окрашивания

фрагменты ДНК были выделены с использованием фенола

и хлороформа

[1],

, лигированных при соотношении вектор: полоса

1: 3 с

1

единиц ДНК Т4 по Вейссу. лигаза, и 5

pL

из

лигирования, трансформированных в хлорид-кальций-компетентный

E.

coli

XL-1 Синие клетки. Затем трансформированные клетки помещали

на чашки LB, содержащие 50 мкл ампициллина и

, инкубировали в течение 12 часов при 37 ° C, после чего подсчитывали трансформанты

.

3

Результаты

и обсуждение

Цинк Метод положительного окрашивания -имидазолом [5] для

нуклеиновых кислот на агарозных гелях состоит из трех основных этапов

. Во-первых, инкубация геля в 40 мМ сульфате цинка в течение

10

мин для связывания Zn2 + с нуклеиновыми кислотами .

Во-вторых, промывка дистиллированной водой для удаления несвязанного

Zn2 + из зон геля, не содержащих нуклеиновые кислоты.

Наконец, выдержка в 0,2

M

имидазола в течение 3-5 минут для

положительного окрашивания нуклеиновых кислот

(т.е.

визуализация

комплексов цинк-ДНК в виде полос, окрашенных темно-белым цветом

на слегка непрозрачном фоне). Непрозрачная основа основания

образована нерастворимым комплексом цинк-имидазола

, который появляется из-за осаждения следов Zn2 +

, оставшихся в гелевой матрице.

Здесь мы описываем модификацию этого положительного красителя

, которая приводит к отрицательному окрашиванию нуклеиновых кислот: ДНК

фрагменты расщепления

из

низкомолекулярные

(<

1

kbp)

были подвергнуты электрофорезу

на

акриламидных гелях (от 3,5

O / o

до

8

O / o).

После электрофореза гели окрашивали положительным цинк-имидазольным красителем

, как описано в [5], за исключением

, где промывание водой (второй этап процедуры)

не проводилось.В результате поверхность геля была окрашена в глубокий белый цвет

в результате обильного осаждения комплекса цинк-имида-

зол, за исключением зон фрагментов ДНК,

, которые оставались прозрачными и бесцветными. Однако второстепенные полосы

оказались перекрашенными (т.е. покрыты осадком цинка, индуцированным имидазолом

), и полученный контраст изображения

был низким (не показано). Затем пытались уменьшить концентрации цинка

40

до 3 мМ) в порядке

, чтобы получить меньшее количество индуцированного имидазолом осадка цинка

, что повысило чувствительность.При концентрации цинка

15 мМ

или более

чувствительность была потеряна из-за перекрашивания

. Когда концентрация цинка составляла 8 мМ

или менее, чувствительность снижалась из-за отсутствия контраста

между слабым фоном и прозрачными полосами.

Однако, снижая концентрацию цинка до 10 мМ,

обеспечивает адекватный баланс между чувствительностью (таблица 1) и интенсивностью

фонового окрашивания (рис.1) был получен.

Предел обнаружения

из

двухцепочечной ДНК (от

0,2 ​​до

1

кб) при визуальном осмотре составлял от 7 до

5 нг / диапазон. Эти уровни обнаружения сравнимы с уровнями

, полученными с бромидом этидия плюс УФ-облучение —

при 312 нм. Это отрицательное окрашивание ДНК также может быть применено

с аналогичной чувствительностью для других гелевых буферов и буферов для электро-фосфора

, включая трис-фосфат EDTA и

трис-борат EDTA (не показано).С другой стороны, имидазол цинк-

успешно позволил получить отрицательное окрашивание

различных 22-основных олигонуклеотидов (не показано). Для трех исследованных олигонуклеотидов

(см. Раздел 2. 1) чувствительность

составляла 7,8, 11,5 и 13 нгл соответственно. Это

ясно указывает на то, что метод совместим с

обнаружением оцДНК на полиакриламидных гелях.

Как показано на фиг. 2A, большие фрагменты ДНК (1-12 т.п.н.)

также были отрицательно окрашены на агарозных гелях с модификацией метода, используемого для полиакриламидных гелей.

Обратите внимание, что образец ДНК с отрицательным окрашиванием (рис. 2A)

показывает такое же количество полос, как и при окрашивании бромидом этидия

(рис. 2B). Как указано в таблице 1,

другой двухцепочечной ДНК (от 2 до 20 т.п.н.) были отрицательно окрашены

с чувствительностью от 125 до

62 нг / полосу соответственно. Эти значения чувствительности в нашем опыте

были вдвое ниже, чем те, которые были получены с бромидом этидия

и УФ-светом 312 нм (от 62 до

31 нг / диапазон).Через несколько часов отрицательно окрашенные образцы ДНК

были преобразованы в положительно окрашенные образцы ДНК

(не показаны). Это, по-видимому, связано с

эффективного комплексообразования

ионов цинка, связанных с гелевым красителем для электрофореза

Reversible Zinc Stain ™, G-Biosciences

Положения и условия

Спасибо, что посетили наш сайт. Эти условия использования применимы к веб-сайтам США, Канады и Пуэрто-Рико (далее «Веб-сайт»), которыми управляет VWR («Компания»).Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Все пользователи веб-сайта подчиняются следующим условиям использования веб-сайта (эти «Условия использования»). Пожалуйста, внимательно прочтите эти Условия использования перед доступом или использованием любой части веб-сайта. Заходя на веб-сайт или используя его, вы соглашаетесь с тем, что вы прочитали, поняли и соглашаетесь соблюдать настоящие Условия использования с внесенными в него время от времени поправками, а также Политику конфиденциальности компании, которая настоящим включена в настоящие Условия использования. Если вы не желаете соглашаться с настоящими Условиями использования, не открывайте и не используйте какие-либо части веб-сайта.

Компания может пересматривать и обновлять настоящие Условия использования в любое время без предварительного уведомления, разместив измененные условия на веб-сайте. Продолжение использования вами веб-сайта означает, что вы принимаете и соглашаетесь с пересмотренными Условиями использования. Если вы не согласны с Условиями использования (в которые время от времени вносятся поправки) или недовольны Веб-сайтом, ваше единственное и исключительное средство правовой защиты — прекратить использование Веб-сайта.

Использование сайта

Информация, содержащаяся на этом веб-сайте, предназначена только для информационных целей. Хотя считается, что информация верна на момент публикации, вам следует самостоятельно определить ее пригодность для вашего использования. Не все продукты или услуги, описанные на этом веб-сайте, доступны во всех юрисдикциях или для всех потенциальных клиентов, и ничто в настоящем документе не предназначено как предложение или ходатайство в какой-либо юрисдикции или какому-либо потенциальному покупателю, где такое предложение или продажа не соответствует требованиям.

Приобретение товаров и услуг

Настоящие Условия и положения распространяются только на использование веб-сайта. Обратите внимание, что условия, касающиеся обслуживания, продаж продуктов, рекламных акций и других связанных мероприятий, можно найти по адресу https://us.vwr.com/store/content/externalContentPage.jsp?path=/en_US/about_vwr_terms_and_conditions.jsp , и эти условия регулируют любые покупки продуктов или услуг у Компании.

Интерактивные функции

Веб-сайт может содержать службы досок объявлений, области чата, группы новостей, форумы, сообщества, личные веб-страницы, календари и / или другие средства сообщения или связи, предназначенные для того, чтобы вы могли общаться с общественностью в целом или с группой ( вместе «Функция сообщества»).Вы соглашаетесь использовать функцию сообщества только для публикации, отправки и получения сообщений и материалов, которые являются надлежащими и относятся к конкретной функции сообщества. Вы соглашаетесь использовать веб-сайт только в законных целях.

A. В частности, вы соглашаетесь не делать ничего из следующего при использовании функции сообщества:

1. Опорочить, оскорбить, преследовать, преследовать, угрожать или иным образом нарушать законные права (например, право на неприкосновенность частной жизни и гласность) других.
2. Публиковать, размещать, загружать, распространять или распространять любую неуместную, непристойную, дискредитирующую, нарушающую авторские права, непристойную, непристойную или незаконную тему, название, материал или информацию.
3. Загружайте файлы, содержащие программное обеспечение или другие материалы, защищенные законами об интеллектуальной собственности (или правами на неприкосновенность частной жизни), если только вы не владеете или не контролируете права на них или не получили все необходимое согласие.
4. Загрузите файлы, содержащие вирусы, поврежденные файлы или любое другое подобное программное обеспечение или программы, которые могут повредить работу чужого компьютера.
5. Перехватить или попытаться перехватить электронную почту, не предназначенную для вас.
6. Рекламировать или предлагать продавать или покупать какие-либо товары или услуги для любых деловых целей, если такая функция сообщества специально не разрешает такие сообщения.
7. Проводите или рассылайте опросы, конкурсы, финансовые пирамиды или письма счастья.
8. Загрузите любой файл, опубликованный другим пользователем функции сообщества, который, как вы знаете или разумно должен знать, не может распространяться на законных основаниях таким образом или что у вас есть договорное обязательство сохранять конфиденциальность (несмотря на его доступность на веб-сайте).
9. Фальсифицировать или удалять любые ссылки на автора, юридические или другие надлежащие уведомления или обозначения собственности или ярлыки происхождения или источника программного обеспечения или других материалов, содержащихся в загружаемом файле.
10. Предоставление ложной информации о принадлежности к какому-либо лицу или организации.
11. Участвовать в любых других действиях, которые ограничивают или препятствуют использованию веб-сайта кем-либо или которые, по мнению Компании, могут нанести вред Компании или пользователям веб-сайта или подвергнуть их ответственности.
12. Нарушать любые применимые законы или постановления или нарушать любой кодекс поведения или другие правила, которые могут быть применимы к какой-либо конкретной функции Сообщества.
13. Собирать или иным образом собирать информацию о других, включая адреса электронной почты, без их согласия.

B. Вы понимаете и признаете, что вы несете ответственность за любой контент, который вы отправляете, вы, а не Компания, несете полную ответственность за такой контент, включая его законность, надежность и уместность. Если вы публикуете сообщения от имени или от имени вашего работодателя или другой организации, вы заявляете и гарантируете, что у вас есть на это право. Загружая или иным образом передавая материалы в любую область веб-сайта, вы гарантируете, что эти материалы являются вашими собственными или находятся в общественном достоянии или иным образом свободны от проприетарных или иных ограничений, и что вы имеете право размещать их на веб-сайте.Кроме того, загружая или иным образом передавая материалы в любую область веб-сайта, вы предоставляете Компании безотзывное, бесплатное, всемирное право на публикацию, воспроизведение, использование, адаптацию, редактирование и / или изменение таких материалов любым способом, в любые и все средства массовой информации, известные в настоящее время или обнаруженные в будущем во всем мире, в том числе в Интернете и World Wide Web, для рекламных, коммерческих, торговых и рекламных целей, без дополнительных ограничений или компенсации, если это не запрещено законом, и без уведомления, проверки или одобрения.

C. Компания оставляет за собой право, но не принимает на себя никакой ответственности (1) удалить любые материалы, размещенные на веб-сайте, которые Компания по своему собственному усмотрению сочтет несовместимыми с вышеуказанными обязательствами или иным образом неприемлемыми по любой причине. ; и (2) прекратить доступ любого пользователя ко всему или части веб-сайта. Однако Компания не может ни просмотреть все материалы до того, как они будут размещены на веб-сайте, ни обеспечить быстрое удаление нежелательных материалов после их размещения.Соответственно, Компания не несет ответственности за какие-либо действия или бездействие в отношении передач, сообщений или контента, предоставленных третьими сторонами. Компания оставляет за собой право предпринимать любые действия, которые она сочтет необходимыми для защиты личной безопасности пользователей этого веб-сайта и общественности; тем не менее, Компания не несет ответственности перед кем-либо за выполнение или невыполнение действий, описанных в этом параграфе.

D. Несоблюдение вами положений пунктов (A) или (B) выше может привести к прекращению вашего доступа к веб-сайту и может повлечь за собой гражданскую и / или уголовную ответственность.

Особое примечание о содержании функций сообщества

Любой контент и / или мнения, загруженные, выраженные или отправленные с помощью любой функции сообщества или любого другого общедоступного раздела веб-сайта (включая области, защищенные паролем), а также все статьи и ответы на вопросы, кроме контента, явно разрешенного Компания, являются исключительно мнениями и ответственностью лица, представляющего их, и не обязательно отражают мнение Компании.Например, любое рекомендованное или предлагаемое использование продуктов или услуг, доступных от Компании, которое публикуется через функцию сообщества, не является признаком одобрения или рекомендации со стороны Компании. Если вы решите следовать какой-либо такой рекомендации, вы делаете это на свой страх и риск.

Ссылки на сторонние сайты

Веб-сайт может содержать ссылки на другие веб-сайты в Интернете. Компания не несет ответственности за контент, продукты, услуги или методы любых сторонних веб-сайтов, включая, помимо прочего, сайты, связанные с Веб-сайтом или с него, сайты, созданные на Веб-сайте, или стороннюю рекламу, и не делает заявлений относительно их качество, содержание или точность.Наличие ссылок с веб-сайта на любой сторонний веб-сайт не означает, что мы одобряем, поддерживаем или рекомендуем этот веб-сайт. Мы отказываемся от всех гарантий, явных или подразумеваемых, в отношении точности, законности, надежности или действительности любого контента на любых сторонних веб-сайтах. Вы используете сторонние веб-сайты на свой страх и риск и в соответствии с условиями использования таких веб-сайтов.

Права собственности на материалы

Вы признаете и соглашаетесь с тем, что все содержимое веб-сайта (включая всю информацию, данные, программное обеспечение, графику, текст, изображения, логотипы и / или другие материалы) и его дизайн, выбор, сбор, расположение и сборка являются являются собственностью Компании и защищены законами США и международными законами об интеллектуальной собственности.Вы имеете право использовать содержимое веб-сайта только в личных или законных деловых целях. Вы не можете копировать, изменять, создавать производные работы, публично демонстрировать или исполнять, переиздавать, хранить, передавать, распространять, удалять, удалять, дополнять, добавлять, участвовать в передаче, лицензировать или продавать какие-либо материалы в Интернете. Сайт без предварительного письменного согласия Компании, за исключением: (а) временного хранения копий таких материалов в ОЗУ, (б) хранения файлов, которые автоматически кэшируются вашим веб-браузером в целях улучшения отображения, и (в) печати разумного количество страниц веб-сайта; в каждом случае при условии, что вы не изменяете и не удаляете какие-либо уведомления об авторских правах или других правах собственности, включенные в такие материалы.Ни название, ни какие-либо права интеллектуальной собственности на любую информацию или материалы на веб-сайте не передаются вам, а остаются за Компанией или соответствующим владельцем такого контента.

Товарные знаки

Название и логотип компании, а также все связанные названия, логотипы, названия продуктов и услуг, появляющиеся на веб-сайте, являются товарными знаками компании и / или соответствующих сторонних поставщиков. Их нельзя использовать или повторно отображать без предварительного письменного согласия Компании.

Отказ от ответственности

Компания не несет никакой ответственности за материалы, информацию и мнения, предоставленные или доступные через Веб-сайт («Контент сайта»). Вы полагаетесь на Контент сайта исключительно на свой страх и риск. Компания не несет никакой ответственности за травмы или убытки, возникшие в результате использования любого Контента Сайта.
ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА И ПРОДУКТЫ И УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ ИЛИ ДОСТУПНЫЕ ЧЕРЕЗ САЙТ, ПРЕДОСТАВЛЯЮТСЯ НА УСЛОВИЯХ «КАК ЕСТЬ» И «ПО ДОСТУПНОСТИ», СО ВСЕМИ ОШИБКАМИ.КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ДАЕТ НИКАКИХ ГАРАНТИЙ ИЛИ ЗАЯВЛЕНИЙ В ОТНОШЕНИИ КАЧЕСТВА, ТОЧНОСТИ ИЛИ ДОСТУПНОСТИ ВЕБ-САЙТА. В частности, НО БЕЗ ОГРАНИЧЕНИЯ ВЫШЕИЗЛОЖЕННОГО, НИ КОМПАНИЯ И НИ ЛИБО, СВЯЗАННОЕ С КОМПАНИЕЙ, НЕ ГАРАНТИРУЕТ ИЛИ ЗАЯВЛЯЕТ, ЧТО ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖАНИЕ САЙТА ИЛИ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ С ПОМОЩЬЮ САЙТА, ​​БУДУТ ТОЧНЫМИ, НАДЕЖНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ИЛИ БЕСПЛАТНЫМИ ЧТО ДЕФЕКТЫ БУДУТ ИСПРАВЛЕНЫ; ЧТО ВЕБ-САЙТ ИЛИ СЕРВЕР, ДЕЛАЮЩИЙ ЕГО ДОСТУПНЫМ, СВОБОДНЫ ОТ ВИРУСОВ ИЛИ ДРУГИХ ВРЕДНЫХ КОМПОНЕНТОВ; ИНАЧЕ ВЕБ-САЙТ ОТВЕЧАЕТ ВАШИМ ПОТРЕБНОСТЯМ ИЛИ ОЖИДАНИЯМ.КОМПАНИЯ ОТКАЗЫВАЕТСЯ ОТ ВСЕХ ГАРАНТИЙ, ЯВНЫХ ИЛИ ПОДРАЗУМЕВАЕМЫХ, ВКЛЮЧАЯ ЛЮБЫЕ ГАРАНТИИ КОММЕРЧЕСКОЙ ЦЕННОСТИ, ПРИГОДНОСТИ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕННОЙ ЦЕЛИ И НЕ НАРУШЕНИЯ.
НИ ПРИ КАКИХ ОБСТОЯТЕЛЬСТВАХ КОМПАНИЯ ИЛИ ЕЕ ЛИЦЕНЗИАРЫ ИЛИ ПОДРЯДЧИКИ НЕ НЕСЕТ ОТВЕТСТВЕННОСТИ ЗА ЛЮБЫЕ УБЫТКИ ЛЮБОГО РОДА, ПРИ КАКИХ-ЛИБО ЮРИДИЧЕСКИХ ТЕОРИЯХ, ВЫЗВАННЫЕ ИЛИ В СВЯЗИ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ВАМИ ИЛИ НЕВОЗМОЖНОСТЬЮ ИСПОЛЬЗОВАТЬ ВЕБ-САЙТ, СОДЕРЖИМОЕ САЙТА, ЛЮБЫЕ УСЛУГИ, ПРЕДОСТАВЛЯЕМЫЕ НА САЙТЕ ИЛИ ЧЕРЕЗ ВЕБ-САЙТ ИЛИ ЛЮБОЙ САЙТ, ВКЛЮЧАЮЩИЙ ПРЯМЫЙ, КОСВЕННЫЙ, СЛУЧАЙНЫЙ, СПЕЦИАЛЬНЫЙ, КОСВЕННЫЙ ИЛИ КАРАТЕЛЬНЫЙ УБЫТК, ВКЛЮЧАЯ, НО НЕ ОГРАНИЧИВАЯСЬ, ЛИЧНЫЕ ТРАВМЫ, ПОТЕРЯ ПРИБЫЛИ ИЛИ УБЫТКОВ , ВИРУСЫ, УДАЛЕНИЕ ФАЙЛОВ ИЛИ ЭЛЕКТРОННЫХ СООБЩЕНИЙ, ИЛИ ОШИБКИ, УПУЩЕНИЯ ИЛИ ДРУГИЕ НЕТОЧНОСТИ НА ВЕБ-САЙТЕ ИЛИ СОДЕРЖАНИИ САЙТА ИЛИ УСЛУГ, ИЛИ ИЛИ НЕ ИСПОЛЬЗУЕТСЯ КОМПАНИЯ, И ПРЕДОСТАВЛЯЛА ЛИ КОМПАНИЯ ВОЗМОЖНОСТЬ ЛЮБЫЕ ТАКИЕ УБЫТКИ, ЕСЛИ НЕ ЗАПРЕЩЕНЫ ПРИМЕНИМЫМ ЗАКОНОДАТЕЛЬСТВОМ.

Компенсация

Вы соглашаетесь возместить и обезопасить Компанию и ее должностных лиц, директоров, агентов, сотрудников и других лиц, участвующих в веб-сайте, от любых обязательств, расходов, убытков и издержек, включая разумные гонорары адвокатам, возникающих в результате любое нарушение вами настоящих Условий использования, использование вами веб-сайта или любых продуктов, услуг или информации, полученных с веб-сайта или через него, ваше подключение к веб-сайту, любой контент, который вы отправляете на веб-сайт через любые Функция сообщества или нарушение вами каких-либо прав другого лица.

Применимое право; Международное использование

Настоящие условия регулируются и толкуются в соответствии с законами штата Пенсильвания без учета каких-либо принципов коллизионного права. Вы соглашаетесь с тем, что любые судебные иски или иски, вытекающие из настоящих Условий использования или связанные с ними, будут подаваться исключительно в суды штата или федеральные суды, расположенные в Пенсильвании, и вы тем самым соглашаетесь и подчиняетесь личной юрисдикции таких судов для цели судебного разбирательства по любому подобному действию.
Настоящие Условия использования применимы к пользователям в США, Канаде и Пуэрто-Рико. Если вы заходите на веб-сайт из-за пределов США, Канады или Пуэрто-Рико, пожалуйста, посетите соответствующий международный веб-сайт, доступный по адресу www.vwr.com, для ознакомления с применимыми условиями. Если вы решите получить доступ к этому веб-сайту из-за пределов указанных юрисдикций, а не использовать доступные международные сайты, вы соглашаетесь с настоящими Условиями использования и тем, что такие условия будут регулироваться и толковаться в соответствии с законами США и штата. Пенсильвании и что мы не делаем никаких заявлений о том, что материалы или услуги на этом веб-сайте подходят или доступны для использования в этих других юрисдикциях.В любом случае все пользователи несут ответственность за соблюдение местных законов.

Общие условия

Настоящие Условия использования, в которые время от времени могут вноситься поправки, представляют собой полное соглашение и понимание между вами и нами, регулирующее использование вами Веб-сайта. Наша неспособность реализовать или обеспечить соблюдение какого-либо права или положения Условий использования не означает отказ от такого права или положения. Если какое-либо положение Условий использования будет признано судом компетентной юрисдикции недействительным, вы, тем не менее, соглашаетесь с тем, что суд должен попытаться реализовать намерения сторон, отраженные в этом положении и других положениях Условия использования остаются в силе.Ни ваши деловые отношения, ни поведение между вами и Компанией, ни какая-либо торговая практика не может считаться изменением настоящих Условий использования. Вы соглашаетесь с тем, что независимо от какого-либо закона или закона об обратном, любые претензии или основания для иска, вытекающие из или связанные с использованием Сайта или Условий использования, должны быть поданы в течение одного (1) года после такой претензии или причины. иска возникла или будет навсегда запрещена. Любые права, прямо не предоставленные в настоящем документе, сохраняются за Компанией.Мы можем прекратить ваш доступ или приостановить доступ любого пользователя ко всему сайту или его части без предварительного уведомления за любое поведение, которое мы, по нашему собственному усмотрению, считаем нарушением любого применимого законодательства или наносящим ущерб интересам другого пользователя. , стороннего поставщика, поставщика услуг или нас. Любые вопросы, касающиеся настоящих Условий использования, следует направлять по адресу [email protected].

Жалобы на нарушение авторских прав

Мы уважаем чужую интеллектуальную собственность и просим наших пользователей поступать так же.Если вы считаете, что ваша работа была скопирована и доступна на Сайте способом, который представляет собой нарушение авторских прав, вы можете уведомить нас, предоставив нашему агенту по авторским правам следующую информацию:

  • электронная или физическая подпись лица, уполномоченного действовать от имени правообладателя;

  • описание работы, защищенной авторским правом, в отношении которой были нарушены ваши претензии;

  • идентификация URL-адреса или другого конкретного места на Сайте, где находится материал, который, по вашему мнению, нарушает авторские права;

  • ваш адрес, номер телефона и адрес электронной почты;

  • ваше заявление о том, что вы добросовестно полагаете, что спорное использование не разрешено владельцем авторских прав, его агентом или законом; и

  • ваше заявление, сделанное под страхом наказания за лжесвидетельство, о том, что приведенная выше информация в вашем уведомлении является точной и что вы являетесь владельцем авторских прав или уполномочены действовать от имени владельца авторских прав.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *